摘要：彗星实验是瑞典科学家Ostling和Johanson于1984年发明的检测毒物DNA损伤效应的方法。它经历了从最初的微电泳技术、中性彗星实验、碱性彗星实验、酶切彗星实验和双向垂直彗尾彗星实验等不断完善的发展过程。在毒理学、遗传学和环境生态科学等领域有着重要的应用,是经济合作与发展组织(OECD)和欧洲食品安全局等国际组织推荐的测定遗传毒性的方法之一。彗星实验的关键点包括单细胞悬液的制备、细胞裂解液的成分与比例,低熔点琼脂糖凝胶的浓度,电泳条件等。在典型应用领域,如蚯蚓、鱼、两栖动物、鼠和人的彗星实验很难找到标准实验方案。成功的彗星实验还需关注,实验设计时必须包括阳性对照,结果表述时必须有图为证,实验方案可能因物种或细胞而异。

摘要：选取3份长豇豆种质资源进行全基因组重测序,利用重测序数据挖掘InDel位点,根据这些位点开发分子标记,并验证这些标记的有效性和应用价值。经过严格筛选,获得981个易于凝胶电泳检测的长度大于30 bp且多态性高的InDel位点,挑选其中在基因组上均匀分布的165个设计引物并进行验证。用6份长豇豆材料对165对引物进行初筛,其中162对可获得PCR扩增产物,共扩增出673条条带;85对引物表现出多态性,多态性带333条(占总带数的49.48%)。利用85个多态性高的标记对173份长豇豆资源进行基因分型和遗传多样性分析,共检测到333个等位位点;多态性信息含量(PIC)为0.01~0.37,平均值为0.29;基因多样性指数变异范围为0.01~0.50,平均值为0.36,表明现有长豇豆资源遗传背景相对狭窄。通过聚类分析,173份长豇豆被分为2个类群,成功将不同类型长豇豆划分到不同亚群。另外,选用亲本间多态性标记用于6个杂交组合的F1代真实性鉴定,鉴定出5个真实杂交种。本研究所开发的多态性InDel标记在长豇豆遗传多样性分析、杂交种纯度鉴定、遗传连锁图谱构建、基因定位和分子标记辅助选择育种等方面具有很好的应用前景。

摘要：开花植物中B、C和E类MADS-box基因控制花雄蕊和雌蕊的合成。以具有高度进化蕊柱(雄蕊和雌蕊合生)的建兰为材料,从已有转录组中搜索到14个B、C和E类基因,包括GLO、DEF、AG、SEP和AGL6类基因,并进行实时荧光定量表达分析,发现CeDEF1和CeAGL6-1在萼片和花瓣中大量表达,唇瓣中微量表达;CeDEF3、CeDEF4和CeAGL6-3则在唇瓣和蕊柱中大量表达,在萼片和花瓣中几乎不表达;CeAG1和CeAG2主要在蕊柱中表达;而且CeDEF3、CeDEF4、CeAG1、CeAG2和CeAGL6-3在蕊柱突变体‘新品梅’的蕊柱状花瓣中的表达量比‘铁骨素’花瓣中高很多,说明这几个基因在建兰蕊柱的形成过程中可能扮演关键角色。

摘要：用正交试验设计法研究了6-BA,NAA和24,-D 3种植物生长调节剂对根茎秋海棠‘Helen Lewis’叶片诱导不定芽的影响,建立了根茎秋海棠叶片再生体系。结果表明,诱导根茎秋海棠不定芽发生的最佳配方为:MS+2 mg.L-1 6-BA+0.5 mg.L-1 NAA+0.5 mg.L-1 2,4-D,36 d时诱导率为86.7%,并有淡绿色愈伤组织形成。附加0.5 mg.L-1 6-BA+0.2 mg.L-1 NAA的MS培养基有利于不定芽的分化和增殖。在1/2 MS+0.5 mg.L-1 IBA的培养基中生根效果最好,高于4 cm的再生植株移栽成活率达90%以上。

摘要：在既有农业六次产业化框架下,农业从业人员涉足跨产业经营时,面临营销开拓能力不济、加工能力不足等多重困境,难以有效提升农业及从业人员的市场地位,遑论促进涉农三次产业的深度融合发展,而基于生产侧的农业企业品牌可以有效弥补既有农业六次产业化的上述缺陷。特此提出基于农业生产侧企业品牌的农业六次产业化2.0战略构想,由农民专业合作社主导组建新型农业六次产业经营体,使之成为实施品牌创新、促进产业融合、提升农产品附加值的主体,以促进中小农户参与、分享、延伸产业附加值。

摘要：为获得高产α-半乳糖苷酶,通过单因素实验,研究黑曲霉变种Aspergillus ***1182在固态发酵条件下产α-半乳糖苷酶的培养基组成和发酵条件,继而采用Ln18(37)正交试验设计,对影响黑曲霉*** CGMCC1182产α-半乳糖苷酶的7个主要因素进行研究,对影响产酶的重要因素进一步优化.结果表明,黑曲霉变种*** CGMCC1182产α-半乳糖苷酶的最适培养基组成为:麸皮∶豆粕=7∶3(W/W),在此基础上添加2.0%的棉子糖、2.5%的(NH4)2SO4和0.5%的MgSO4;产酶最适发酵条件为:培养温度30℃,培养基含水率55%,培养基装量为250 mL三角瓶中装入14 g培养基,接入10%(V/W)的孢子悬浮液(孢子浓度107个?mL-1),静置培养68 h获得最高α-半乳糖苷酶产量,酶活达308.5 U?g-1.

