摘要：目的建立一种敏感、特异和快速诊断人呼吸道合胞病毒(RSV)感染的方法。方法选择RSV基因组中高度保守的 F 基因作为扩增靶序列,独立设计合成了两对引物,建立了一个完整的逆转录套式聚合酶链反应(PCR)检测 RSV RNA 的方法。结果对引物进行特异性实验,证明其具有高度特异性;对引物进行敏感度实验,测定其敏感度为10TCID_(50)/ml(TCID_(50)为半数组织培养感染量)。对101例急性下呼吸道感染患儿的鼻咽部分泌物标本进行检测,发现48例阳性,阳性率为47.5%;同时用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶桥联酶标法进行检测,发现40例阳性,阳性率为39.6%。两种方法对比,差异无显著性(P>0.05)。结论该方法具有快速、敏感、特异和观察结果客观等优点,为国内逆转录套式 PCR 用于临床快速诊断 RSV 感染、试剂盒的研制和开发奠定了基础。

摘要：应用引物设计原则，选择呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）基因组中高度保守的Ｆ基因作为扩增靶序列，独立设计合成了两对引物，建立了一个逆转录套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测ＲＳＶＲＮＡ的方法。结果：对引物进行敏感度实验，其检测敏感度为每ｍｌ１０ＴＣＩＤ５０ｓ（５０％ｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅｉｎｆｅｃｔｉｖｅｄｏｓｅ）的病毒量；用副流感病毒１型、甲型流感病毒、乙型流感病毒、新城疫病毒、腮腺炎病毒和腺病毒２型作对照，均无预期扩增产物出现，证实了设计引物的特异性；用建立的逆转套式ＰＣＲ方法对５例急性下呼吸道感染患儿的鼻咽部分泌物标本进行检测，发现３例阳性，２例阴性；同时用病毒培养法检测，结果完全相同。提示：该方法具有快速、敏感、特异和观察结果客观等优点。