摘要：建立了检测动物源性食品中猪、牛成分的PCR结合变性高效液相色谱技术,为牛、羊成分的鉴别提供一种新的分子诊断技术。以猪、牛的线粒体DNA为靶基因,设计特异性PCR引物。双重PCR扩增后,DHPLC分析。经优化DHPLC最佳条件为:使用PS-DVB&C18 DNASep色谱柱(4.6 mm×50 mm,粒度3μm),设定50℃柱温,起始流动相为:45%缓冲液A和55%缓冲液B,流速0.9 m L/min;上样量:PCR产物5μL。结果表明:DHPLC法具有良好的特异性,仅能检出猪、牛源成分,而与羊、鸡、鸭源成分无交叉反应;方法的灵敏度可以达到1 000 copies核酸。

摘要：利用正交设计分别配制含有三种防腐剂、四种甜味剂的模拟水样,采用核独立成分分析(KICA)处理模拟水样与加入不同含量标准品的饮料样品的紫外光谱(UV)数据,得到其中待测添加剂或背景成分的UV轮廓的独立组分(IC)信息,以IC的系数矩阵进行支持向量回归(SVR)分析,建立模拟样品中防腐剂与甜味剂的UV-KICA-SVR预测模型。添加不同含量水平添加剂的碳酸饮料样品,采用KICA处理其测试得到的UV光谱数据,得到与添加剂对应的IC信息及量,加入量与预测量线性回归方程截距即为饮料中添加剂含量。利用化学计量学"盲源信号分离"方法提取饮料样品中的待测添加剂IC信息与样品基质信息,利用SVR对解析得到的IC信号回归分析建模,改进传统单一组分测定的标准加入法,建立了碳酸饮料样品中防腐剂和甜味剂高通量筛查分析的新方法。方法用于测定碳酸饮料中山梨酸钾,苯甲酸钠、对羟基苯甲酸甲酯钠三种防腐剂与糖精钠、安赛蜜,阿斯巴甜和甘草酸铵四种甜味剂含量,检测限(LOD)为0.2~1.0 mg·L^(-1),测定结果与传统的色谱方法相当。

摘要：为了能够快速准确检测出市场中掺假牛肉制品,采用Taq Man探针法,建立一种用于快速有效检测牛肉制品中牛源性成分的荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)方法。选择Gen Bank中牛β-actin基因的保守序列,设计并合成特异性引物及Taq Man探针,以构建的p MD-18T-96-beef质粒为标准品,优化反应条件。结果表明:重组质粒标准品经PCR、测序和酶切鉴定正确,建立的标准曲线Ct值与模板拷贝数对数值之间呈良好的线性关系,相关系数为0.98,斜率为-3.345,敏感度为46.1 copies/μL。特异性实验表明,用该方法检测猪肉、羊肉、鸡肉、鸭肉、鹅肉等非牛肉制品结果均为阴性。批内重复实验变异系数均小于0.98%,批间重复实验变异系数均小于0.33%,表明该方法重复性良好。用建立的荧光定量PCR方法与SN/T 2051—2008《食品、化妆品和饲料中牛羊猪源性成分检测方法实时PCR法》同时对市场上40份牛肉加工品进行检测,结果显示,本方法检测有3份样品为牛源成分阴性,与SN/T 2051—2008方法检测结果相同。可见,本实验建立的荧光定量PCR方法具有特异、敏感、快速的特点,适用于检测市场中肉类掺假的行为。

摘要：根据GenBank中炭疽杆菌的主基因组上gyrA基因,毒力因子px01上pagA基因和侵袭因子px02上的CapA基因分别设计引物和对应Taqman-MGB探针,建立了检测炭疽杆菌的实时定量PCR方法。该方法具有良好特异性,仅对炭疽杆菌检测结果为阳性,而与蜡样芽孢杆菌、苏云金杆菌、巨大芽孢杆菌、沙门菌、大肠杆菌、链球菌、铜绿假单孢杆菌无交叉反应,检测灵敏度最低可达100copies/μL。对24份皮毛盲样和120份送检样品检测结果表明建立的定量PCR方法与商业化定量PCR试剂盒的符合率为100%。Taqman-MGB探针方法灵敏、特异、重复性好,可应用于炭疽杆菌的快速诊断与监测。

