摘要：目的在真核细胞中表达Zhejiang Children’s Hospital（ZCH）-7-2F9（简称2F9）单链抗体（scFv2F9）以获得高活性的目的蛋白，为2F9其他类型的基因工程抗体及其免疫毒素的研究奠定基础。方法根据pSectag2A多克隆位点、（G4S）3及scFv2F9基因序列，设计含有SfiI、EcoRI酶切位点、6×His以及终止密码TGA的引物，采用高保真的Taq酶，通过重叠延伸拼接法（splicing by overlap extension，SOE）扩增克隆到scFv2F9基因，将扩增到的目的基因片段克隆到pGEM T—easy载体，测序核实后再克隆到pSectag2A真核分泌型表达载体中。阳性重组质粒pSectag2A／scFv2F9转染中华仓鼠卵巢（CHO）细胞进行目的蛋白的瞬时表达，将培养上清浓缩后，流式细胞术观察其对亲本单抗的阻滞效果。结果真核分泌型表达载体pSectag2A／scFv2F9在CHO细胞中获得成功表达，其相对分子质量为31000。亲本直标单抗2F9-FITC被真核细胞表达的scFv2F9阻滞后其阳性细胞百分数、平均荧光强度和最高峰值分别下降了90．02％、63．30％和63．38％。结论克隆到的2F9V。和2F9VL基因及构建的真核分泌型表达载体pSectag2A／scFv2F9是正确的，scFv2F9在CHO细胞中获得成功的表达，且有较高的识别和结合人CD14抗原的功能。

摘要：目的了解8~18岁儿童对儿科临床研究的认知程度,为该人群的科普宣教提供依据。方法设计调查问卷于2016年1月至2017年1月通过微信问卷网及现场调查相结合的方式进行调查研究,按照不同发育情况,把接受问卷调查的儿童分为8~10岁、11~13岁、14~15岁、16~18岁组,分析儿童对临床研究认知的情况。结果发放问卷1329份,回收问卷1233份,有效回收率92.8%。药物临床研究的总体知晓率为32.8%(405/1233)。22.9%(282/1233)的人认为,临床研究是拿人做小白鼠。选择自己应该决定是否参加临床研究的占44.6%(550/1233),选择父母或监护人决定的占74.2%(915/1233),选医生决定的占36.8%(454/1233)。当自己想要参加研究,而父母或监护人不同意时,选择放弃的占33.9%(418/1233)。当自己不想参加研究,而父母或监护人觉得应该参加时,选择放弃的占51.3%(632/1233),选择说服父母或监护人的占28.8%(355/1233)。对于参加临床研究的担忧,选择是否会增加额外的不舒服或痛苦的占68.1%(840/1233)。问到怎样可以减少担忧时,选择医生或护士对我很关心的总体比率为58.0%(715/1233)。对于怎样可以鼓励参加研究,选择知道其他小伙伴也跟我一样参加临床研究及知道参加研究后情况的分别占55.6%(686/1233)和49.3%(608/1233)。结论8~18岁儿童对临床研究的认知不高,需要针对该人群开展临床研究科学认知的宣教,需要采取措施真正关心参与研究的儿童。

摘要：嵌合抗原受体(CAR)-T细胞疗法是目前治疗复发难治性急性淋巴细胞白血病的有效方法。近年来,该领域研究发展迅速,尤其在CAR基因结构的改进、CAR-T细胞治疗过程中不良反应的发生及其对策、新技术的应用等方面有了明显的进展。本综述主要阐述CAR-T的结构和新型设计、不良反应及其对策、基因编辑新技术的应用以及提高CAR-T疗法有效性和安全性等方面的进展。

