摘要：背景:骨髓干细胞移植可改善心功能、预防心室重构,目前用于移植的成体骨髓干细胞有骨髓单个核细胞、骨髓间充质干细胞和内皮祖细胞等,不同种类的骨髓干细胞移植后的效果及具体机制尚不清楚。目的:比较自体骨髓单个核细胞、骨髓间充质干细胞冠状动脉移植对急性心肌梗死后心室重构的影响。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2005-03/2006-12在河北省人民医院临床研究中心、河北医科大学电镜室及大连宝生物进行。(basic fibroblast growth factor,bFGF)材料:36只冀中白猪随机分为4组:假手术组6只、模型组10只、骨髓单个核细胞组10只、骨髓间充质干细胞组10只。方法:采用梯度密度离心法分离培养猪自体骨髓单个核细胞,以贴壁法分离培养猪自体骨髓间充质干细胞,移植前均行胶体金标记。除假手术组外,其余3组均以球囊导管压迫冠状动脉前降支的方法建立猪急性心肌梗死模型。造模后90min,经导管由冠状动脉腔内骨髓单个核细胞组移植自体骨髓单个核细胞(6.0±1.3)×107个,骨髓间充质干细胞组移植自体骨髓间充质干细胞(4.5±2.1)×107个,培养28d。主要观察指标:光镜及电镜观察心肌组织病理学改变;超声检查心功能变化;免疫组织化学检测心肌血管数、心肌细胞凋亡、心肌组织核因子κB及肌钙蛋白I阳性表达情况,及其与心功能的关系;RT-PCR法检测心肌血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)mRNA的表达,及其与心功能的关系。结果:①骨髓间充质干细胞组在梗死区、梗死边缘区均可见大量血管增生,冠脉血管周围可见异常细胞团生长,骨髓单个核细胞组有较多的毛细血管"芽生"现象。②细胞移植前各组心功能指标基本相似(F=1.550,P>0.05)。移植后28d与模型组比较,其余3组左心室射血分数均明显降低(F=5.30,P<0.05)。③与模型组比较,骨髓单个核细胞组梗死区及梗死边缘区的血管数明显增加(F=29.56～34.87,P<0.01),骨髓间充质干细胞组无变化;移植细胞两组的梗死区、梗死边缘区心肌细胞凋亡率均显著降低(F=14.31～35.34,P<0.01),肌钙蛋白I阳性率均明显升高(F=19.05,P<0.01);梗死边缘区核因子кB阳性率均明显降低(F=19.05,P<0.01)。④骨髓单个核细胞组梗死边缘区VEGF基因的表达显著高于模型组、骨髓间充质干细胞组(F=49.41,P<0.01)。骨髓间充质干细胞组梗死边缘区bFGF基因的表达显著高于模型组、骨髓单个核细胞组(F=4.71,P<0.01)。⑤左室射血分数与心肌细胞凋亡率、心肌核因子κB呈负相关(r=-0.4411,P<0.05;r=-0.5796,P<0.01);与血管数、VEGF及bFGF表达呈正相关(r=0.775,P<0.01;r=0.5651,P<0.05;r=0.5735,P<0.05)。结论:经冠脉自体骨髓单个核细胞或骨髓间充质干细胞移植均可减轻心肌梗死后左心室重构,心功能的改善与干细胞移植后增加心肌血管数量及心肌VEGF,bFGF表达、减少心肌细胞凋亡及核因子κB水平有关。骨髓单个核细胞移植促心肌血管增生及VEGF的表达均优于骨髓间充质干细胞,而后者促bFGF基因表达的作用优于前者。

摘要：背景:骨髓间充质干细胞在宿主心肌中能够生长,并可在心肌环境诱导下分化,改善心脏功能,但目前骨髓干细胞分化过程中生物学特性尚不甚清楚。目的:观察经5-氮胞苷诱导培养后,骨髓间充质干细胞体外缝隙连接蛋白43的表达及电生理特性变化。设计、时间及地点:细胞学体外对照观察,于2007-07/2009-02在河北省人民医院心脏中心完成。材料:2月龄雄性冀中白猪24只,购自河北医科大学实验动物中心。方法:无菌条件下抽取猪双侧股骨骨髓,Percoll密度梯度法体外分离培养骨髓间充质干细胞,传至第2代后,加入10μmol/L的5-氮胞苷,24h后更换为不含诱导剂的DMEM培养基继续培养,分别于诱导后1,2,3周进行指标检测;并设立未经5-氮胞苷诱导的对照组。实验猪抽取骨髓后麻醉,取心室肌,组织块酶消化法分离培养正常心室肌细胞。主要观察指标:ABC法免疫细胞化学染色检测缝隙连接蛋白43的表达,以膜片钳全细胞记录模式测定Ito电流密度及动作电位。结果:5-氮胞苷诱导后1,2周,部分骨髓间充质干细胞表达缝隙连接蛋白43,呈核周散在分布的棕黄色颗粒;诱导后3周缝隙连接蛋白43阳性率为95%,细胞密度大的区域出现类似正常心肌的闰盘结构。在+80mV时与正常心室肌细胞比较,未诱导对照组及诱导1,2周的骨髓间充质干细胞Ito电流密度均明显降低(P0.05)。5-氮胞苷诱导1,2周的骨髓间充质干细胞未能检测到动作电位,诱导3周后可检测到动作电位,与正常心室肌细胞相似。结论:骨髓间充质干细胞经5-氮胞苷体外诱导3周后,与正常心肌具有相似的缝隙连接蛋白43表达能力及电生理特性。