摘要：采用正交设计法配制16组包含苯甲酸钠、山梨酸钾、对羟基苯甲酸甲酯钠3种防腐剂水性混合样品,分别测其紫外-可见(UV)光谱.果汁样品通过离心,取上清溶液,稀释一定的倍数测定其UV光谱.将果汁样品紫外光谱数据与模拟水样光谱融合得到增广光谱矩阵,采用独立成分分析(ICA)提取增广光谱矩阵中独立组分(IC)的浓度轮廓,将实际样品中3种防腐剂以外的其他成分作为背景加以扣除,以模拟标准样品3种防腐剂对应的浓度轮廓回归分析得到3种防腐剂测定的独立成分回归(ICR)模型,实际样品中防腐剂的IC值代入ICR模型预测得到相应防腐剂含量.将浓度IC轮廓进行最小二乘回归分析得到与其对应的光谱轮廓,可用作防腐剂与作为其他成分的背景信号的定性分析.方法用于市售某柠檬饮料中防腐剂测试分析,ICR模型的线性相关系数(R)均在0.99以上,测定结果与采用高效液相色谱法相当.

摘要：探讨纺织品中快速检测沙门氏菌的方法。应用了环介导等温扩增技术结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术建立纺织品中沙门氏菌的快速检测方法。沙门氏菌invA基因序列具有致病性菌株属特异性,根据其特点设计出一套沙门氏菌环介导等温引物。环介导等温扩增结果为可疑或阳性时,分离菌株,通过基质辅助技术快速鉴定结果。选择典型参考菌株做特异性试验;沙门氏菌菌液稀释成不同梯度做灵敏度试验。试验结果表明:该方法特异性好,灵敏度较高,检测限可达4.6CFU/mL。认为:该方法可用于快速检测纺织品中沙门氏菌。

摘要：采用正交设计设计法设计包含柠檬黄、日落黄、诱惑红、苋菜红、胭脂红及亮蓝6种色素水性混合样品，分别测试其紫外-可见光谱（UV）并用支持向量回归（SVR）得到6种色素同时测定的UV-SVR模型．饮料样品经超声去除CO2后分别添加7水平不同含量的色素标准品并分别测定其UV光谱，利用UV-SVR模型预测其中色素含量，线性回归分析后得到多种色素在饮料中的含量．结果表明，基于UV-SVR-标准加入法多种色素含量同时测定，6种色素含量预测值与实际值的回归分析相关系数在0．99以上，相对标准偏差（RSD）为0．5％～2．5％；用于实际饮料样品测定时，能够同时预测其中多种色素的含量，测定结果与高效液相色谱（HPLC）法相比绝对误差小于1mg·L^-1．

摘要：根据甲鱼线粒体细胞色素b基因中的保守区域设计甲鱼特异性引物及Taq Man探针,建立一种用于定性检测甲鱼的实时荧光PCR方法。结果表明,所建立的方法与其他肉源性成分均无交叉反应,证明本研究所设计的引物与探针对甲鱼成分特异性检测良好,最低检出浓度为0.005ng/μL。应用本方法对市售含有甲鱼成分的商品进行检测,发现假冒甲鱼肉的商品确实存在。结论:本研究所建立的方法特异性强,灵敏度高,可用于对肉制品中甲鱼成分的掺假鉴别。

摘要：目的建立检测食品中沙门氏菌的双启动寡核苷酸-聚合酶链式反应(dual priming oligonucleotide-polymerase chain reaction,DPO-PCR)方法。方法以沙门氏菌invA基因为靶基因设计一对DPO引物,优化条件,对180份熟肉样本同时进行DPO-PCR和细菌分离鉴定。结果 DPO-PCR方法退火温度在52、57、62℃均可对靶基因高效扩增。方法特异性好,仅对沙门氏菌为阳性结果,而对金黄色葡萄球菌、志贺氏菌、大肠杆菌O157:H7、β溶血性链球菌、铜绿假单孢菌无交叉反应。方法灵敏度可达4.3×10~2 CFU/mL。与细菌分离鉴定相比,两者检测结果完全一致。结论该方法快速、精准,可作为食品中沙门氏菌的快速检测方法。

摘要：随着人们生活水平的提高,食品安全问题越来越受到重视,食品的安全监管也愈収重要。本文设计的基于HACCP体系的食品安全电子管理系统,运用危害分析与关键控制点管理体系的思想,采用信息化管理和数据关联分析手段,将食品生产划分为多个生产环节,为每个生产环节配置对应的物理性、化学性和微生物等各类危害项目及其对应的限量范围。系统可以根据食品的实验室检测结果,収现不合格的检测项目,同时可以定位到相应的食品生产环节上。借助此系统,可以快速准确収现食品生产问题,更有针对性的指导改迚食品生产,实现了对食品生产全流程的监管,提高了监管的效率和效果。