摘要：利用已知植物的蛋白激酶及抗病基因氨基酸序列，设计含激酶保守功能域的简并引物，运用ｍＲＮＡ差异显示技术显示经病原菌诱导的抗性品系及感病品系愈伤组织ｍＲＮＡ表达差异，并对差异片段分子克隆。

摘要：从杭州郊区感病的甘蓝型油菜上分离到一种致病力较强的芜菁花叶病毒（Ｔｕｒｎｉｐｍｏｓａｉｃｖｉｒｕｓ，ＴｕＭＶ）分离物。大量提取病毒并纯化后，电镜观察病毒粒子约７４０ｎｍ×１２ｎｍ。以寡聚（ｄＴ）１５为引物合成ｃＤＮＡ，并根据外壳蛋白（ＣＰ）基因两端序列设计两个诱变引物进行ＰＣＲ扩增，得到一个特异性ＤＮＡ片段。将该片段克隆到ｐＵＣ１８中，经Ｓａｎｇｅｒ双脱氧法测序，结果表明该ＣＰ基因全长为８６７ｂｐ。与前人报道的两种芜青花叶病毒ＣＰ基因的核苷酸序列的同源性分别为８９．５％和９６．７％。，氨基酸序列的同源性分别为９４．５％和９７．９％。将ＣＰ基因亚克隆到原核表达载体ｐＫＫ２３３－２中，用ＩＰＴＧ诱导含插入片段表达载体的大肠杆菌，Ｗｅｓｔｅｍ印迹检测证明，大肠杆菌能表达病毒的ＣＰ。

摘要：对番茄花叶病毒番茄分离物（ＴｏＭＶ－Ｔｏ－Ｓ１）和烟草花叶病毒蚕豆分离物（ＴＭＶ－Ｂ９３５Ａ）进行了生物学和血清学比较。人工接种６科２０种植物，这两个分离物均能侵染其中的３科１４种植物，但在普通烟（白肋烟、黄苗榆）上的症状差异较大，前者在这些植物上引起局部症状，后者为系统症状。在琼脂双扩散试验中，两者与ＴｏＭＶ－Ｔｏ－Ｓ１抗血清和４种ＴＭＶ抗血清均形成沉淀线，但沉淀线之间产生刺角，说明ＴｏＭＶ－Ｔｏ－Ｓ１和ＴＭＶ－Ｂ９３５Ａ虽有血清关系，但亦有差异。胶内交叉吸附试验也证明两者之间有血清学差异。根据已报道的ＴｏＭＶ－Ｌ株系和ＴＭＶＵ１株系ＣＰ基因的３′端非编码区序列设计了ＴｏＭＶ和ＴＭＶ特异引物，采用ＰＣＲ方法，这些引物能够特异性的检测区分ＴｏＭＶ－Ｔｏ－Ｓ１和ＴＭＶ－Ｂ９３５Ａ。

摘要：采用 RAPD 方法对水牛梭形住内孢子虫、待定种及黄牛枯氏住内孢子虫缓殖子基因组 DNA 进行了分析,待定种 PCR 产物的电泳带型与枯氏住肉孢子虫的差异较梭形住内孢子虫大,这与二者表型性状一致的研究结果不吻合.对3种包囊种特异性的 PCR 指纹进行了筛选,回收和纯化了3种包囊种特异性的 DNA 片段,待定种0.7kb 片段经α-^(32)PdATP 标记后用作探针,只与同源 DNA 杂交,不与其它包囊、宿主细胞和艾美耳球虫杂交,用 pGEM-T Easy Vector 对该片段克隆成功,并测出其全长序列,为进一步设计特异引物建立标准 PCR 诊断方法和用作核酸探针奠定了基础。

摘要：本文报道采用反转录酶—聚合酶链式反应，体外扩增芜菁花叶病毒（ＴｕＭＶ）外壳蛋白基因及其克隆，并在大肠杆菌中获得表达的结果；从抗州市郊区感病的油菜上分离到一株致病力极强的芜菁花叶病毒分离物，提纯后，经５０ｎｇ／ｍＬ蛋白酶Ｋ和０．５％ＳＤＳ处理，苯酚／氯仿和氯仿抽提两次，酒精沉淀，获得了纯化的病毒ＲＮＡ，该ＲＮＡ与ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）＿（１５）退火后，在ＡＭＶ反转录酶的作用下合成了单链ｃＤＮＡ，然后加入用以扩增ＴｕＭＶ－ＣＰ基因的上下游引物，３５个循环后，得到了一条长约０．８５ｋｂ的片段，将该片段克隆到ｐＵＣ１８质粒的ＳａｌⅠ限制性酶切位点，分析了限制性酶切图谱，分析表明该片段含有ＥｃｏＲⅠ和ＸｂａⅠ以及引物设计时带人的ＭｃｏⅠ三个酶切位点，该片段克隆到大肠杆菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ）原核表达载体ｐＫＫ２３３－２质粒的ＮｃｏⅠ和ＨｉｎｄⅡ位点后，经ＩＰＴＧ诱导，以该病毒的抗血清为第一抗体，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测该基因的表达产物，结果表明该基因的表达产物为ＴｕＭＶ－ＣＰ蛋白，因而认为所获得的扩增片段确为芜菁花叶病毒外壳蛋白基因。