摘要：髓样分化因子My D88(myeloid differentiation factor 88)信号通路是一个具有多种调节功能的传导通路,在免疫反应、炎症反应及肿瘤的发生和发展过程中均发挥重要作用。构建猪(Sus scrofa)My D88基因的shRNA干扰载体,并在转录水平和蛋白质表达水平对其干扰效果进行验证,以筛选出干扰效果最优的干扰载体。根据猪My D88基因(Gen Bank登录号:KC766424.1)全长c DNA序列,利用Invitrogen公司在线设计软件设计出4对shRNA干扰序列,退火成双链后,分别将其插入到p Yr-1.1载体中,构建My D88基因的shRNA真核表达载体p Yr-1.1-pig My D88-sh1、p Yr-1.1-pig My D88-sh2、p Yr-1.1-pig My D88-sh3、p Yr-1.1-pig My D88-sh4,并通过双酶切和测序对其进行鉴定。构建成功后转染猪肺泡巨噬细胞3D4/2,通过Real-time PCR及Western blot验证My D88基因的表达水平,以及对LPS刺激后炎症因子TNF-α基因表达水平的影响。结果表明,所构建的猪My D88基因的特异性shRNA表达载体均可显著降低猪My D88 mRNA和蛋白质的表达水平(P<0.05),干扰效率分别达到36%、67%、60%、69%;相比于未干扰组,LPS刺激My D88沉默之后的巨噬细胞,炎症因子TNF-α基因表达水平显著下降(P<0.05),表明所构建猪My D88干扰载体干扰效果较好。

摘要：试验旨在通过研究饲粮不同能量和蛋白质水平对育成期绿壳蛋鸡生长性能和屠体成分的影响,得出其育成期能量和蛋白质的需要量。选取864只体重相近的60日龄新杨绿壳蛋鸡,随机分为6组,每组4个重复,每个重复36只鸡。采用2(代谢能:11.09和11.72 MJ/kg)×3(粗蛋白质:14.00%、14.50%和15.00%)因子设计试验,共设计6种饲粮饲喂绿壳蛋鸡。预试期1周,正试期8周。结果表明:1)不同能量水平对育成期绿壳蛋鸡平均日采食量和平均日增重有极显著影响(P0.05);能量和蛋白质水平在平均日采食量和平均日增重上未表现出显著的交互作用(P>0.05)。2)不同能量水平对育成期绿壳蛋鸡胫骨长度有显著影响(P0.05);能量和蛋白质水平在胫骨长度上未表现出显著的交互作用(P>0.05)。3)能量和蛋白质水平对育成期绿壳蛋鸡屠体成分均无显著影响(P>0.05),能量和蛋白质水平在屠体总能上表现出了显著的交互作用(P<0.05)。根据饲养试验和比较屠宰试验结果,按Y=a+bx的数学模型进行一元线性回归分析得出,育成期绿壳蛋鸡饲粮代谢能和粗蛋白质营养需要量分别为11.40 MJ/kg和14.45%。

摘要：本试验旨在通过研究饲粮不同代谢能、粗蛋白质水平对新杨绿壳蛋鸡产蛋后期(44~56周龄)生产性能、蛋品质及血清生化指标的影响,得出其产蛋后期饲粮代谢能和粗蛋白质的适宜配比。选取768羽体重相近的43周龄末新杨绿壳蛋鸡,随机分为6组,每组4个重复,每个重复32羽。采用2×3因子(代谢能水平为10.87和11.08 MJ/kg,粗蛋白质水平为15.00%、15.50%和16.00%)设计试验,共设计6种饲粮。试验预试期1周,正试期12周。结果表明:1)饲粮不同代谢能、粗蛋白质水平对绿壳蛋鸡产蛋后期产蛋率和料蛋比有显著影响(P0.05)。3)高能低蛋组绿壳蛋鸡血清尿素氮含量最低;饲粮较高代谢能水平(11.08 MJ/kg)能显著降低绿壳蛋鸡血清总胆固醇含量(P<0.05)。综上,在本试验条件下,饲粮代谢能、粗蛋白质水平分别为11.08 MJ/kg和15.00%时,更有利于绿壳蛋鸡产蛋后期生产性能的发挥和蛋品质的改善。

摘要：本实验旨在对猪新基因FAM134B基因进行全长克隆,尝试有效沉默FAM134B基因的干扰表达载体的构建和筛选,并筛选出沉默FAM134B基因的稳定阳性细胞。设计合成3对FAM134B基因的特异性发夹siRNA干扰片段,将其克隆入干扰载体pYr-1.1,构建可沉默FAM134B基因的siRNA表达载体FAM134B-1、FAM134B-2和FAM134B-3,采用LipofectamineTM(Lip)2000介导质粒转染肌内前体脂肪细胞,通过实时荧光定量分析siRNA表达载体的干扰效果,并进一步用G418进行了稳定转染siRNA的肌内前体脂肪细胞筛选。结果表明:FAM134B基因的全长克隆成功,其siRNA表达载体构建正确,通过稳定筛选后,干扰效率较高的FAM134B-3表达载体和稳定转染FAM134B-3的细胞为构建筛选成功的siRNA表达载体和阳性细胞,干扰效率达65.0%。本研究成功克隆了新基因FAM134B的全长以及构建了有效沉默FAM134B基因表达的干扰载体,并筛选出了稳定沉默的阳性肌内前体脂肪细胞,为进一步研究FAM134B基因在脂肪沉积中的功能研究奠定了基础。

摘要：试验旨在研究能量、蛋白水平对育雏期绿壳蛋鸡生长性能、屠体成分和血清生化指标的影响。选用720只1 d新杨绿壳蛋鸡,随机分成6组,每组4个重复。采用2(代谢能11.51或11.93 MJ/kg)×3(粗蛋白质:17.0%、18.0%和19.0%)因子设计试验,共设计6种日粮。结果表明:能量水平对育雏期绿壳蛋鸡末期体重、平均日采食量和胫骨长度有极显著影响(P0.05);能量水平对育雏期绿壳蛋鸡屠体脂肪和总能影响显著(P0.05);能量水平对育雏期绿壳蛋鸡血清尿酸、总胆固醇和总蛋白含量均影响显著(P0.05);能量和蛋白水平在生长性能、屠体成分及血清生化指标上未表现出显著的交互作用(P>0.05)。本试验中适宜的能量和蛋白质水平分别为11.93 MJ/kg和19.0%。