摘要：目的利用杂交探针结合熔解曲线分析技术，建立一种适用于临床的快速、可靠的实时PCR检测载脂蛋白E（apoE）基因型的方法。方法应用Light Cyeler技术，优化主要反应条件，设计在1个PCR中可同时分析2个密码子的多态性方法。选取60岁以上中心性肥胖症133例和体检正常老年者108名为研究对象。首先以LC-Red640和LC-Red750标记两条针对突变位点为112和158的检测探针的5′端，相应的锚定探针在3′端被荧光标记，再从研究对象基因组DNA中快速循环PCR特异引物扩增apoE基因265bp片段，将其与特异探针杂交后，引发荧光共振能量转移，通过异源杂交的出现和错配碱基类型的熔解参数来完成和评价野生型和突变基因分型的特征性。结果峰值对应着序列特异的熔解温度点，各基因型的模板均呈现良好的峰形。中心性肥胖症组突变型以E2／3、E3／4基因型频率最高，与正常组比较差异有统计学意义（χ^2=4．210，P〈0．004；χ^2=6．328，P〈0．012），中心性肥胖症组和对照组分布频率分别为E2／3型37例（27．8％）和18例（16．7％）、E3／4型33例（24．8％）和13例（12．0％）、E3／3型56例（42．1％）和74例（68．5％）、E2／4型3例（2．3％）和2例（1．9％）、E4／4型3例（2．2％）和0例（0）、E2／2型1例（0．8％）和1例（0．9％）；其结果与测序结果一致；中心性肥胖症组apoE基因总浓度（101．2±73．6）表达水平也较对照组（50．6±27．1）显著升高（t=3．359，P〈0．001）。结论该方法操作简便省时，不易交叉污染；获得的各种基因类型特征性强，适用于临床和流行病学调查的快速诊断分型。apoE基因多态性与老年中心性肥胖症存在相关性，对携带E3／4型、E2／3型或E4／4型的个体，可提示决定个体老年中心性肥胖遗传易感性方面起到重要作用。

摘要：目的:建立一种灵敏度高、特异性强、定量、精确、操作简便的微孔板酶联夹心杂交技术,定量检测人IL-8 mR-NA。方法:针对人IL-8 mRNA逆转录聚合酶链反应产物一条链的不同区域序列设计一对特异探针,其中一条为捕获探针,5′端用活性氨基修饰,与微量DNA结合板表面的NOS基团共价结合,“竖直”地包被在微孔板内;另一条检测探针的3′端标记生物素,和辣根过氧化物酶结合。提取人外周血单个核细胞总RNA,进行RT-PCR扩增IL-8 mRNA,双链DNA产物经热变性后加入已包被捕获探针的微孔板内进行杂交,加入检测探针与已杂交的产物结合,经亲和素-辣根过氧化物酶系统检测杂交信号。结果:该法灵敏度为检出16个循环的PCR产物、5×103个PBMCs中的IL-8 mRNA、检测PCR终产物的最高稀释倍数为1∶256阳性;特异性试验非目的扩增片段酶联杂交检测未检出阳性杂交信号;精密度试验CV为5.2%。结论:该方法具有操作简便、灵敏度高、特异性强等优点,适合IL-8 mRNA PCR扩增产物的定量检测。

摘要：目的观察坐、卧姿对骨科常测指标血压(BP)、脉搏(P)、血沉(ESR)、血常规(BRt)等4类9项监测值的影响。方法组织100例志愿者经同体配对设计,对同体坐、卧两种姿态同一部位的收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、P、ESR、红细胞(RBC)、白细胞(WBC)、血小板(PLT)、血红蛋白(HB)、红细胞压积(HCT)等9项指标进行监测,用SPSS13.0统计软件进行自身配对t检验和相关性分析,比较坐、卧两种体位9项监测值差异有无统计学意义和各指标间的相关性。结果从卧姿到坐姿,SBP、DBP平均升高5.22%,P升高6.45%,BRt5项指标平均升高9.82%,而ESR却相反,下降18.41%,9项指标两种姿势比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论体位改变对BP、P、ESR、BRt等测量结果有显著影响,坐位时BP、P随血液浓度升高而增加,与RBC、HB、HCT等呈正相关,平均r=0.782,与ESR呈负相关,平均r=-0.701。护理人员在观察患者BP、P变化和进行血液采集时,需保持同一体位,以减少测量误差。

摘要：IL－1β是由淋巴细胞和非淋巴细胞分泌的一种细胞因子，除参与免疫调控、神经内分泌及抗肿瘤等多种生理过程外，并与发热、炎症以及某些疾病的病理变化有关，因而在临床及科研中，很多情况下需要了解IL－1βmRNA的表达水平。目前，主要采用点杂交、RT－PCR标准曲线法及实时荧光PCR等对IL－1βmRNA进行定量。这些方法，仍存在着某些不足，本研究利用特制的DNA结合板，设计了一种酶联夹心杂交方法，能简便、准确地对RT－PCR扩增后的人外周血单个核细胞(PBMC)中的IL－1βmRNA进行定量。