摘要：随着医院信息系统建设的不断发展，越来越多的医疗采集、检验、监护设备在医院被采用。目前，绝大多数医疗设备都是通过串行口、USB、以太网的有线连接方式，将其数据传输到外部应用系统或监控中心。而有线连接的方式限制了医疗设备的移动性、灵活性。特别是现在医院的各种临床诊疗、护理和管理，对医疗业务移动处理的需求不断增强，因此在不改变现有医疗设备的情况下，开发设计一款针对于医疗设备的无线数据传送系统非常有必要。目前，国内外的研究都是停留在根据医疗设备接口设计无线数据转发适配装置，仅仅完成了医疗设备数据的无线接入功能，而对医疗设备的移动状态、位置信息等没有涉及[1-3]。但是，这些功能对医疗设备的运行管理和监控非常重要。

摘要：目的 总结小儿心脏术后早期（〈72h）合并呼吸道合胞病毒（Respiratory Syncytial Virus，RSV）感染对患儿术后病程的影响及其转归并分析总结治疗经验。方法回顾分析2005年5月至2008年5月浙江大学医学院附属儿童医院SICU收治的39名先天性心脏病（先心病）心内直视术后早期合并RSV感染的患儿的术后病程和转归。并1：1随机配对抽取同期收治的同年龄、同病种、无RSV感染的先心病心内直视后的39名患儿作为对照组。采取成组配对设计资料的t检验法比较两组患儿的呼吸机辅助通气时间、住ICU时间和住院时间；采取Fisher精确检验法检验二次插管率、无创辅助通气应用率以及术后常见并发症的发生率。再根据患儿年龄、先心病病种以及是否合并肺动脉高压进行分组比较。结果两组患儿均痊愈出院。RSV感染显著延长患儿的呼吸机辅助通气时间、住ICU时间和住院时间，并增加术后肺不张的发生率（P〈0．05）。对年龄〈6个月的患儿RSV感染不仅显著延长呼吸机辅助通气时间、住ICU时间和住院时间（P〈0．05），还增加术后低心排综合征和合并感染的发生率（P=0．05）；而对〉24月的患儿无显著影响。对紫绀型先心病患儿显著延长其呼吸机辅助通气时间，住ICU时间和住院时间（P〈0．05）；对非紫绀型先心病患儿仅显著延长住ICU时间和住院时间（P均〈0．05）。对合并肺动脉高压患儿RSV感染不仅显著延长呼吸机辅助通气时间，住ICU时间和住院时间，还增加术后合并感染的发生率（P均〈0．05）；而对无肺动脉高压患儿仅延长住院时间（P〈0．05）。结论小儿心脏手术后早期合并RSV感染会对术后病程产生不良影响，尤其对小婴儿，紫绀型先心及合并肺动脉高压的患儿影响更大。早期诊断，采取有效的循环、呼吸支持结合抗病毒等综合治疗取得了较满意的治疗效果。

摘要：目的调查儿科ICU护士对每日唤醒的知信行情况,为临床培训提供参考。方法采用方便抽样法,于2021年7月对我国7所三级甲等儿童医院的298名儿科ICU护士进行问卷调查,调查工具为自行设计的一般资料调查表、每日唤醒知信行问卷。结果298名儿科ICU护士对每日唤醒的认知:知识得分为4(2,4)分,得分率为40%,157名(52.68%)护士表示不太了解或从未听说过每日唤醒。态度:认可度得分32(27,34)分,得分率为80%,217名(72.82%)护士愿意实施每日唤醒,258名(86.58%)护士想获得系统培训。实践行为:221名(74.16%)护士未接受过相关培训,159名(53.35%)护士从不或很少实施每日唤醒。结论儿科ICU护士对每日唤醒知识掌握较差,对每日唤醒的认可度较高,实践行为还有待加强,护理管理者应充分重视儿科ICU护士的培训需求,开展每日唤醒基础知识和实践技能的系统培训,提高护士每日唤醒实践水平。

