摘要：目的用计算机辅助分子设计技术,设计河豚毒素(TTX)小分子拮抗肽,分别用免疫学方法和动物实验进行验证。方法利用计算机辅助分子设计技术,对TTX的空间结构进行了优化;用分子对接确定了TTX关键位点;用分子模建设计了3个能与TTX结合的小分子拮抗肽;分别用竞争ELISA进行免疫学筛选;用动物实验进行中和活性测定。结果成功设计了3个针对TTX的小分子拮抗肽并进行了多肽合成,用竞争ELISA筛选到针对TTX的小分子拮抗肽P2,拮抗肽P2浓度与TTX的结合能力成正比。动物实验中,针对TTX的小分子拮抗肽P2对注射2.5倍半数致死剂量TTX昆明小鼠的保护率为25%,起到了一定解毒效果。结论获得了能与TTX特异性结合的中和性小分子拮抗肽,TTX浓度达到4.05μg/mL(LD50的2.5倍),TTX拮抗肽P2对实验组小鼠的保护率为25%。

摘要：目的:利用自主知识产权抗体3E1,确定RTB与细胞特异性结合的活性肽部位,基因工程合成后,动物实验评价绿色荧光蛋白在基于RTB活性肽靶向下在体内的分布,为后续研究奠定基础。方法:用生物信息学技术,确定RTB与细胞特异性结合的活性肽部位;分子克隆技术构建含不同肽的绿色荧光蛋白原核表达载体,实现肽-GFP融合蛋白在大肠杆菌中的高效、可溶性表达;动物实验评价小鼠舌下口服肽-GFP融合蛋白后GFP在体内的分布。结果:建立了自主知识产权单抗3E1与RTB相互作用的空间构象,判定出四个活性区域,构建了4个含不同活性肽的GFP原核表达载体,获得了高纯度蛋白;经舌下口服免疫BALB/c小鼠后,免疫组化和流式细胞术证实,P1-GFP免疫组GFP和CD11c在不同组织中的分布与对照组有明显区别。P1-GFP初次免疫后,GFP主要分布于空肠,再次免疫后,GFP主要集中于回肠、肠相关淋巴组织和小肠PP结;初次免疫后CD11c+细胞主要分布于肠系膜淋巴结,胃和空肠,再次免疫后肠系膜淋巴结中的CD11c+细胞不再占优势,空肠中CD11c+细胞明显增加。结论:基于RTB的活性肽P1与GFP融合蛋白口服免疫小鼠后,P1-GFP经P1肽的导向,初次和再次免疫后GFP在体内的分布不同,再次免疫后范围更广。P1的导向使GFP直接进入小肠PP结和肠系膜淋巴结两个黏膜免疫应答的主要诱导及效应部位,利于免疫应答的发生。

摘要：采用Western Blot对表达产物进行分析鉴定,重组抗HBsAg-碱性磷酸酶双功能抗体非还原态分子量为200KD左右,显示其为有活性的双聚体;为了评价重组双功能抗体在临床检测中的应用价值,设计两种ELISA方法,测定其敏感度,并对75例临床标本进行检测,结果与现用试剂盒方法一致,说明其在HBsAg的临床检测中具有较好的应用前景.

摘要：目的运用计算机辅助蛋白质分子设计的方法设计针对蓖麻毒素A链（RTA）的拮抗肽，实现在大肠杆菌BL21中的可溶性表达，并对其生物学活性进行评价。方法根据RTA的晶体结构、RTA-rRNA相互作用复合物模型，在CVFF（consistent-valence force field）、Amber力场下，对RTA的空间构象进行理论模拟，初步确定其生物活性功能域；然后针对该功能域设计小分子拮抗肽，并借助人抗体重链可变区骨架，在CDR3区对拈抗肽进行展示，用重叠延伸PCR全基因合成人源化的单域抗体并克隆至载体pET-32a（＋）；双酶切和DNA测序技术对构建的载体进行鉴定；IPTG诱导人源化的单域抗体表达，用镍离子亲和层析纯化，竞争ELISA和MTr法分别进行结合和中和活性检测。结果从头搭建并设计合成了人源化的单域抗体，实现了其原核表达，并进行了生物活性检测；建立了基于人源化的单域抗体的RTA和蓖麻毒素检测方法。结论研究结果为新型蓖麻毒素小分子拈抗剂的研制奠定了理论和实验基础。

摘要：目的设计并制作2种不同的海水样本采集器，为对海洋微生物进行广谱蒯研、药物敏感性实验等提供适合的样本采集工具。方法通过与文献检索及运用理工科知识，根据阿基米德定律计算并设计图纸，与相关专业公司合作制作完成。结果在实验过程中灵活选用2种采样器完成了对中国海域近千个采样点的样本采集工作，为中国海域细菌谱的调研和药物敏感性分析提供了基础保证。结论“椎底筒式”海水采样器是一种制作相对简单且比较实用的样本采集器，“拖船式”海水采样器是一种信息集成化程度比较高但尚需进一步开发完善的样本采集器。

