摘要：利用pH-stat法测定碱性蛋白酶和中性蛋白酶对玉米黄粉蛋白的水解度,通过Box-Benhnken响应曲面法优化水解条件。根据单因素试验结果设计中心组合试验,以水解度为指标,采用响应面分析法确定最优水解工艺参数。结果表明:蛋白酶水解的最适条件为酶解pH11.10、酶解温度55.00℃、底物质量浓度112g/L、碱性蛋白酶与中性蛋白酶酶活单位比值5:1、加酶量48000U/g、酶解时间120min;在此条件下,玉米黄粉蛋白水解度实测值为30.23%,模型的预期值为30.84%。采用复合酶水解可提高玉米黄粉蛋白水解度,且工艺简单。

摘要：目的原核表达及纯化绿脓杆菌鞭毛蛋白ngE并进行初步活性鉴定。方法分析绿脓杆菌鞭毛蛋白FlgE的基因序列，设计带适当酶切位点的引物，用PCR方法扩增出FlgE的编码DNA序列，与大肠杆菌表达载体pET24a同时经NdeI／Hind Ⅲ双酶切、纯化及连接后构建pET24a—FlgE原核表达质粒，挑选重组阳性质粒经DNA测序确认序列正确，转化至大肠杆菌B121中进行诱导表达条件优化，使重组质粒表达目的蛋白，采用组氨酸标签亲和层析法对目的蛋白进行纯化，通过SDS-PAGE对纯化后蛋白相对分子质量进行鉴定，用试剂盒进行去内毒素化处理。在体外培养人角膜上皮细胞系细胞，加入纯化的F1gE重组蛋白，培养4h后应用实时定量PCR检测各种相关的炎性因子以反映FlgE蛋白活性。结果可用于大肠杆菌表达系统的重组pET24a—F1gE构建成功，其编码的蛋白在BL21中获得高效表达，当诱导剂异丙基一B—D一硫代吡喃半乳糖苷浓度为1mmol／L，在16、225r／min振荡培养20h，诱导目的蛋白表达量最高，经纯化、去内毒素处理和SDS—PAGE鉴定，获得纯化的重组FlgE蛋白。角膜上皮细胞用20μg／ml FlgE处理后，细胞内炎性相关分子IL-6和IL-8的表达量明显上升，而灭活的F1gE蛋白则丧失该刺激活性。结论获得纯化的重组绿脓杆菌鞭毛蛋白FlgE，且可刺激角膜上皮细胞上调炎性因子IL-6、IL-8的表达。

摘要：手术是局限期食管癌的重要治疗手段，但单纯手术切除的5年生存率仅20％～25％。早期研究显示术后放疗降低区域复发率，但并不能提高生存率。近期大部分研究显示Ⅲ期或淋巴结阳性患者能从术后放疗中生存获益，且pT2？3 N0 M0期患者术后放疗可能获益。放疗靶区范围推荐以双侧锁骨上区、上纵隔、隆突下以及瘤床为主，大部分研究推荐下段病变应包括上腹部区域淋巴结。对局部晚期患者术后放疗联合化疗可能带来更大获益。关于食管鳞癌术后放疗意义、靶区设计及联合化疗等问题需个体化考量，需更多的临床证据。

