摘要：目的 对异基因造血干细胞移植患者发生感染的相关因素进行探讨。方法 采用回顾性研究,收集2019年1月至2022年10月于郑州大学附属肿瘤医院/河南省肿瘤医院行异基因造血干细胞移植的124例患者的临床资料,依据随访3个月期间是否发生感染将病历资料分为感染组(30例)与未感染组(94例)。由研究者设计一般资料调查表,收集患者一般资料及临床资料。对两组患者一般资料及临床资料进行分析,并采用多因素logistic回归分析异基因造血干细胞移植患者发生感染的相关因素。结果 两组患者性别、年龄、体重指数、住院时间、原发病类型、供者类型、干细胞来源、移植前白细胞计数、移植前中性粒细胞百分比对比,差异无统计学意义(P>0.05);感染组受供者人类白细胞抗原(HLA)相合率低于未感染组,发生急性移植物抗宿主反应(GVHD)、乙肝表面抗体(HBsAb)阳性的百分数大于未感染组;经多因素logistic回归分析显示,发生GVHD、HBsAb阳性为异基因造血干细胞移植患者发生感染的独立危险因素(OR=20.314、93.024,P<0.05),受供者HLA相合率高为阻碍异基因造血干细胞移植患者发生感染的保护因素(OR=0.878,P<0.05)。结论 受供者HLA相合率低、移植后发生GVHD及HBsAb阳性均会增加异基因造血干细胞移植患者的感染发生风险。

摘要：背景与目的:小细胞肺癌是高度侵袭的恶性肿瘤,患者的5年生存率不足10%,提示小细胞肺癌组织中可能富含较多的肿瘤干细胞。本研究设计从小细胞肺癌组织中原代培养肿瘤细胞并建立细胞系,从早期传代的细胞系中分离鉴定肺癌干细胞。方法:用无血清培养基原代培养肺癌细胞,传代后建立细胞系。应用流式细胞分析及分选技术,从细胞系第3代或第4代的细胞中寻找肺癌干细胞。应用单细胞克隆形成实验、平板集落形成试验及细胞球形成实验,研究肺癌干细胞的生物学特性。结果:应用原代细胞培养技术成功地从1例小细胞肺癌标本中培养出高纯度的原代肺癌细胞,其传代次数可达25代以上。流式细胞学分析显示该细胞系中有5.1%的细胞CD44呈强阳性表达(CD44++),相比于占主群的CD44弱阳性细胞(CD44+),CD44++细胞具有较强的平板集落形成能力,只有它们可以形成完全克隆(holoclone),在超低黏附的96孔培养板中可形成细胞球,而CD44+细胞不能形成完全克隆和细胞球。这些结果提示小细胞肺癌干细胞富集在CD44++细胞群中,而CD44+细胞中没有干细胞。应用CD44和CD90共同标记,可将小细胞肺癌细胞系中的细胞分为4群,分别是CD44+CD90-、CD44+CD90+、CD44++CD90-和CD44++CD90+细胞,其中CD44++CD90+细胞所占比例为1.9%。相比于其他细胞群,CD44++CD90+细胞形成细胞球的能力最强,提示CD90可能也是肺癌的干细胞标记。结论:小细胞肺癌细胞系中存在肿瘤干细胞样细胞,CD44和CD90可能是小细胞肺癌的干细胞标记。