摘要：目的：应用多位点可变数目串联重复序列（VNTR）分析方法进行多重耐药铜绿假单胞菌分子分型，为由铜绿假单胞菌引发的院内感染的溯源和流行病学调研提供依据。方法从铜绿假单胞菌基因组中筛选12个VNTR位点，设计合成引物；对98株多重耐药铜绿假单胞菌进行PCR扩增，产物毛细管电泳；根据产物大小计算各VNTR位点的重复数，构建系统发育树，进行数据分析。结果12个位点的多态性指数（DI）为0．45～0．88，将98株铜绿假单胞菌分成5个群，88个基因型，同病区分离的菌株具有一定的同源性。结论多位点VNTR分析具有很高的分辨率，适用于铜绿假单胞菌基因分型和溯源研究，具有很好的应用前景。

摘要：全实验室自动化（total laboratory automation,TLA）是指将临床实验室自动化分析仪通过传送系统连接起来,进行流水线作业检测,实现样品运输、分类、前处理、检测、结果报告、后处理等全检验过程自动化。TLA由临床实验室信息系统（laboratory information system,LIS）和自动化流水线系统（la-boratory automation system,LAS）两部分组成。

摘要：目的对SYSMEX XE-2100全自动血细胞分析仪性能进行验证及评价。方法参考美国临床和实验室标准化协会(CLSI)系列文件和相关文献,结合工作实际,对XE-2100的精密度、正确度、可报告范围、携带污染率、仪器间的比对等分析性能进行验证和评价,并将实验结果与卫生部临检中心的要求进行比较。结果 Sysmex XE-2100的本底计数均达到厂商设计规定的要求,检测白细胞、红细胞、血红蛋白含量、红细胞压积、血小板五项精密度、正确度、线性范围良好,携带污染率低;其白细胞分类计数与显微镜分类的相关性不同细胞有差异。结论 Sysmex XE-2100分析性能良好,可以较好的满足临床血液常规检测要求,在批量筛检的基础上需要结合显微镜复检。

摘要：目的:探讨月经出血评分(MBS)对月经过多女性缺铁的预测作用。方法:选择95例月经过多女性为对象,以自行设计的MBS量表评估经量,记录卫生巾用量及经期天数,完成血清铁(SI)及血红蛋白(Hb)等检查。结果:95例月经过多女性中检出缺铁65例,其中铁耗减34例,缺铁性红细胞生成12例,缺铁性贫血19例。Spearman分析及误差限图分析均表明MBS评分与女性缺铁程度显著正相关(P<0.01),Logistic回归示MBS评分是影响月经过多女性缺铁的重要因素(P<0.01)。ROC分析示,当女性MBS评分≥41.25时,提示有较高缺铁风险,有必要作进一步实验室缺铁筛查,此时预测灵敏度、特异度分别达50.77%、86.67%,ROC曲线下面积为0.705(P<0.01)。结论:MBS测评法操作简易,能有效预测月经过多女性的缺铁风险,或在门诊、社区基层、女性缺铁普查及日常自我保健中有一定应用前景。

摘要：目的 实现重组蓖麻毒素A链（rRTA）的高效表达,获得rRTA的单克隆抗体,建立基于单抗的蓖麻毒素检测方法.方法 用计算机辅助设计的RNA二级结构预测和偏性密码子等手段设计引物 用PCR将rRTA基因克隆至载体pE132a（＋） 用双酶切和DNA测序技术对构建的载体进行鉴定 IFTG诱导rRTA原核表达载体pET32a（＋）/rRA/BL21,用镍离子亲和层析纯化,ELISA及Western blot鉴定rRTA蛋白 rRTA免疫Balb/c小鼠,建立杂交瘤细胞株,获得抗rRTA的单克隆抗体,用Westem blot鉴定.结果 构建了rRTA原核表达载体pET32a（＋）/rRA/BL21,实现了rRTA在大肠杆菌BL21中的高效可溶性表达,获得了高纯度约10～20 mg/L rRTA 获得抗rRTA的单克隆抗体 建立的ricin EIJSA检测方法检出ricin的最低浓度为3.125 ng/mL,目视比色对蓖麻毒素的最低检出浓度为6.25 ng/mL.结论 本研究表达的rRTA及其单克隆抗体和基于单抗的ricin检测方法,将在肿瘤生物治疗、ricin生物恐怖袭击的侦检、治疗和预防中发挥重要作用.