摘要：目的 :应用寡核苷酸芯片技术研究乳癌基因表达谱。方法 :根据文献获取目的基因 ,查询相应基因mRNA序列 ,通过计算机设计并合成探针 ,将探针点样于经化学修饰的载玻片上 ,制备含 2 88种基因的肿瘤相关基因寡核苷酸芯片。提取乳癌与相应正常乳腺组织总RNA ,通过逆转录制备荧光标记的cDNA探针并与芯片杂交 ,经洗片后扫描获取图像 ,计算机分析比较乳癌组织与正常乳腺组织的差异表达基因。结果 :检测 16例乳癌组织与正常乳腺组织标本 ,有 10例基因表达存在明显差异 ,其中表达增高的有 6种 ,表达降低的有 4种。结论 :乳癌组织与正常乳腺组织存在部分差异表达的基因 ,乳癌的发生发展与这些基因密切相关 ;寡核苷酸芯片技术在乳癌相关基因的研究中具有重要意义。

摘要：目的制备N-端保守部分多条带抗原(MB),克隆并在大肠埃希菌中表达其基因,并鉴定重组MB的抗原性。方法分析14个不同血清型解脲脲支原体(Uu)的基因排列,根据大肠埃希菌偏爱密码子,优化、设计合成DNA序列编码的氨基酸保守序列,合成的基因克隆到表达质粒,重组蛋白诱导和亲和层析纯化。结果通过对Uu 14个血清型MB抗原氮端的氨基酸序列的分析、比对,根据大肠埃希菌的偏好密码子优化、设计并合成碱基序列,目的基因片段与pET-41a构建重组质粒并转化大肠埃希菌后,IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析,得到了分子量约为45kd的重组蛋白,纯化后的MB抗原蛋白能够较特异地与特异性抗体结合,敏感性为85.7%,特异性为87.8%。结论 Uu N-端保守部分的MB蛋白已成功表达、纯化并被证明具有良好的免疫原性。

摘要：目的以荧光聚合酶链反应(PCR)技术为基础,构建早期筛查结直肠癌的血液Septin9甲基化检测体系。方法在美国国立生物技术信息中心(NCBI)数据库查找Septin9甲基化的CpG岛位点,设计相应的PCR引物。提取结直肠癌组织和癌旁组织的DNA,PCR扩增并测序确认Septin9基因启动子区高甲基化位点。针对高甲基化位点,设计荧光PCR和Taqman探针检测技术构建血浆标本甲基化检测体系,并对该检测体系的准确度、特异度、重复性及最低检出量进行评估分析。在57例结直肠癌患者和30例健康人血浆标本中进行Septin9甲基化检测,验证该检测体系的可靠性。结果组织标本中经测序确认Septin9基因高甲基化位点。以该位点为靶点设计荧光PCR检测体系,经评估,该检测体系的准确度为100%,特异度和重复性均为100%,最低检出量可达0.1ng/μL。在57例结直肠癌患者血浆标本中,Septin9甲基化位点检测的阳性率为71.92%(41/57),结直肠癌患者病理分期Ⅰ和Ⅱ期阳性率达64.2%;而健康人群血浆中Septin9基因均无甲基化。结论以Septin9基因甲基化位点为靶标的血浆荧光PCR检测体系具有灵敏度、特异度及准确度高的特点,是结直肠癌早期筛查的可靠检测技术,具有良好的临床应用前景。

摘要：目的:探讨生殖免疫抗体联合检测在女性不孕不育诊断中的临床价值。方法:以浙江省肿瘤医院2012年3月-2015年6月820例确诊不孕不育女性患者及500例健康志愿者为研究对象,分别设计研究组、对照组,应用酶联免疫吸附法(ELISA)对两组患者血清抗精子抗体(AsAb)、抗内膜抗体(EmAb)、抗心磷脂抗体(AcL)阳性表达率进行统计学分析探讨。结果:研究组AsAb、EmAb、AcL阳性表达率分别为58.3%、32.8%、21.6%;对照组志愿者AsAb、EmAb、AcL阳性表达率分别为5.2%、4.8%、3.6%,两组组间对比χ2值分别为29.152、28.075、15.732(P<0.05)。结论:女性不孕不育患者血清AsAb、EmAb、AcL抗体表达水平显著高于健康人,因此,以抗体阳性表达率检测女性不孕不育临床应用价值显著。

