摘要：C8orf4,也称为甲状腺癌1(thyroid carcinoma 1,TC1),最初是从甲状腺癌及其周围正常甲状腺组织克隆而来,在脊椎动物中普遍表达,具有跨物种的序列保守性。研究表明,C8orf4在肿瘤中高表达,参与各种癌细胞间信息通讯,是一种与癌症和炎症有关的新型调节因子,并通过调节NF-κB的转录增强炎症反应,但对病毒的影响知之甚少。为研究C8orf4编码蛋白对猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)复制的影响,将PEDV接种于Vero细胞,通过qRT-PCR和Western blot检测不同时间点PEDV对C8orf4表达的影响;设计并合成表达C8orf4基因的真核表达载体pcDNA3.1-C8orf44-His和特异性siRNA,通过过表达和抑制C8orf4表达,利用qRT-PCR和Western blot检测C8orf4对PEDV复制的影响;进一步,通过过表达C8orf4编码蛋白,明确C8orf4编码蛋白对PEDV复制周期各阶段的增殖变化。随着PEDV感染时间的增长,细胞中C8orf4表达呈上升趋势;过表达C8orf4显著抑制PEDV复制,而干扰C8orf4表达促进PEDV复制,并且C8orf4编码蛋白主要作用于PEDV复制周期的生物合成阶段。本研究表明C8orf4编码蛋白具有抑制PEDV复制的作用,为C8orf4的功能研究提供参考,为抗PEDV复制机制研究提供基础。

摘要：本研究针对猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的N基因保守序列设计特异性引物和探针,构建重组质粒,建立针对TGEV N基因的Taq Man荧光定量PCR检测方法,用于临床快速诊断和实验室检测。结果显示,该方法特异性好,与其他具有相似临床症状的猪源病毒相比,不存在交叉反应,Ct值在1×10^(9)~1×10^(1)copies/μL的范围内具有很好的线性关系,R^(2)=0.99。该方法最低检测限为10 copies/μL,标准曲线为y=-3.0587x+37.7,斜率为-3.0587。该方法重复性好、敏感度高、特异性强,适用于临床样品中TGEV抗原核酸的检测和实验室病毒生长特性的研究,为准确定量及诊断TGEV提供了有效的试验手段和检测工具。

摘要：为了快速、准确检测非洲猪瘟病毒(African swin fever virus,ASFV),本文根据我国流行毒株ASFV SY18(GenBank ID:MH766894.1)已公布的K205R基因序列设计并合成特异性引物及探针,建立针对K205R基因的TaqMan荧光定量PCR检测方法。经过特异性试验、敏感性试验、重复性试验和临床样品检测试验分析显示,本文建立的TaqMan荧光定量PCR检测方法Ct值与标准品在1×10^(11)~1×10^(2)copies/μL范围内具有很好的线性关系,相关系数为0.998,斜率为-2.797,检测下限为10^(2)copies/μL,与其他能引起相似临床症状的猪源病毒无交叉反应。重复性试验结果显示,组间与组内变异系数均小于1.53774%,重复性好。本方法适用于临床样品及本实验室构建的表达ASFV K205R基因的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒的鉴定及检测,对ASFV快速检测及ASF早期诊断有重要意义。

摘要：本试验对不同含水量及原料组合对薯渣混贮效果的影响进行研究,并筛选出适宜薯渣混贮的最佳组合。采用双因素试验设计,用塑料桶将薯渣与棉籽粕和/或菜籽粕[薯渣+菜籽粕(鲜重比例为1∶1,SC)组合、薯渣+棉籽粕(鲜重比例为1∶1,SM)组合、薯渣+菜籽粕+棉籽粕(鲜重比例为2∶1∶1,SCM)组合]按重量比混合并搅拌均匀,并调节含水量分别为45%、50%、55%。将混合后的具有不同含水量的混贮原料分别装入5 L密封塑料桶并压实,进行混贮发酵,共9个处理,每个处理3个重复。室温条件下贮藏70 d后用四分法进行取样,进行样品发酵品质、营养品质、营养物质瘤胃降解率(48 h)以及有氧稳定性的测定。结果显示:低含水量(45%)条件下SC组合的pH、氨态氮/总氮(AN/TN)最低,乳酸(LA)含量最高,且各处理均未检测到丁酸(BA);低含水量(45%)条件下SC组合混贮后较其他组合显著或极显著降低了中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)的含量(P<0.05或P<0.01),极显著提高了淀粉的含量(P<0.01);在有氧暴露12 d内各处理均未发生有氧腐败,有氧稳定性时间均超过240 h;低含水量(45%)条件下SC组合的干物质(DM)、粗蛋白质(CP)、NDF、ADF和淀粉的瘤胃降解率(48 h)均为最高。综上所述,从营养品质、发酵品质以及营养物质瘤胃降解率综合来看,以低含水量(45%)条件下以薯渣与菜籽粕按照鲜重1∶1的比例混贮效果较好。

