摘要：目的建立一种敏感、特异和快速诊断人呼吸道合胞病毒(RSV)感染的方法。方法选择RSV基因组中高度保守的 F 基因作为扩增靶序列,独立设计合成了两对引物,建立了一个完整的逆转录套式聚合酶链反应(PCR)检测 RSV RNA 的方法。结果对引物进行特异性实验,证明其具有高度特异性;对引物进行敏感度实验,测定其敏感度为10TCID_(50)/ml(TCID_(50)为半数组织培养感染量)。对101例急性下呼吸道感染患儿的鼻咽部分泌物标本进行检测,发现48例阳性,阳性率为47.5%;同时用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶桥联酶标法进行检测,发现40例阳性,阳性率为39.6%。两种方法对比,差异无显著性(P>0.05)。结论该方法具有快速、敏感、特异和观察结果客观等优点,为国内逆转录套式 PCR 用于临床快速诊断 RSV 感染、试剂盒的研制和开发奠定了基础。

摘要：目的： 有效去除霍乱毒素Ａ 亚基（ ＣＴＡ） 的毒性作用而保存其佐剂性能。方法： 采用ＰＣＲ 体外定点突变技术（ＰＣＲＳＤＭ） ，设计两对引物，引入一个突变位点，通过重叠延伸法两次ＰＣＲ 扩增，使ＣＴＡ 编码基因第６３ 位密码子由ＣＴＣ 突变为ＴＴＴ，亦将扩增片断克隆入ＰＵＣ１９ 载体。结果： ＤＮＡ 测序结果表明在预期位点已发生突变，用ＰＣＲ 诱导成功ＣＴＡ 突变体。结论： ＰＣＲ 诱导突变准确、简便，为深入研究ＣＴ

摘要：目的：研究人微小病毒Ｂ１９在献血员中的感染情况。方法：采用ＰＣＲ技术对５００份献血员血清标本进行检测。结果：发现一例Ｂ１９病毒ＤＮＡ阳性，并用Ｋｏｃｈ设计的引物扩增标本和用ＨａｅⅢ，ＰｓｔⅠ和ＳｔｙⅠ酶切分析都证实为人微小病毒Ｂ１９。结论：国内献血者中有Ｂ１９病毒携带者。血液和血液制品有可能污染有Ｂ１９病毒。这个情况值得进一步研究。

摘要：应用引物设计原则，选择呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）基因组中高度保守的Ｆ基因作为扩增靶序列，独立设计合成了两对引物，建立了一个逆转录套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测ＲＳＶＲＮＡ的方法。结果：对引物进行敏感度实验，其检测敏感度为每ｍｌ１０ＴＣＩＤ５０ｓ（５０％ｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅｉｎｆｅｃｔｉｖｅｄｏｓｅ）的病毒量；用副流感病毒１型、甲型流感病毒、乙型流感病毒、新城疫病毒、腮腺炎病毒和腺病毒２型作对照，均无预期扩增产物出现，证实了设计引物的特异性；用建立的逆转套式ＰＣＲ方法对５例急性下呼吸道感染患儿的鼻咽部分泌物标本进行检测，发现３例阳性，２例阴性；同时用病毒培养法检测，结果完全相同。提示：该方法具有快速、敏感、特异和观察结果客观等优点。

摘要：为了提高丁型肝炎病毒的实验室诊断水平，建立一个高敏感性和特异性的丁型肝炎病毒的检测方法。根据ＧＥＮＢＡＮＫ中ＨＤＶ的核酸序列设计出巢式引物，采用逆转录巢式ＰＣＲ方法对４０例肝炎患者进行检测。结果：２０例丁型肝炎病毒抗原阳性的ＨＤＶＲＮＡ均为阳性，１０例丁型肝炎病毒抗体阳性中ＨＤＶＲＮＡ阳性６例，１０例单纯ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和抗ＨＢｃ阳性的均未检出ＨＤＶＲＮＡ。

摘要：人微小病毒B19(Human parvovirus B19)是微小病毒科中唯一能感染人的病毒。能够提供B19抗原的病毒体外培养系统尚未建成,因此限制了血清学实验的开展和普及。为此作者建立起B19病毒的PCR检测方法。设计引物在表达外壳蛋白VP1基因区,扩增长度为400bp。对设计引物做了敏感度、特异性和产物鉴定实验,结果显示:1fg B19DAN可被检出;只对B19 DNA有扩增产物出现,而对人基因组DNA,HBV,HPV,HSV,HCMV和ADV DNA均无扩增产物;扩增产物经HaeⅢ,PstⅠ和StyⅠ酶切证实为设计的靶片段。建立的PCR B19 DNA检测方法具有高度的敏感性和特异性,为我国开展B19病毒方面的研究工作打下了基础。