摘要：为开发更多的菊科菊属特异性的SSR分子标记,了解多头菊的SSR位点的分布特点,本研究对多头菊多个花色突变体的头状花序的转录组进行了SSR分析。结果表明,分析测序共获得143744个Unigene,总长度为128169452 bp(128.16 Mb),通过分析检索在23099条Unigenes上存在28413个SSR位点,计算发生频率为19.77%,分布频率为18.11%,在数据信息中平均分布距离为4.51 kb。在不同核苷酸重复类型中,单到三核苷酸SSR为多头菊优势位点,约占SSR总数量的90.19%。单核苷酸SSR主要以A/T类型为主,出现18857次,占总SSR数的66.37%。二、三核苷酸SSR出现次数最多的分别是AC/GT(1617次,5.69%)和AAC/GTT(1111次,3.91%),四、五、六核苷酸SSR数目较少,仅占总SSR的0.48%。多头菊SSR的长度主要分布在10~24 bp,占SSR总数的89.65%。共1272838个SNP位点被筛选,测序信息中的发生频率为0.24%,主要类型以同类碱基转换形式(腺嘌呤A/鸟嘌呤T,胞嘧啶C/胸腺嘧啶G)存在,占所有类型的59.35%,碱基颠换类型共4种(A/T,A/C,T/G,C/G)。利用软件共设计SSR引物8920对引物,有33.78%的Unigenes(含SSR位点)能够获得SSR特异引物。本研究针对性地分析了多头菊头状花序的转录组中SSR的分布特点,了解多头菊的头状花序在发育期的分子特性,为多头菊种质资源的遗传分子机理研究提供了基础,同时为筛选和开发利用多头菊的优良分子信息提供了科学依据。

摘要：转Cry1Ab基因水稻Bt01为一种新型的转基因水稻,文章首先利用Southern blotting验证了外源基因Cry1Ab转入了Bt01中,且为单拷贝,再利用TAIL-PCR方法获得了其插入位点信息,根据获得的Bt01的5′端插入位点序列,设计了相应的定性与定量PCR检测体系的引物及探针,实验结果显示,定性PCR检测体系的最低检测极限(LOD)为10个拷贝,定量PCR检测体系的LOD为5拷贝,最低定量极限(LOQ)为10拷贝。同时为了验证建立的定量PCR体系的准确性,利用该体系检测已知转基因水稻Bt01含量分别为3%和0.5%的样品,定量结果分别为2.7%和0.47%。研究结果表明,该转化体特异性定性与定量检测方法具有高度的特异性和良好的灵敏性,为转基因水稻Bt01的身份识别和检测提供了有效的方法。

摘要：为了研究杨梅疏果核仁苦杏仁苷提取物的生物活性,采用DPPH和ABTS抗氧化体系,考察其粗提物和精提物的抗氧化活性,并通过小鼠止咳祛痰试验研究提取物的止咳祛痰功效。研究发现杨梅疏果核仁提取物对DPPH自由基和ABTS自由基具有良好的清除效果,且提取物浓度与清除率表现出较好的相关性。分析并计算得到粗提物与精提物清除DPPH自由基的IC_(50)值分别为1 335 mg/L和261 mg/L,清除ABTS自由基的IC50值分别为1 447 mg/L和281 mg/L,杨梅疏果核仁苦杏仁苷精提物较粗提物表现出了更好的体外抗氧化活性。通过ICR小鼠止咳祛痰功能试验发现杨梅疏果核仁苦杏仁苷粗提物45,90,180 mg/kg各剂量均能不同程度地延长氨水引咳小鼠的咳嗽潜伏期,减少2 min内的咳嗽次数,其中90 mg/kg剂量组咳嗽潜伏期较对照组明显延长(P<0.05),表明其有较好的止咳功效。杨梅疏果核仁苦杏仁苷粗提物各剂量组以及苦杏仁苷标准品对小鼠气管酚红排泌量影响不显著,表明无明显祛痰作用。

摘要：查尔酮合成酶基因是类黄酮生物合成途径的关键基因,在植物发育和逆境反应中起着重要作用。根据已发表的查尔酮合成酶基因序列设计全长引物,以芥蓝(Brassica albograbra)叶片基因组DNA和花蕾cD-NA为模板,克隆到了芥蓝查尔酮合成酶基因全长序列,命名为BaCHS。该基因DNA全长为1 263 bp,具一个长度为75 bp的内含子,编码区长度为1 188 bp,编码395个氨基酸。序列比对结果表明,BaCHS基因编码的氨基酸序列与其他十字花科植物之间的同源性很高,仅存在个别氨基酸残基的差别。