摘要：目的鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)发病具有地域性,在我国南部地区发病率较高。由于早期症状通常没有特异性,大部分患者就诊时已达晚期,且极易远处转移及局部复发。本研究对影响NPC进展及预后的相关因素进行总结。方法应用CNKI、Medline和PubMed期刊全文数据检索系统,以"鼻咽癌和预后"等为关键词,检索相关文献,其中英文文献2 721条,中文文献274条。纳入标准:关于鼻咽癌预后相关因素的临床和基础研究。排除标准:(1)研究设计存在缺陷或统计方法出现错误;(2)与鼻咽癌预后相关的研究结果不明确。根据纳入标准和排除标准,符合分析的文献50篇。结果越来越来的治疗因素、临床因素、生物学因素及影像学因素与NPC预后相关。随着放疗技术的发展,调强放射治疗(intensity-modulated radiotherapy,IMRT)在改善生存及降低毒副反应方面存在明显优势;在临床因素方面,虽然很多与NPC预后有关的指标被发现,但目前只有TNM分期系统被广泛接受;在生物学因素方面,血清EB病毒DNA水平被临床广泛接受;在影像学因素方面,将TNM分期与影像学尤其是18 F-FDG PET相关指标结合,可提高预后预测的准确性。如何提高EB病毒DNA的检测准确性及同质性,将成为攻克难点。此外,肿瘤放疗学的发展与医学影像学的发展密切相关,通过肿瘤影像学指标来评估NPC预后可能成为未来研究的重点之一。结论了解有关NPC进展及预后的相关因素,及早制定相应的治疗方案,能够有效的控制患者的局部复发率并提高生存率。

摘要：以唾液为基质的检测具有无创、准确、简便的优势。目前证实的唾液肿瘤标志物有蛋白质、mRNA、miRNA以及DNA，相应的检测技术有聚丙烯凝胶电泳、芯片、测序等。通过相关文献的分析，发现唾液活检在肿瘤领域的诊断、临床用药治疗及预后评价方面具有重要作用。由于文献报道的实验设计多样化，尚需大量科学验证对唾液采集和处理方法、检测程序及质量控制进行标准化。

摘要：采用适时荧光定量聚合酶链式反应技术,以培育2个月的普通烟草为材料,对从药用植物苦楝中分离得到的8种三萜类成分与从臭椿中分离得到的7种苦木味素类成分进行抗马铃薯Y病毒的活性研究,结果表明:(1)3个三萜类成分(methylkulonate,dubionel B,isotoosendanin)与3个苦木味素萜类成分(ailanthone,chaparrinone,shinjudilactone)显示出比较强的抗病毒活性;(2)三萜类成分结构中C-20位的羧基与C-16位的羟基为活性基团;(3)苦木味素萜类成分结构中A环的α,β-不饱和酮为活性必需基团,此外C-15位酯基侧链的引入可增强活性。该研究对这15种天然产物来说为首次进行抗马铃薯Y病毒的报道,其构效关系的研究可为新型抗植物病毒药物的设计提供信息。

摘要：目的中国食管癌发病人数占世界总发病人数的50%,并具有发病年龄更低的特点。2006年原卫生部在全国启动了食管癌早诊早治项目,山东省作为首批加入该项目的省份,承担了较多项目任务。本研究探讨2013-2016年济南市部分区县农村居民食管癌发病的危险因素,为进一步开展食管癌防治工作提供依据。方法采用病例对照研究设计1∶2匹配病例组和对照组,选取2013-2016年山东省食管癌早诊早治项目组中济南市部分区县农村地区病理确诊为食管癌的278例患者作为病例组,选择同期同一项目组符合入组条件的556名正常人为对照组。分别对病例组和对照组进行问卷调查,调查内容包括一般情况,吸烟、饮酒情况,新鲜蔬菜、新鲜水果、肉蛋奶类、豆类食品、腌晒食品、油炸食品、烫热食品和霉变食品摄入等。采用Epidata 3.1软件对危险因素调查表进行录入,建立数据库,采用SPSS 19.0COXREG命令拟合条件Logistic模型,对相关变量进行单因素Logistic分析,筛选出有统计学意义的变量后,进一步行多因素Logistic分析,计算各危险因素的比值比(odds ratio,OR)及95%可信区间(confiden ceinterval,CI)。结果单因素分析显示,病例组和对照组在吸烟、饮酒、饮茶,以及经常食用新鲜水果、肉蛋奶类、豆类食品、腌晒食品和霉变食品上的差异有统计学意义,P<0.001。多因素分析显示,饮酒者发生食管癌的风险是不饮酒者的2.6倍(OR=2.556,95%CI=1.619～4.037),经常食用霉变食品者罹患食管癌风险是不经常食用霉变食品者的3.4倍(OR=3.439,95%CI=1.625～7.276);经常食用新鲜水果(OR=0.518,95%CI=0.350～0.768)和豆类食品(OR=0.384,95%CI=0.269～0.548)是食管癌的保护因素。结论饮酒和经常食用霉变食品是食管癌发生的危险因素,经常食用新鲜水果和豆类食品能有效预防食管癌的发生。

