摘要：目的建立一种基于环介导等温扩增(LAMP)的结核分枝杆菌核酸快速检测方法,并应用于出入境人群的肺结核样本检测。方法针对结核分枝杆菌插入序列6110(IS6110)设计5组LAMP引物,利用LAMP实时浊度仪筛选出1组最佳引物,用20株临床致病菌株进行特异性检测,用10倍梯度稀释法进行灵敏度测定,用25份痰培养阳性样本对阳性率进行评估。结果筛选出1组最佳引物TB159,该引物特异性良好,与20株常见致病菌株无交叉反应。此方法的最低检测限为24.77 pg/μl,对25份痰培养阳性样本检测的阳性率为100%。结论建立了一种特异性好、灵敏度高的LAMP快速检测方法,可以应用于结核病检测。

摘要：目的建立入境微生物菌剂泛养副球菌的形态学、生化及分子生物学检测方法。方法用形态学和生化实验筛选最佳培养条件,确定以泛养副球菌ccdA基因为靶基因设计特异性引物和探针,建立泛养副球菌实时荧光PCR检测方法。通过平板计数典型菌落定量分析混合菌剂中的泛养副球菌。结果泛养副球菌的最佳培养条件为35℃±1℃48 h,最适合培养基为硫酸链霉素胰蛋白胨大豆琼脂。实时荧光PCR检测泛养副球菌的灵敏度为0.032 ng/反应,检测混合菌剂中泛养副球菌菌量的灵敏度可达260 CFU/ml。结论建立的泛养副球菌检测方法可以量化入境混合微生物菌剂菌种,有效识别评估混合菌剂中的活菌数。