摘要：目的探讨外周血降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)在急性胰腺炎(AP)患者中表达,并分析二者评估AP患者发生肺部感染的诊断价值。方法选取2019年5月至2021年3月河南省人民医院收治的76例AP患者作为研究对象,统计患者肺部感染发生情况,将发生肺部感染的患者纳入发生组;未发生肺部感染的患者纳入未发生组;设计基线资料调查问卷,入院时检测患者外周血PCT、CRP水平;比较2组一般资料及入院时外周血PCT、CRP水平,分析外周血PCT、CRP水平评估AP患者合并肺部感染的价值。结果76例AP患者中发生肺部感染37例,占49%;发生组外周血PCT、CRP水平高于未发生组,差异有统计学意义(P0.70,评估价值均理想,且以联合检测评估价值最佳。结论外周血PCT、CRP水平联合检测对评估AP患者合并肺部感染的价值较高。

摘要：目的构建5号染色体开放阅读框13(chromosome 5 open reading frame 13,C5orf13)基因siRNA慢病毒载体,探讨其对胃癌SGC-7901细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法针对人C5orf13基因设计3个不同的siRNA靶点,构建重组质粒,包装GV115慢病毒。取对数生长期SGC-7901细胞,分为KD1组、KD2组、KD3组和阴性对照组,前3组分别转染3个不同siRNA靶点的GV115慢病毒,阴性对照组转染阴性对照慢病毒。转染72 h,用嘌呤霉素筛选稳转细胞株,4组转染效率均>90%时,采用实时荧光定量PCR法检测4组细胞C5orf13 mRNA相对表达量,筛选出表达最低的KD2组细胞为C5orf13敲低组。取SGC-7901细胞为空白对照组。采用MTT实验检测空白对照组、阴性对照组、C5orf13敲低组转染后培养0、24、48、72、96 h时细胞增殖吸光度(optical density,OD)值,采用细胞划痕实验检测细胞迁移能力,采用Transwell小室实验检测细胞侵袭能力。结果KD1组(0.45±0.04)、KD2组(0.25±0.02)、KD3组(0.49±0.04)细胞C5orf13 mRNA相对表达量均低于阴性对照组(1.00±0.04)(P0.05)。空白对照组、阴性对照组、C5orf13敲低组转染后培养0 h时细胞增殖OD值比较差异无统计学意义(P>0.05);C5orf13敲低组转染后培养24、48、72、96 h时细胞增殖OD值(0.30±0.01、0.51±0.03、0.62±0.03、0.93±0.13)均低于空白对照组(0.36±0.03、0.64±0.03、0.81±0.04、1.39±0.10)和阴性对照组(0.36±0.02、0.63±0.02、0.79±0.05、1.30±0.07)(P0.05)。C5orf13敲低组细胞迁移率[(0.24±0.01)%]及侵袭率[(3.07±0.13)%]均低于空白对照组[(0.41±0.05)%、(4.91±0.66)%]和阴性对照组[(0.38±0.03)%、(4.70±0.23)%](P0.05)。结论构建的C5orf13基因siRNA慢病毒载体可明显下调SGC-7901细胞C5orf13表达,抑制SGC-7901细胞增殖、迁移及侵袭能力。

摘要：目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者血清免疫球蛋白水平与肾损伤发生的相关性。方法前瞻性纳入2018年1月至2019年6月河南省人民医院收治82例SLE患者,测定所有患者免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)水平,设计基线资料调查表详细记录患者一般资料,分析免疫球蛋白水平与SLE患者肾损伤发生的关系。结果82例SLE患者中发生肾损伤23例,发生率为28.05%(23/82)。发生肾损伤SLE患者的IgA、IgG、IgM水平均高于未发生肾损伤的SLE患者,差异有统计学意义(P1,P<0.05)。结论SLE患者肾损伤发生与IgA、IgG、IgM水平表达有关,上述指标过表达可能参与了肾损伤的发生进程。

摘要：目的:构建TPX2的真核表达载体pcDNA3.1-TPX2,并观察其在食管癌EC9706细胞中的表达。方法:在pQE-70-TPX2原核表达载体基础上,根据GenBank上提供的TPX2基因序列及测序结果,采用Primer Premier 5.0软件设计扩增TPX2基因编码区的引物序列,经HindⅢ和BamHⅠ双酶切,与真核表达载体pcDNA3.1连接后转化感受态大肠杆菌JM109,并进行酶切分析和序列测定。将构建的质粒pcDNA3.1-TPX2体外转染EC9706细胞,进行稳定筛选。用Western blot鉴定基因的表达。结果:DNA测序和BLAST比对表明克隆的人TPX2基因序列正确,进一步酶切分析显示,成功构建了真核表达载体pcDNA3.1-TPX2,并在EC9706细胞中获得稳定表达。结论:TPX2基因真核表达载体的成功构建为后续研究TPX2基因在肿瘤细胞中的功能奠定了基础。