摘要：目的通过比较宫颈癌经验引导调强(knowledge-based intensity-modulated radiotherapy,K-IMRT)与常规调强(conventional intensity-modulated radiotherapy,C-IMRT)在计划靶区(planning target volume,PTV)和危及器官(organ at risk,OAR)的剂量学差异,探讨基于先验知识的宫颈癌调强计划自动优化的可行性。方法选取山东省肿瘤医院2014-05-01-2014-09-01宫颈癌术后患者10例,进行CT模拟定位、靶区和危及器官的勾画,用Eclipse 13.0治疗计划系统基于同一CT图像进行K-IMRT和C-IMRT调强计划设计。在95%体积的PTV达到处方剂量的条件下,比较两种调强计划的剂量体积直方图(dose volume histogram,DVH),分析靶区均匀性指数(homogeneity index,HI)、适形度指数(conformity index,CI)、OAR受照剂量和计划时间。结果 K-IMRT计划与C-IMRT计划在靶区受照剂量、HI和CI差异均无统计学意义,P>0.05。膀胱V30、左股骨头V40、右股骨头V20、V30和D50K-IMRT计划明显优于C-IMRT计划,差异有统计学意义,P<0.05。膀胱V20、V30和D50,直肠V20、V30和V50及左右股骨头受照剂量均值都低于C-IMRT计划。计划时间K-IMRT明显缩短。结论宫颈癌术后基于先验知识的调强计划自动优化结果可以达到与C-IMRT计划相似的靶区剂量分布,能够降低危及器官的受照受量,在计划优化应用中是可行的。

摘要：目的：研究黑曲霉对大豆肽脱苦处理。方法首先发酵黑曲霉产生蛋白酶，并测定其酶活。根据单因素试验结果设计中心组合试验，以苦味值为指标，采用响应面分析法确定最优脱苦工艺参数。结果黑曲霉酶液脱苦大豆肽的最适条件为pH 6.0、时间2.1 h、温度34.0℃；在此条件下，苦味值约为1，能降低4~5个苦味值。结论经过条件优化后，黑曲霉脱苦大豆肽的效果显著。

摘要：目的：探讨噻托溴铵联合茶碱对稳定期慢性阻塞性肺疾病（ COPD）患者肺功能的影响。方法稳定期COPD患者120例，按完全随机设计原则分为观察组和对照组各60例。对照组单纯口服茶碱治疗，观察组采用塞托溴铵与口服茶碱联合治疗。比较两组治疗前及治疗后1、6、12个月肺功能、呼吸困难指数（ mMRC）评分及不良反应发生情况。结果治疗前两组第1秒用力呼气容积（ FEV1）、用力肺活量（ FVC）、FEV1／FVC、深吸气量（ IC）比较差异无统计学意义（P均＞0．05）；治疗后1、6、12个月两组FEV1、 FVC、FEV1／FVC、IC均较治疗前改善（P均＜0．05），观察组改善更为明显（P均＜0．05）。治疗前两组mMRC评分比较差异无统计学意义（P＞0．05）；治疗后1、6、12个月两组mMRC评分低于治疗前（P均＜0．05），且观察组降低更为明显（P均＜0．05）。两组不良反应发生率比较差异无统计学意义（P＞0．05）。结论噻托溴铵联合茶碱可改善稳定期COPD患者肺功能、减轻呼吸困难症状，且无严重不良反应发生。