摘要：该试验旨在研究冬春过渡季节漏缝地板密闭羊舍的温湿参数动态变化规律,采用温湿度记录仪对漏缝地板缝隙空间和上部空间的温湿度进行连续检测,同时利用热像仪对漏缝板条和墙体内外表面温度进行测定,试验周期1个月。结果表明:(1)从垂直空间看,地板漏缝空间与上部空间的日均温和日均湿度表现出显著性差异(P0.05),而南、北墙温度各时段均表现为南墙高于北墙(P<0.01),最高温差达14.32℃。另外,早晚时段东、西墙内、外表面的下部温度高于中上部(P<0.01),而南、北墙内、外表温度则表现为下部低于中部或上部(P<0.01),可见,东西朝向舍利于舍内饲养区域的保温。该研究结果可为密闭漏缝地板舍的设计提供参考数据。

摘要：为探讨发酵中草药饲料添加剂在防控奶牛产后酮病方面的应用效果及适宜添加剂量,采用完全随机区组设计,依据胎次、体况评分、上一泌乳周期单产相近的原则,选20头新产牛随机分为4组,每组5头牛。I组为对照组,II组、Ⅲ组、IV组为试验组。对照组饲喂常规日粮,试验组于产后4~30天在常规日粮中每天每头牛按低、中、高三个水平(80、100、120 g)添加发酵中草药饲料添加剂。每头牛早上饲喂的时候人工饲喂添加剂,保证每头牛每天按规定添加量完全饲喂。每头牛试验期27 d,每9 d为一个采样周期。其他饲养管理按牛场原有程序常规进行。试验结果显示:由于奶牛个体差异较大,虽然添加不同水平对产奶量影响不显著,但Ⅲ组产奶量提高水平最大,比I组提高51.34%。乳指标中Ⅲ组到第30天体细胞数显著低于其他组(P 0.05),其他指标差异不显著。Ⅲ组比I组酮病发病率、产后首次配种时间、妊娠配种次数分别降低100%、3.84%、8.57%,首次情期受胎率提高60%,乳房炎降低100%。综合考虑,该发酵中草药饲料添加剂对奶牛产奶量、乳品质、血液葡萄糖、β-羟丁酸、游离脂肪酸、产后酮病、繁殖性能及其他疾病死淘情况均具有改善作用,整体Ⅲ组表现较优,建议该发酵中草药饲料添加剂在新产牛中的推荐用量为100 g/(头·d)。

摘要：【目的】多异瓢虫Hippodamia variegata是新疆棉田常见的捕食性天敌,成虫和幼虫均可取食多种作物上的蚜虫,为深入解析多异瓢虫对蚜虫的嗅觉识别机制,本研究分析了多异瓢虫成虫及幼虫对蚜虫主要报警信息素和性信息素组分的电生理和趋向选择行为,研究结果将为设计新型多异瓢虫行为调控剂等害虫生物防控策略提供数据支撑。【方法】利用触角电位技术(Electroantennography,以下简称EAG),测试了多异瓢虫3-5日龄成虫和2-3龄幼虫触角对于蚜虫报警信息素反式-β-法尼烯(E-β-farnesene,EBF)和性信息素假荆芥内酯(Z,E-Nepetalactone)的触角电位反应;通过Y-型嗅觉仪分析了多异瓢虫3-5日龄成虫和2-3龄幼虫对2种信息素的趋向选择行为。【结果】EAG结果表明,2种信息素组分均可使多异瓢虫雌、雄成虫及幼虫产生触角电位反应,且随着化合物浓度的递增,触角电位值显著增加;趋向选择行为试验发现,多异瓢虫幼虫可被高浓度的EBF(100μg/μL)显著吸引,雄成虫可被低浓度的EBF(10μg/μL)显著吸引,以上2种浓度的EBF对雌成虫均具有引诱作用。此外,高浓度的假荆芥内酯(100μg/μL)对雌、雄成虫具有显著的引诱作用,而低浓度的假荆芥内酯(10μg/μL)可触发幼虫的趋向选择行为。【结论】本研究发现蚜虫报警信息素EBF和性信息素假荆芥内酯对多异瓢虫成虫和幼虫均具有电生理和行为活性,推测多异瓢虫可通过识别利用蚜虫种内信息素组分定位蚜虫种群,研究结果为开发天敌昆虫行为调控剂等新型害虫绿色防控策略提供了理论依据。