摘要：目的　快速检测 6种疱疹类病毒DNA。方法　在疱疹类病毒高度同源序列DNA多聚酶基因中设计两对通用引物 ,一对扩增单纯疱疹病毒Ⅰ型与Ⅱ型、爱泼斯坦 巴尔病毒和人巨细胞病毒 4种病毒 ,另一对扩增水痘 带状疱疹病毒和人类疱疹病毒 6型 2种病毒。经DNA聚合酶链反应(PCR)扩增 ,并对扩增产物进行分子克隆序列分析后 ,选择BamHⅠ或BstUⅠ酶切对扩增产物进行鉴别。结果　 6种标准病毒株PCR扩增后产物为 5 10～ 5 92bp ,其最小检出量为 0 .1fg ,与乙型肝炎病毒、真菌、细菌和人类基因组DNA无交叉反应。用该方法检测临床 89份脑脊液 (CSF)和 75份血标本中的疱疹类病毒 ,13份 (14 .6 % )CSF和 2 6份 (34.7% )血标本为阳性 ,通过BamHⅠ或BstUⅠ两种酶切后能明确系何种疱疹类病毒。同时用酶联免疫吸附 (ELISA)法检测该标本的HSVⅠ /Ⅱ、EBV和CMV这 4种病毒的IgM ,10例阳性。这 4种病毒的PCR阳性检出率为 30 .7% ,而ELISA法为13.3% (P <0 .0 5 ) ,具有显著的差异性。 38例正常健康儿童的血和 9份非病毒感染的CSF标本 6种疱疹类病毒DNA均为阴性。结论　PCR加限制性内切酶片段长度多态性分析具有特异敏感 ,快速准确的特点 ,为疱疹类病毒感染的早期快速诊断提供了有效的手段。

摘要：人因工程学是应用科学领域的一门新兴的边缘学科，发展很快。本研究介绍了人因工程学的发展以及研究目的，并从实际出发，结合一些具体案例的分析，探讨了人因工程对医疗设备的设计、管理和引进的重大指导意义，以帮助在医疗设备的设计、制造以及引进方面取得更好的效果。

摘要：面斜裂是胚胎时期侧鼻突和上颌突上部未能完全融合所致，因多合并有骨骼、软组织、皮肤及眼鼻唇等诸多重要器官的畸形，手术修复比较困难，尤其骨骼修复是一大难点。我们应用计算机辅助设计、制造（CAD／CAM）等技术，建立三维模型，制作个性化钛网，为1例面斜裂患儿进行了骨修复，获得较好的效果。1资料与方法1．1病例介绍患儿男，9岁，2009年5月人院。检查：左面部可见一自左鼻根沿左眼眶下缘至左颞部的弧形瘢痕，左颧部内陷，左鼻翼口角向外上挛缩移位，左眼裂闭合困难，左眼无光感。

摘要：目的 :通过 PCR- RFLP、DNA克隆和测序分析来检测和区分 6种疱疹类病毒 ,探讨其在临床上的应用价值。方法 :在疱疹类病毒高度同源序列 DNA多聚酶基因中设计两对通用引物 ,一对扩增单纯疱疹病毒 1型和 2型、爱泼斯坦 -马尔病毒、人巨细胞病毒 4种病毒 ,另一对扩增水痘 -带状疱疹病毒和人类疱疹病毒 6型 2种病毒 ,经DNA PCR扩增 ,并对扩增产物进行分子克隆、序列分析后 ,选择 Bam H 或 Bst U 酶切扩增产物进行鉴别。最后 ,对临床 38份脑脊液 (CSF,临床诊断为病毒性脑炎的病例 )和 4 9份血标本 (其中 2 7份为确诊病例 ,2 2份为临床诊断病例 )进行疱疹病毒的检测。结果 :38份 CSF标本中 13份阳性 (34.2 % ) ,2 7份确诊病例标本均阳性 (10 0 % ) ,2 2份临床诊断病例标本 16份阳性 (72 .7% )。这些阳性标本通过 Bam H 或 Bst U 两种酶切后能明确系何种疱疹类病毒。 6 8例正常健康儿童的血和 9份非病毒感染的脑脊液标本 6种疱疹类病毒 DNA均为阴性。结论 :聚合酶链反应加限制性内切酶片段长度多态性分析为疱疹类病毒感染的临床诊断提供了一种有效的手段。