摘要：结合近年来医院发展的实践，探讨护理单元目标责任制考核体系的构建和应用。首先设计护理单元目标式量化考核标准，建立护理单元目标考评方法，对全院21个护理单元实行目标责任制考核。结果表明实行护理单元目标责任制提高了护理工作质量和效率，调动了护士工作积极性和合作性，促进了护理工作的安全性和创新性，提升了护理管理效能。

摘要：儿科用药根据体重或体表面积计算给药,用量少,注射室护士在配置药物时费时费心,每种药物都需根据常规剂量换算公式去换算,心算时容易出错,常导致抽取药液不够准确,而需要换算计量的药物又多,为寻求最快的计算方法,我们设计了换算表格来简化计算方法。[第一段]

摘要：研制一种吸痰连接管保护套,解决了吸痰连接管接头安全放置的难题。经临床应用,该吸痰连接管保护套是一种有效的吸痰连接管干燥保存用具,符合无菌技术要求,可避免院内交叉感染,操作简便、节约成本。

摘要：随着社会的不断进步，患者对医院的服务有更高的期望，对用药规范和合理性提出了较高的要求，这对医院药事管理的有效性、科学性也提出了更高的要求。门诊药房和静脉药物集中调配中心工作量大，高峰期集中，而医院普遍存在药师编制紧的现象，依靠手工记录过程，不但工作量庞大、工作速度慢，而且容易出现调剂差错及信息记录不够准确的问题，导致责任与权利不够清晰，不利于提高工作效率和科学管理。因此，医院药事管理手段由手工管理转变为信息化管理势在必行。

摘要：目的：建立整合素相关激酶（ ILK）基因敲降和黑色素瘤分化相关基因（ mda7）过表达慢病毒包装表达系统。方法：针对人ILK基因序列，设计基因敲降靶点序列（A、B、C），通过限制性内切酶HpaⅠ和XhoⅠ双酶切、T4 DNA连接酶连接，将ILK插入慢病毒载体pSicoR-eGFP，构建siILK-pSicoR-eGFP重组质粒；根据人mda7基因序列，设计引物扩增mda7全长，并插入慢病毒载体pLVX-Puro，构建mda7-pLVX-Puro重组质粒。经双酶切及测序鉴定正确后通过脂质体将慢病毒四质粒系统共转染人胚肾细胞系293 T细胞，进行慢病毒包装并测定病毒滴度、观察感染效率。各组病毒载体转染PC-3细胞后，用定量PCR和蛋白质印迹法检测ILK基因和mda7 mRNA转录水平及蛋白表达水平。通过MTT法和Transwell实验考察ILK和mda7对PC-3细胞增殖和迁移的影响。结果：成功构建ILK基因敲降及mda7过表达的慢病毒载体，四质粒系统共转染293 T细胞后可见大量绿色荧光染色阳性细胞。浓缩病毒后293 T细胞的感染效率在90％以上，并能高效率感染PC-3前列腺癌细胞。 ILK-A-pSicoR-eGFP和ILK-B-pSicoR-eGFP组ILK干扰效果最佳（P＜0．05），mda7的表达水平远高于对照组（P＜0．05），且持续稳定表达至少1个月。 ILK和mda7对PC-3细胞的增殖在96 h内有明显抑制作用，并对其迁移亦有显著抑制（均P＜0．05）。结论：成功构建并鉴定人ILK 基因敲降和mda7过表达慢病毒载体，可为探讨ILK和mda7基因在肿瘤细胞中的生物学功能提供良好工具，也为探索安全、高效的肿瘤治疗途径奠定实验基础。

摘要：目的探索人不同体位对血液流变14项参数的影响,为循证医学提供实验证据。方法118名志愿者经自身配对设计,在冬、春、夏三季,抽取坐、卧姿两种体位血液,其中18人采用站、坐、卧三种体位,检测血液流变14项指标;选择有坐姿和卧姿配对住院病人资料106例,用SPSS13.O软件进行自身配对t检验;统计4年医院数据库9496例血液流变检测资料,以大样本验证体位的影响。结果体位改变对血液流变14项检测参数差异有统计学意义(P&lt;0.01),其中全血(低切、中切、高切)粘度、全血还原(低切、中切、高切)粘度、血浆粘度、红细胞压积、红细胞聚集指数、红细胞刚性指数等10项指标,从坐姿到卧姿,平均降低10.62%,而红细胞变形指数、红细胞电泳指数、血沉、血沉方程K等4项则成负相关,平均升高13.59%,最高升20.13%;18名志愿者三种体位检测结果表明:从站到卧10项指标渐降:站姿&gt;坐姿&gt;卧姿,后4项则反之;体位改变15min内,变异程度超过室内误差2倍;大样本统计显示变异程度与实验组接近。结论地心引力导致不同体位血液流变的显著生理变异,临床在分析实验结果时,考虑体位因素,可减少10%的误诊率。