摘要：背景:干扰素调节因子4是B细胞终末分化的重要转录因子,限制性表达于淋巴细胞,在基因调控中起重要作用,但其与疾病预后的最终关系仍未确定。目的:假设干扰素调节因子4在B淋巴细胞中的表达与细胞耐药有关,观察新型抗肿瘤药蛋白酶体抑制剂硼替佐米对干扰素调节因子4的影响。设计、时间及地点:细胞学体外实验,于2006-03/2007-02在河南省肿瘤医院中心实验室完成。材料:Daudi和Namalwa细胞株由上海血液学研究所提供。阿霉素为山西普德药业有限公司产品,硼替佐米为西安杨森公司产品。方法:将Daudi和Namalwa细胞各自接种于200μLRPMI-1640培养体系中,分别加入0,5,10,20,30,50,100μg/L阿霉素;对于Namalwa细胞,另设立联合用药组,即15nmol/L硼替佐米+上述各浓度阿霉素;药物处理48h后,加入MTT继续培养。选择单药50μg/L阿霉素、15nmol/L硼替佐米以及两药联合作用Namalwa细胞12,24,48,72h,行半定量RT-PCR和Western印迹分析。主要观察指标:干扰素调节因子4在细胞株中的表达。MTT法检测细胞增殖抑制率。AnnexinV/PI法检测细胞凋亡情况。药物对Namalwa细胞干扰素调节因子4基因和蛋白表达的影响。结果:Namalwa细胞表达干扰素调节因子4基因和蛋白,Daudi细胞中未检测出其表达。各浓度阿霉素作用48h后,Daudi细胞增殖抑制率显著高于Namalwa细胞(P<0.05);阿霉素联合硼替佐米共培养48h,Namalwa细胞增殖抑制率显著高于单药阿霉素(P<0.05)。硼替佐米、阿霉素联合硼替佐米作用48h细胞凋亡率显著高于单药阿霉素(P<0.01)。单药阿霉素处理12,24,48,72h,干扰素调节因子4基因和蛋白均未发生明显变化;单药硼替佐米处理48h干扰素调节因子4基因表达开始下调,72h出现蛋白表达下调;两药联合处理24h即出现干扰素调节因子4基因表达下调,48h随之出现蛋白表达下调。结论:Namalwa细胞中干扰素调节因子4的表达与阿霉素耐药有关,硼替佐米能够下调干扰素调节因子4的表达,克服阿霉素的耐药。

摘要：背景：骨髓间充质干细胞联合造血干细胞移植是最有希望解决造血重建缓慢的策略之一，但临床实施中，抽取骨髓进而分离、扩增间充质干细胞尚不能为大部分健康供者所接受。目的：探讨小鼠脂肪源间充质干细胞对异基因重型再生障碍性贫血模型鼠造血功能的影响。设计、时间及地点：细胞学体内实验，于2007—05／11在河南省肿瘤医院中心实验室完成。材料：雄性6～8周龄BALB／c（H-2K^d）小鼠20只，雌性7～8周龄C57BL／6（H-2K^b）小鼠50只，均购于河南省实验动物中心。方法：贴壁法体外分离培养20只雄性BALB／c小鼠脂肪源间充质干细胞；反复吹打20只雌性C57BL／6（H-2K^b）小鼠骨髓细胞，加入EDTA-NH4Cl液去除红细胞，即为骨髓有核细胞。剩余30只雌性C57BL／6（H-2K^b）小鼠均给予一次全身3．0Gy^60Co-γ照射，照射后第4，5，6天皮下注射环磷酰胺及氯霉素，建立重型再生障碍性贫血模型。模型鼠随机分为3组，联合组经尾静脉输入骨髓有核细胞2×10^9个＋脂肪源间充质干细胞3×10^6个，骨髓有核细胞组单纯输入骨髓有核细胞2×10^7个，对照组输入生理盐水0．2mL，10只/组。主要观察指标：定期检测外周血和股骨有核细胞数以及巨噬细胞／粒细胞集落形成单位数的变化，PCR法鉴定Y染色体，流式细胞仪检测移植小鼠骨髓及脾脏CD3和H-2K^d阳性表达情况。结果：细胞移植后第2周，联合组外周血有核细胞数、股骨有核细胞数、巨噬细胞／粒细胞集落形成单位数均明显高于骨髓有核细胞组（P〈0．05），且随移植时间的延长，各种细胞数量逐渐恢复（P〈0．05）。细胞移植后第4周（即造血恢复期），联合组外周血可特异性地扩增Y染色体的SRY基因片段，移植小鼠骨髓及脾脏中CD3和H-2K^d双阳性细胞达6．66％，提示在受体小鼠体内有供体细胞的存在。结论：脂肪源间充质干细胞能够重建重型再生障碍性贫血小鼠的造血功能，促进小鼠造血系统的恢复。