摘要：基于大量循证医学研究证据，他汀类药物已被视为动脉粥样硬化性心血管疾病药物治疗的基石，是惟一经大规模临床试验证实可以逆转动脉粥样硬化病变的药物。随着近年来对此类药物研究的不断深入，人们发现除调脂作用以外，他汀类药物还可能通过多种机制发挥有益作用，特别是改善内皮功能与抗炎作用。值得关注的是，近年来的研究发现，他汀类药物在败血症的预防与治疗中可能具有一定效果，其确切疗效还有待于设计严谨的大规模临床试验证实，但这些发现至少给予我们一个重要启迪：

摘要：背景：炎性反应及内皮损伤在动脉粥样硬化疾病的发生、发展及冠状动脉介入治疗后再狭窄的过程中起重要作用，但炎性因子白细胞介素8具体作用机制尚未明确。目的：观察兔腹主动脉球囊扩张过程中白细胞介素8水平表达对血管内皮功能的影响。设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2008—01／2009—03在河北省人民医院心脏中心导管室及临床研究中心完成。材料：新西兰大白兔24只，体质量2．5-3．5kg，雌雄不拘，用于制备球囊扩张损伤模型。方法：24只大白兔按抽签法随机分为实验组和对照组，每组12只。实验组穿刺股动脉后留置鞘管，经鞘管送入球囊行球囊扩张，拉伤腹主动脉。对照组仅穿刺留鞘，不进行球囊拉伤。主要观察指标：分别于术前、术后4h，1d，3d，7d，14d取耳缘静脉血，采用酶联免疫吸附双抗夹心法测定白细咆介索8、血管性假性血友病因子，放射免疫法测定内皮素1，利用硝酸还原酶法测定一氧化氮水平，2周后复查造影及苏木精一伊红染色观察腹主动脉管腔、管壁变化情况。结果：①兔腹主动脉球囊损伤后炎性因子白细胞介素8水平4h后即开始明显升高，24h后血管性假性血友病因子、内皮索1水平明显升高，一氧化氮水平明显降低，与术前及对照组相比，差异具有显著性意义（P〈0．01）。②相关分析显示，白细胞介素8水平表达与血管性假性血友痫因子、内皮素1水平呈正相关，相关系数r=0．532，0．619（P〈0．05），白细胞介素8水平表达与一氧化氮水平呈负相关，相关系数，r=-0．517（P〈0．05）。③球囊扩张拉伤后2周，实验组动物腹主动脉拉伤处与对照组相比管腔明显狭窄。④苏木精-伊红染色可见对照组动脉内膜光滑，内皮下有少量结缔组织，无平滑肌细胞存在，中膜平滑肌细胞呈梭形，环绕管腔排列。实验组动脉内膜、中膜增厚，管腔明显狭窄，内膜下平滑肌细胞增生，而且排列不规则，弹性纤维层结构不清，斑块隆起明显，内含泡沫细胞。结论：球囊扩张后引起炎性反应增强，激发加重了内皮功能损伤，引起腹主动脉管腔狭窄。在此过程中，白细胞介素8可能起到关键的调节作用。

摘要：背景:炎性反应在动脉粥样硬化疾病的发生与发展,以及冠状动脉介入治疗后再狭窄的过程中起重要作用,但具体机制尚未明确。目的:观察兔腹主动脉球囊扩张后炎性因子白细胞介素8、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α以及C-反应蛋白不同时间点的水平变化。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-01/08在河北省人民医院心脏中心导管室及临床研究中心完成。材料:选取8～12月龄新西兰大白兔24只,雌雄不拘,体质量2.50～3.25kg。方法:24只新西兰大白兔,随机抽签法分为实验组和对照组,每组12只。实验组穿刺股动脉后留置鞘管,经鞘管送入球囊行球囊扩张,拉伤腹主动脉。对照组仅穿刺留鞘,不进行球囊拉伤。分别于实验前、实验后4h,1,3d,1,2周,耳缘静脉采血4mL,3000r/min离心20min后,取上清液得血清标本,-80℃冰箱统一保存。主要观察指标:①酶联免疫吸附法分别测定实验前后不同时间点白细胞介素8、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α和C-反应蛋白水平。②白细胞介素8水平与其他3种因子的相关性分析。③造影观察实验动物腹主动脉球囊损伤前后的形态学改变。结果:24只新西兰大白兔均进入结果分析。①兔腹主动脉球囊损伤后炎性因子白细胞介素8、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α以及C-反应蛋白水平明显升高,与术前及对照组相比,差异具有显著性意义(P<0.01)。②各种炎性因子中,白细胞介素8水平最先升高,达峰值时间最短,相关分析显示,白细胞介素8水平表达与炎性反应标志物C-反应蛋白以及白细胞介素6、肿瘤坏死因子α呈正相关,相关系数r分别为0.569,0.673,0.597(P均<0.05)。③球囊扩张拉伤后2周,实验组动物腹主动脉拉伤处较对照组管腔明显狭窄。结论:兔腹主动脉球囊扩张后引起炎性因子白细胞介素8、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α以及C-反应蛋白水平升高,导致动脉管腔狭窄,其中白细胞介素8在此过程中发挥了重要作用。