摘要：目的构建靶向PIK3CA(P110α)基因的RNA干扰慢病毒载体。方法针对PIK3CA-mRNA(NM_006218)设计4个RNA干扰靶点序列和一个阴性对照靶点,构建慢病毒转移质粒pGCL-GFP。构建成功的RNA干扰质粒与PIK3CA表达质粒共转染293T细胞,荧光显微镜下观测转染效果,Western Blot检测PIK3CA蛋白表达,筛选出干扰效果最好的RNA干扰质粒。将该质粒与两种辅助包装原件载体质粒共转染293T细胞,包装成慢病毒并检测其滴度。结果 4个靶点和阴性对照靶点的RNA干扰质粒均构建成功;通过Western Blot检测获得最有效干扰靶点,并成功包装成滴度为2×108TU/ml的慢病毒。结论成功构建可供感染的PIK3CA基因RNA干扰慢病毒载体,为进一步研究PIK3CA功能和用慢病毒进行卵巢癌基因治疗奠定了基础。