摘要：创新性整合生理和病理生理实验教学,在硕士研究生教学中应用10余年。教学内容均系任课教师自行设计的技术,如家兔闭胸心内和心外膜及体表心电图同步记录与分析;缺氧对大鼠中枢和神经-肌肉接头及骨骼肌疲劳的影响;心-肾反射活动和肾缺血所致改变等。在完成预设项目基础上,学生设计1到2项不同处理并表述其思想。实验结束,准确标注结果,按论文格式写报告。不能用所掌握知识阐释的结果需提出见解和进一步研究的设想。如在"家兔不同状态闭胸心内和心外膜及体表心电图同步记录与分析"实验,观察到心室内外膜因缺血和血中儿茶酚胺浓度升高的状态下,部分动物发生心室内外膜电活动分裂。在电活动分裂期间,心室内外膜活动的节律和频率各异,体表心电图与心外膜的一致。学生查阅文献尚未见这类心律失常报道。通过和老师讨论,在理解其机制基础上,认识到这类心律失常可致心室内外膜机械活动分裂,心室泵血减少而对整体功能产生影响。继而得出符合逻辑的推理:在临床心导管术时,同步监测患者心内膜电活动和体表心电图,二者的节律和频率不一致,表明心室内外膜发生电活动分裂。学生反映整合性实验课程,使其视野扩展,创新思维以及提出和解决问题的能力得到培养。

摘要：目的筛选针对STAT5A基因有效的siRNA,研究抑制STAT5A基因的表达对人肝癌HepG2细胞增殖、周期及凋亡的影响,探讨STAT5A基因在肝癌发生发展中的作用。方法设计并化学合成针对STAT5A基因三个靶点的siRNA,采用脂质体法转染人肝癌细胞HepG2,分别用半定量RT-PCR、Western blot技术检测转染后HepG2细胞STAT5A mRNA和蛋白表达的变化,从中筛选出一段干扰效率最显著的siRNA;用该siRNA转染HepG2细胞,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果三段STAT5A基因的siRNA均对HepG2细胞中STAT5A mRNA和蛋白表达产生了不同程度的抑制作用,其中以siRNA-3697的干扰效率最高,STAT5A mRNA和蛋白的表达抑制率分别为72.03%和66.27%(P<0.05);转染后1～4 d细胞生长速度减慢、增殖显著抑制(P<0.05);转染后48 h细胞凋亡率为37.33%(P<0.05)。结论成功筛选出针对STAT5A基因有效的siRNA;该siRNA可特异地阻断HepG2细胞STAT5A基因的表达,抑制细胞生长,诱导细胞凋亡。

摘要：目的培养高质量、高素质的创新型医学人才。方法在传统的20学时理论验证性实验教学基础之上,新增加11学时设计性实验。结果有96.7%的学生接受设计性实验教学模式。结论培养了学生独立思考,提出问题、分析问题、解决问题的能力,提高了教学质量。

摘要：目的:构建带有肿瘤特异性Survivin启动子、hTERT基因靶向的shRNA表达载体pYr-Survivinp-miR30-hTERT,探讨该载体的肿瘤靶向性及其RNAi作用效率,为RNAi技术在肿瘤基因治疗中的进一步优化进行有益的探索。方法:化学合成hTERT基因shRNA寡核苷酸序列,克隆至质粒pYr-CMV-Mir30-shRNA,构建重组质粒pYr-CMV-Mir30-hTERT;克隆Survivin启动子序列,取代该质粒原有的CMV启动子,构建重组质粒pYr-Survivinp-miR30-hTERT,同时构建阴性对照质粒pYr-CMV-Mir30-NC,以上质粒均进行酶切及测序鉴定。将以上载体分别转染人乳腺癌MCF-7细胞、人宫颈癌Hela细胞及293T细胞,荧光显微镜下观察细胞转染情况,并采用半定量RT-PCR、western blot技术检测MCF-7细胞和Hela细胞中hTERT mRNA和蛋白的表达。结果:重组质粒经酶切及测序鉴定证实均符合设计要求,构建成功;荧光检测结果表明,CMV组在三种细胞中均有荧光蛋白的表达,而Survivin组质粒仅在MCF-7细胞和Hela细胞中表达绿色荧光,转染效率均能达到70%以上,而在293T细胞中则未见荧光;RT-PCR和Western blot的结果均显示MCF-7细胞和Hela细胞的Survivin组和CMV组中hTERT mRNA和蛋白的表达均受到明显抑制(P0.05)。结论:Survivin启动子调控的hTERT基因RNAi载体能有效抑制Survivin阳性肿瘤细胞中hTERT的表达,而对正常细胞不产生影响。

摘要：目的：为培养高质量、高素质的创新型医学人才以适应社会需求，我校从2010年开始对五年制临床医学本科生的病理生理学实验教学进行了适当的调整与改革。方法：在传统的20学时理论验证性实验教学基础之上，新增加11学时设计性实验内容。实施过程及学时分布如下：（1）以合班为单位课堂讲授设计性实验的概念、特点、目的意义，病生设计性实验的基本程序与做法，并提供6个限选题目（2学时）；（2）每个学生任选一个题目，写出设计方案；（3）每班按学号分为5组，小组内汇报并讨论每个成员的设计方案，总结或推荐写出小组的设计方案；（4）以小班为单位展开课堂讨论形成最佳方案上报教研室（2学时）；（5）确定实验方案：教研室组织全体指导教师从上报方案中优选出2—3个设计方案，每小班各选择1个方案进行实验；（6）完成实验（5学时）：学生根据设计性实验方案独立完成实验全过程，做好实验记录并上交论文或实验报告；（7）带教教师对论文或实验报告展开讨论总结（2学时）。结果：调查结果显示96．7％的学生接受设计性实验这种教学模式，认为培养了学生在学习医学问题时独立思考，提出问题、分析问题、解决问题的科研意识和能力，提高了教学质量。

摘要：鉴于原猿类的树鼩在进化中的特殊地位,有关它的神经生物学研究十分活跃。树鼩的单位放电研究已有报告(J. E. Abano et al. 1978;A. L. Humphrey et al. 1977、1980),但是采用慢性微电极技术记录行为状态的树鼩的单位放电方法迄今未见报道,本文报告一种记录清醒活动状态树鼩的单位放电技术考虑到树鼩形体甚小、体重仅100多克。要分离单位放电,必须拥有一种特殊规格的微型微推进器,以适应特殊实验之需。本研究设计一种采用差动结构原理实现微推进的装置,整个装置由微推进器与基座组成。微推进器的参数如下:重量8.8克;微调范围:2.0毫米;微调读数5微米;微调可控范围:小于2微米;外形尺寸:13×13×51毫米。微推进器相对于基座有直径为1.8毫米的径向偏心移动范围。基座重0.65克,实验在局麻下,在立体定向仪控制下埋植基座。术后第二天即可实验观察。

摘要：目前，国内外研究者通常将对照组、脑功能受损伤组和抗脑损伤组的动物分别置入Y迷宫、水迷宫、穿梭箱或单筒装置内，观察和比较不同组动物的感觉和运动以及其他行为能力的变化。这些装置的主要不足是实验装置处于静止状态。且不能同时对三组动物的复杂脑功能进行研究。为克服其不足而设计旋转性三筒互通脑功能研究装置。