摘要：为建立针对猪瘟病毒(CSFV)的快速诊断方法,根据猪瘟病毒石门强毒株(GenBank ID:AF092448.2)已公布的Erns基因序列设计并合成特异性引物及探针,建立针对Erns基因的TaqMan荧光定量PCR检测方法,验证其特异性、敏感性、重复性,并进行临床样品及重组病毒的检测。结果显示,建立的TaqMan荧光定量PCR检测方法的Ct值与标准品在1×10^(9)~1×10^(2)copies/μL范围内具有很好的线性关系,相关系数为0.99,斜率为-3.661 5,检测下限为1.0×10^(1)copies/μL,与其他能引起相似临床症状的猪源病毒无交叉反应。重复性试验结果显示,组间与组内变异系数均小于2.925 02%,证实该方法重复性好。本方法适用于临床样品中CSFV抗原核酸的检测,同时也可以用于CSFV在细胞上增殖情况的检测和本实验室构建的表达CSFV Erns基因的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒的鉴定及检测,对于临床上CSFV抗原检测、CSF诊断及CSFV的实验室研究有重要意义。

摘要：为建立一种可以快速检测鸽疱疹病毒(Pi HV)、鸽圆环病毒(PiCV)和鸽源腺病毒(PiADV)的三重PCR方法,本研究针对3种病原的保守区域分别设计合成了3对特异性扩增引物,在优化反应体系、反应条件的基础上,分别对其特异性、敏感性和重复性进行验证,建立了能够快速检测以上3种病原的多重PCR方法,并对121份临床样品进行了检测。通过反应条件优化,确定PiHV、PiCV、PiADV引物体积比为1∶1∶2,退火温度为58℃时,扩增效果最好。敏感性试验显示,PiHV、PiCV和PiADV的最低检出量均为1.0×101copies/μL。特异性试验显示,建立的多重PCR方法与鸽新城疫病毒(NDV)、鸽痘病毒(PPV)、鸽轮状病毒(PiRV)没有特异性反应。利用本研究建立的多重PCR方法对121份临床样品进行检测,结果与单重PCR结果一致。综上所述,本研究建立的方法可用于鸽养殖场或公棚的PiHV、PiCV、PiADV快速检测。

摘要：目前平养蛋鸭只能采用家系选育法而不能采用个体选育法,这是因为在平养条件下很难实现蛋鸭与所产蛋的准确对应。蛋鸭家系选育法的主要缺点是复杂,劳动强度大,准确度低,严重影响选种的精度和效率。在平养环境下实现蛋鸭个体选育法的关键在于找到一种智能化无应激的精确识别和标记蛋鸭个体与其所产种蛋的方法。该文以蛋鸭为研究对象,提出了一种新型的平养蛋鸭种蛋智能收集和标记系统设计框架,给出了上位机和下位机的组网拓扑图和逻辑控制算法。该系统采用射频技术和光电传感器技术融合,实现了蛋鸭产蛋个体的准确识别,识别正确率为100%。利用非接触式喷码打印技术将蛋鸭个体编号信息记录在其所产种蛋蛋壳上,解决了蛋鸭个体与所产鸭蛋对应关系的无应激自动记录难题。设计并实现了集种蛋收集和标记于一体的新型集蛋装置。该装置由集蛋区、调整区和喷印区3部分组成。集蛋区采用梯形凹槽结构和EVA海绵弹性触面设计,消除了种蛋在加速滚落过程中积累的动能,种蛋的破损率低于1%。调整区采用滑触式种蛋姿态导向设计,种蛋姿态调整的合格率达到了99.80%,保证了蛋壳长轴截面作为喷印面,使喷印的字符最大程度保持完整性。喷印区采用连续式油墨喷码机完成蛋鸭个体与种蛋对应关系的标记,喷码标识清晰可读合格率为98.2%。该研究可为蛋鸭生产过程中个体产蛋行为分析和种蛋信息的自动收集提供参考。