摘要：目的调查医学检验专业人员数字素养的现状,并提出相关建议。方法根据数字素养具体内涵自行设计医学检验专业人员数字素养调查问卷,选取温州医科大学、杭州医学院、浙江中医药大学医学检验专业的本科生和研究生,浙江省肿瘤医院、河南省肿瘤医院、海南医学院附属医院、江西省肿瘤医院、浙江省内县级综合医院等检验科接受住院医师规范化培训的学员,共计218名医学检验专业人员作为研究对象并进行问卷调查,了解其基本情况、数字意识、计算思维、数字化学习与创新、数字社会责任的情况。结果218名医学检验专业人员在数字意识重要性认识、计算思维能力、数字化学习与创新、数字社会责任等方面存在不足,对此提出进行多形式培训和推广、开展多维度数字素养教学、加强数字伦理和网络安全教育等建议。结论医学检验专业人员整体数字素养较低,需要从宣传、培训、教育等方面予以加强。

摘要：同源盒基因转录反义RNA(HOTAIR)是第一个被发现具有反式转录调控作用的长链非编码RNA。作为反义RNA,HOTAIR本身并不编码蛋白质,而是以反式转录调控因子作用于不同染色体上的HOX基因簇,从而在基因组调控和肿瘤的发生、发展中起着重要作用。研究表明,HOTAIR与人类多种肿瘤(如乳腺癌、结直肠癌、肝癌、胰腺癌、喉癌等)的发生、发展及转移预后密切相关,高表达HOTAIR能抑制抑癌基因的表达,促进肿瘤复发转移,而下调HOTAIR表达则降低肿瘤细胞的转移侵袭能力。近年来研究逐渐证实,HOTAIR在乳腺癌组织、细胞系及其外周血中存在异常表达,并且这种表达失调有助于阐明乳腺癌的发生机制及耐药机制。临床研究则进一步表明,检测HOTAIR的表达水平不仅有助于提高乳腺癌的诊断敏感性和特异性,而且有助于促进临床上对乳腺癌的病情评估、预后判断、疗效评价和肿瘤复发转移的动态监测。此外,HOTAIR表达可能与乳腺癌不同激素受体类型的生物学行为相关。在乳腺癌治疗方面的探索研究则显示,通过设计HOTAIR促癌通路上的相应抗肿瘤药物或将能够为某些难治性乳腺癌的治疗带来曙光,比如他莫昔芬耐药乳腺癌。本文将对近几年上述研究进展进行综述。

摘要：目的分析2004-2012年中国丙型病毒性肝炎疫情的流行病学特征,为制定防制策略提供依据。方法用Excel 2007软件对全国丙型肝炎疫情数据资料进行整理,采用描述流行病学方法,对2004年1月-2012年12月中国丙型肝炎流行与分布特征进行分析。结果 2004-2012年全国累计报告丙型肝炎发病数为1 024 195例,其中死亡1 075例,发病率均呈逐年上升趋势,发病率从2004年的3.03/10万上升至2012年的14.96/10万,年均增长率为22.09%;丙型肝炎发病数占病毒性肝炎发病总数由2004年的3.42%上升至2012年的14.60%;丙型肝炎发病无明显季节性,但有明显的地区差异;丙型肝炎发病男女性别比为1.38∶1,男性病例多于女性;随着年龄增加,发病率逐渐升高,发病率最高的85岁以上患者为30.65/10万;丙型肝炎职业构成以农民最多,占37.50%。结论我国丙型肝炎发病率持续升高,加强重点人群的预防控制,切断丙型肝炎的传播途径是目前预防控制最有效的措施。

摘要：目的综合评估Elecsys血清异常凝血酶原(PIVKA-Ⅱ)检测试剂在中国人群中辅助诊断肝细胞癌(HCC)的临床价值。方法研究采用多中心病例-对照设计,连续收集首次确诊且未经治疗的HCC患者样本、良性肝病患者样本和干扰性样本进行Elecsys PIVKA-Ⅱ与甲胎蛋白(AFP)检测,并对受试者的多项临床信息进行汇总分析。计算特定阳性截断值下PIVKA-Ⅱ(21.29 ng/ml)和AFP(400 ng/ml)用于HCC诊断的效能。采用Kruskal-Wallis检验或受试者操作特征曲线进行统计学分析。结果最终在5家中心共纳入448例受试者,其中包括185例HCC病例。以良性肝病组为对照组时,PIVKA-Ⅱ的诊断灵敏度和准确率均高于AFP:84.86%对比30.81%和89.01%对比63.66%,而特异度略低。敏感性分析显示在该特定阳性截断值下,PIVKA-Ⅱ的临床性能在AFP阴性受试者亚组、不同病因亚组及多个巴塞罗那癌症分期的HCC患者亚组(含早期HCC)中的灵敏度均>80%。同时,PIVKA-Ⅱ的受试者操作特征曲线下面积亦略高于AFP(0.9200对比0.8809)。结论Elecsys PIVKA-Ⅱ在中国人群中的临床性能良好且稳定,有潜力改善临床AFP阴性HCC诊断和早期HCC监测中的漏诊现状以进一步提升中国人群HCC精准辅助诊断效率。