摘要：目的探讨G1型轮状病毒(rotavirus,RV)的分子生物学检测及其在RV感染性腹泻诊治中的应用价值。方法收集90例腹泻患儿第1、3天大便标本各90份,根据RV基因序列,结合文献设计针对RV G1型引物和探针,采用PCR法检测第1天标本中RV核酸,以免疫胶体金法检测第1、3天标本中RV抗体,比较2种方法检测阳性率。将PCR检测阳性病例随机分为2组,观察组立即行抗病毒及对症治疗,对照组在免疫胶体金法RV抗体阳性时再行上述治疗,比较2组住院时间。结果 PCR法共检出RV核酸51例,检测阳性率(56.7%)与第1天免疫胶体金法检测阳性率(6.7%)比较差异有统计学意义(P0.05);观察组住院时间((8.0±2.5)d)低于对照组((15.0±1.5)d)(P<0.05)。结论 PCR技术对RV G1型检测具有较高特异性和敏感性,有助于疾病的早期诊断与治疗。

摘要：目的:探讨Smo siRNA对人食管癌EC9706细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2表达的影响。方法:设计并合成Smo siRNA-3,转染食管癌EC9706细胞后,分别采用RT-PCR和Western blot法检测细胞中Smo、bcl-2 mRNA和蛋白的表达;采用TUNEL法及流式细胞术检测细胞凋亡,分析凋亡指数(AI)和凋亡细胞比例。以未转染、无关序列siRNA转染和转染试剂的细胞作对照。结果:与各对照组相比,Smo siRNA-3转染细胞24、48和72 h后EC9706细胞中Smo、bcl-2 mRNA的表达均明显降低(P<0.05),以转染72 h降低最显著(P<0.05)。与各对照组相比,Smo siRNA-3转染72 h后细胞中Smo、bcl-2蛋白的表达均明显降低(F=151.310、143.190,P<0.001),AI增加(F=66.270,P<0.001),早期和晚期凋亡细胞比例均增加(F=101.100、334.990,P<0.001)。结论:Smo siRNA可能通过抑制细胞中Smo基因表达,进而下调bcl-2表达,促进EC9706细胞凋亡。

摘要：目的:探讨10-23脱氧核酶(10-23DRz)抑制CTX-M-38型ESBLs的可行性。方法:依据CTX-M-38型ESBLs序列及其mRNA构象特征,设计针对其mRNA结构的10-23DRz脱氧核酸序列及反义核酸序列;采用氯化钙法对10-23DRz及反义核酸进行转化;依据转化菌在平板上菌落形成状况及菌液吸光度选择10-23DRz应用量;采用K-B法体外药敏试验检测耐药活性。结果:45nmol10-23DRz用量时转化菌菌落形成量及菌液吸光度较为理想。除哌拉西林、头孢噻肟及亚胺培南外,其他抗菌药物10-23DRz组与反义核酸组抑菌环直径间差异有统计学意义(P均<0.001)。结论:10-23DRz可抑制CTX-M-38型ESBLs的表达。

摘要：目的建立甲型肝炎病毒(HAV)和戊型肝炎病毒(HEV)的双重荧光定量PCR检测方法并应用于临床样本的检测。方法根据参考文献分别选取HAV以及HEV基因组的保守区域设计合成特异性引物和探针,从而建立并优化双重荧光定量PCR反应体系,之后评价反应体系的特异性、敏感性和稳定性。结果本研究建立的HAV和HEV双重荧光定量PCR技术应用于检测HAV核酸时检测极限可以达到1个拷贝/反应,对同一样品重复测定5次获得的Ct值的变异系数(CV)最大为1.5%,同时该体系检测HEV的最低检测极限也达到10个拷贝/反应,重复测试5次后Ct值的变异系数(CV)最大为2.6%,临床样本测试结果显示该体系能够对甲型肝炎和戊型肝炎临床样本中的病毒进行定量。结论本研究成功建立了HAV和HEV双重荧光定量PCR检测方法,灵敏度高,稳定性好,可以同时准确定量HAV和HEV,为这两种病毒的分子病原学诊断提供了一种更加快速的手段。

摘要：自孕前口服叶酸可以预防神经管畸形、心血管畸形等疾病以来,逐渐形成孕前检查和孕前保健的概念[1].2006年,美国疾病防治中心（CDC）提出孕前保健的概念为：在妊娠前,采用改变待孕夫妇的生物医学、行为习惯、社会环境等预防和干预的方法,以期改变妊娠结局[2].由此,进一步提出了利用“知识、态度和行为（knowledge,attitudes and behaviors,KAB）模式”,改善育龄夫妇孕前保健状况.具体的做法是针对所有孕前夫妇进行相关风险因素筛查,开展健康促进以及可能的干预.但是,至今尚无系统的、可操作的、针对所有育龄夫妇的干预策略和方法.