摘要：近年来涉及系统生物学的毒理学研究已日渐兴起,在整体性、动态性、网络调控性的内涵下,关注外来物质对机体的损伤评估与预测。药物与生物大分子作用涉及机体网络系统的巨大复杂性,使得对药物毒性作用机制的理解难度也有所增加。应用计算与实验系统生物学,药物毒理学研究在生物组织扩大到多重尺度网络分析,并由此说明治疗作用和不良反应。系统毒理学依靠实验"组学"技术,在大量可变因素中能测量多重变化,通常在全基因组水平建立网络分析药物作用。组学技术由于将个体基因组状态联系到所用药物的治疗效能和毒性反应,通常在全基因组水平建立分析药物毒性的网络系统。通路与网络分析相结合,毒理效应与毒代动力学模型,和基因多态性知识,将发展为预测毒性作用的模型。基于诸如美国食品药品管理局不良事件报告系统网络分析,可建立初步了解分子水平的药物靶点相互作用,导致器官和各级水平不良反应表型过程的远端效应。系统生物学的集成数据设计分子及相互之间作为一个网络行为,如动力学模拟,代谢调控,鲁棒性和流量分析,确实有助于理解网络介导的毒性及药物毒理学。

摘要：目的:研究人CYP3A4与POR和cyt b5用悬浮细胞共表达时的最佳条件。方法:悬浮培养Sf 9细胞,分别摸索摇床的温度、转速、摇瓶中细胞液的量、表面活性剂的加量、细胞的培养时间,以及3种病毒的加量比例等条件,并进行优化;然后,将表达产物制成微粒体后用于睾酮的代谢,并分别测其代谢活性。结果:当恒温摇床的温度为27℃,转速为90 r/min,每250 ml摇瓶中加入80～120 ml细胞密度为5×105个/ml的细胞液,并加入0.1%的PluronicF-68,细胞培养72 h时,最适合细胞的生长和目的蛋白的表达。此时,当3种病毒的加量比例为1∶1∶1时,表达条件最佳,其对底物睾酮代谢的Km值、Vmax和CLint分别为119.6μmol/L、0.52μmol/(min.g蛋白)和4.34 ml/(min.g蛋白)。结论:通过三重共表达CYP3A4、POR、cyt b5,以及对表达条件的优化,提高了目的蛋白的表达量,得到了较高代谢活性的CYP3A4,从而为新药代谢及药物-药物相互作用研究奠定了基础,为药物代谢酶的大量表达提供了可行的方案。

摘要：人细胞色素P450(cytochrome P450,CYP)在临床上对外源及内源性的物质代谢起着至关重要的作用。由于从人组织中获取的CYP成分较为复杂,且人组织本身不易获得,人们开始用各种表达系统来进行CYP的异源表达,并将表达得到的单一CYP用于药物代谢及药物-药物相互作用的研究,从而大大提高了药物高通量筛选的效率。另外,由于药物代谢酶的多态性使不同人群表现出对某种药物药效的差异,因此对某种CYP突变体的异源表达和药物代谢研究,将有助于指导治疗方案的优化,实施个体化药物治疗。

摘要：目的:评价新型4,8-二取代-8,9-二氢吡嗪[2,3-g]喹唑啉-7(6H)-酮系列化合物体外抗肿瘤活性,获得高效抗肿瘤小分子化合物用于后续药物研发。方法:固相合成17个设计作用于表皮细胞生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR),结构为4,8-二取代-8,9-二氢吡嗪[2,3-g]喹唑啉-7(6H)-酮的新型系列化合物。采用MTT法对人肺癌细胞株A549、人慢性髓细胞性白血病细胞株K562及人胃癌细胞株SGC7901加药96 h后进行抗肿瘤活性筛选。结果:对于人肺癌细胞株A549,化合物7-13和7-14抑制效果最佳,其IC50值分别为8.10和8.12μmol/L。共有8个化合物对人慢性髓细胞性白血病细胞株K562有抑制作用,其中化合物7-2、7-13和7-17抑制效果最佳,其IC50值分别为2.22、0.57和7.20μmol/L。而对于人胃癌细胞株SGC7901,化合物7-3和7-13具有抑制效果,其IC50值分别为4.20和9.71μmol/L。结论:17个化合物对3种肿瘤细胞株呈现不同抑制效果,为结构修饰以提高化合物抗肿瘤活性提供了很好的依据。其中化合物7-13对所测瘤株均具增殖抑制活性,可作为潜在药物用于后续抗肿瘤药物研发。

摘要：大量研究已经证明DNA和各种疾病之间或多或少地存在一定的联系。先天获得的基因多态性决定了个体对疾病易感性的差异,后天发生的体细胞突变是直接造成疾病的原因。人类生存在一个特定的环境中,遗传因素和环境因素相互交织,共同作用于人类。自出生起,DNA就会不断受到内源性物质和外源性物质的作用,体细胞突变不断累积,一旦形成肇事突变(drivermutation)或肇事突变组合(driver mutation pattern),就会产生病变细胞,进而发展成病变组织、病变器官,最后产生可被检查发现和主观感知的疾病。体细胞突变的位点是随机发生的,不同的个体就有不同的突变类型。虽然疾病的发生是由一定的肇事突变引起的,但是,突变的具体部位各不相同,因此,疾病是个性化的。目前临床大量难治性疾病大多是症状类似,而发病机制是个性化的,由于其个性化实质无法掌握便成了临床难治性疾病。个性化疾病其实需要个性化治疗,目前颇受临床青睐的靶向治疗药物更需要针对正确目标。无关突变(passenger mutation)虽然与疾病的发生没有直接关系,但是,研究证明它们也可能是疾病治疗过程中的有效靶标。近年,随着全基因组测序技术和生物信息学的发展,人类处理大量基因信息的能力有了很大提高。同时,随着对疾病机制的深入研究,新型靶向药物的数量逐年增加。体细胞突变的信息是否是选择靶向药物使用的个性化标志物,这个崭新的研究思路进入人们的视野,为许多难治性疾病带来了治愈的希望。