摘要：目的探寻分子生物学方法判定刑事案件现场物证的生物属性的可行性。方法取30份现场生物检材,其中血液(斑)、唾液(斑)、精液(斑)各10份,分别进行常规检验法和分子生物学方法,通过DNA-RNA共提取技术,将其中的mRNA运用反转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)技术反转录成cDNA,根据3种生物检材不同的目标基因设计3对特异性引物,进行实时荧光定量PCR扩增,通过熔解曲线测定不同的熔解温度(Tm)和不同长度的扩增片段来区分生物检材。结果血液(斑)的Tm值为(84.5±0.2)℃,片段长度177 bp;唾液(斑)的Tm值为(76.9±0.3)℃,片段长度134 bp;精液(斑)的Tm值为(88.5±0.2)℃,片段长度294 bp。结论与常规检验法比较,联合应用RT-PCR和实时荧光定量PCR技术判定检材的生物属性特异性强、灵敏度高、结果稳定可靠,可应用于日常法医物证检验。

摘要：目的运用微滴式数字PCR技术进行生物样品的种属鉴定和绝对定量。方法选择人mtDNA两个编码基因ND4和16S rRNA,设计特异性引物与探针,用人来源及常见动物样本验证种属特异性,再用重组质粒和2组共16份人来源生物检材,倍比稀释。使用微滴式数字PCR技术进行种属检验和绝对定量,验证其灵敏度和稳定性。结果人重组质粒FAM(ND4)可进行人来源样品的检测,其检测结果与各级稀释梯度基本吻合,微滴式数字PCR技术可以检测出反应体系中低至单拷贝的DNA。结论微滴式数字PCR技术可以进行生物样品的种属鉴定和绝对定量,并具有很高的灵敏度和特异性,可应用于日常法医物证检验。

摘要：目的：基于等位基因特异性PCR（allele-specific PCR，AS-PCR）技术，建立一种三色荧光标记复合扩增检测线粒体DNA（mtDNA） SNP的方法。方法基于AS-PCR原理，选择20个mtDNA编码区SNP位点，分为两组，分别标记FAM和HEX荧光，每个位点设计具有长度差异的两条上游（下游）等位基因特异性引物以及一条下游（上游）通用引物。结合AS-PCR技术和毛细管电泳，检测200份无关个体血样。各位点随机选取至少3个样本进行直接测序验证，并进行单倍型频率调查。结果200份血样均得到清晰分型，各位点的检测结果与直接测序结果完全一致。10μL体系下，DNA最低检测浓度为0.2 pg，当模板量为0.5~5 pg时能得到较为理想的分型图谱。在200名无关个体中，共分出15种单倍型，单倍型多样性为0.9060。结论 AS-PCR技术是一种简单、快速且有效的mtDNA SNP分型方法，适用于法庭科学检验的需求。

摘要：目的建立一种复合检测线粒体DNA（mtDNA）单核苷酸多态性（SNP）分型的方法。方法通过设计等位基因特异性引物并结合毛细管电泳分型技术平台，建立包含16个mtDNASNP位点的复合扩增检测体系。对50名汉族无关个体血样进行mtDNASNP检测，并通过直接测序法对其分型结果进行验证。结果50个样本经本检测体系复合扩增后，均得到清晰的SNP分型结果，当模板量在0．5～10pg时能得到较理想的分型图谱。样本的复合检测结果与直接测序法结果完全一致。结论建立的复合检测体系检测mtDNASNP方法灵敏度高、操作简便、分型准确，为针对mtDNA进行简便、有效的中高通量多态性分型提供了一种新方法。

摘要：目的建立一套以DNA遗传标记为基础的植物类物证检材的种属鉴定系统。方法收集上海地区常见植物200例,从形态学上确定物种,设计扩增rbc L、mat K、ITS基因片段的引物,用琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物并测序,评估三个标记的通用性和识别能力。结果在检测成功率方面,rbc L(99.5%)>mat K(92.5%)>ITS(86.0%);rbc L+mat K组合检测优于单rbc L或单mat K的识别能力,其识别能力主要在属及属以上水平;ITS检测结果不稳定,不适合作为单标记,但可作为有力补充,rbc L+mat K+ITS组合的识别能力明显高于rbc L+mat K组合,对大部分植物样本种属鉴定能够达到属及属以下水平。结论以rbc L+mat K+ITS组合作为标记的鉴定系统对植物类物证有良好的通用性,其识别能力对大部分植物样本能够达到属及属以下水平。

摘要：棉签是现场勘查中采集物证常用的装备之一。分析常用棉签的缺陷和风险,介绍了一种新型易折自流式棉签的设计原理、结构特点,其具有易便携、易操作、降低污染风险、DNA不易降解等优点,并与常用普通棉签做对比测试,对各类现场物证进行适应性测试,结果表明这种易折自流式棉签与普通棉签的采集现场物证效果一致,自流式棉签对各类适合用棉签采集的现场检材均有效,可以成为现场勘查的必备装备。

摘要：目的建立法医物证学常染色体和Y染色体综合检测的方法。方法选择常用的常染色体STR基因座和Y染色体STR基因座,设计复合扩增引物,形成五色荧光标记复合扩增试剂盒。结果开发出一个五色荧光标记复合扩增试剂盒,可同时对15个常染色体STR基因座、1个性别基因座和10个Y染色体STR基因座进行分型检测。结论 15个常染色体STR加10个Y染色体STR检测试剂盒结合毛细管电泳凝胶进行STR分型,结果准确可靠,在法医学案件检验及数据库建设等方面有良好的应用前景。

摘要：目的建立一种基于重组酶聚合酶扩增(RPA)技术的现场唾液生物属性鉴定方法。方法利用DNA-RNA共提取技术,将样本总RNA反转录成c DNA,针对唾液特异性分子标识HTN3设计RPA引物,构建HTN3 RPA检测方法,并测试该方法的特异性和应用效果。结果反转录产物在39℃恒温反应20min即可完成目的片段的有效扩增。扩增条带与目的序列完全一致。在对20份现场检材的检验中该方法均获得了稳定可靠的检测结果。结论建立的反转录RPA检测唾液生物属性方法特异性强,极大缩短了扩增时间,结果稳定且易于判定,适合实验室快速检测。该方法可同步完成物证的STR分型检验,为丰富法医物证体液鉴定提供了一种新的策略和方法。

摘要：物证摄影载物平台是物证光学检验的必备设备,由于光学检验需要对物证进行精准的配光,因此对物证摄影的载物平台提出了较高的要求。本文设计并研制了多向可控物证摄影载物平台,该装置可以对物证进行前后、左右、上下、旋转、倾斜等多向调整,既可单向运动又可多向同时运动,为精准配光提供了方便,并在在实际案件中得到了成功的应用。