摘要：目的:了解胆固醇酯转运蛋白(CETP)基因TaqIB等6种突变的多态性与海南汉族冠心病(CHD)的关系。方法:应用针对CETP基因TaqIB、I405V、D442G、R451Q、A373P和I14A多态位点设计的等位基因特异性PCR技术,对301例海南汉族正常对照组、334例海南汉族CHD患者中CETP基因多态位点进行了检测,统计各基因型频率,计算各等位基因频率。结果:①正常对照组和CHD组中,TaqIB多态位点均可检测出B1B1、B1B2、B2B23种基因型。正常对照组B1B1、B1B2、B2B23种基因型的频率分布为45.18%、39.87%、14.95%,B1和B2的等位基因频率分布为65.12%、34.88%;CHD组B1B1、B1B2、B2B23种基因型的频率分布为51.50%、31.74%、16.77%,B1和B2的等位基因频率分布为67.37%、32.63%。②I405V突变位点可检测出Ⅱ、Ⅳ、VV3种基因型。正常对照组Ⅱ、Ⅳ、VV3种基因型的频率分布为15.95%、48.50%、35.55%,Ⅰ和Ⅴ的等位基因频率分布为40.20%、59.80%;CHD组Ⅱ、Ⅳ、VV3种基因型的频率分布为15.27%、35.33%、49.40%,Ⅰ和Ⅴ的等位基因频率分布为32.93%、67.07%。③D442G突变位点可检测出DD、DG2种基因型。正常对照组DD、DG2种基因型的频率分布为95.35%、4.65%,D和G的等位基因频率分布为97.67%、2.33%;CHD组DD、DG2种基因型的频率分布为63.47%、36.53%,D和G的等位基因频率分布为81.74%、18.26%。④正常对照组和CHD组中均未检测到R451Q、A373P和I14A3种突变类型。⑤正常对照组与CHD组I405V和D442G2个多态位点的基因型分布和等位基因频率的比较差异有统计学意义,其余多态位点在正常对照组与CHD组之间差异均无统计学意义。结论:I405V和D442G的多态性与海南汉族CHD显著相关。I405V多态位点V等位基因、D442G多态位点G等位基因是海南汉族CHD的易感基因,而I405V多态位点I等位基因对其有保护作用。D442G多态位点DG基因型可使海南汉族人群CHD的发病危险性显著增加。

摘要：目的:构建葡萄糖6磷酸脱氢酶(Glucose 6-phosphate dehydrogenase,G6PD)T279A和T279S两种突变子。方法:以Genbank No X03674为参考序列设计并合成引物、以含G6PD基因的质粒(Philip J Mason博士惠赠)为模板,PCR扩增获得G6PD野生型基因片段,琼脂糖凝胶电泳后回收PCR产物,连接、转化构建克隆质粒pMD18T-G6PD;酶切pMD18T-G6PD质粒、电泳后回收目的基因片段,连接、转化构建含G6PD野生型基因的重组质粒pAL-G6PD;设计并合成含有突变序列的引物,以pAL-G6PD为模板,体外扩增获得G6PD835-海口(835A→T279A)和835-中国-1(835 A→T,T279S)突变子。结果:酶切后经电泳鉴定表明获得与预期大小相符的pMD18T-G6PD质粒,EcoRⅠ和HindⅢ双酶切获得与预期大小相符的pAL-G6PD,测序结果与参考序列完全一致。0.8%的琼脂糖凝胶电泳鉴定,并定量pAL-G6PD单链DNA浓度约为200ng/uL。经测序鉴定并与参考序列比对结果表明获得了G6PD的T279A和T279S两种突变子。结论:成功构建了G6PD的T279A和T279S两种突变子,为下一步原核表达、生化性质以及酶动力学等研究奠定了基础。

摘要：尽管生物化学理论内容抽象、难学,但生物化学对于培养农林医药院校学生解决问题能力和创新能力是至关重要的。该文以乳糖操纵子教学为例,从导课、授课、知识拓展、强化训练、小结5个环节阐述生物化学的教学设计,以期激发学生学习兴趣,提高学生的学习主动性,确保教学目标的实现。

摘要：唾液淀粉酶活性影响因素的探讨是现行大中专院校生物化学实验中的常见项目。然而由于不同人群中唾液淀粉酶的活性相差较大,从而导致酶量很难控制。此外现行实验教材中该实验设计粗放,导致实验结果与现行生物化学理论不一致。因而本文从酶含量的确定、温度、pH值、激活剂与抑制剂几个方面,对该实验设计提出建议。

摘要：根据临床医学生的特点,结合课程内容,将以小病例、基因诊断机制、药物作用机制以及科学经典实验为特点的小任务引入生物化学与分子生物学课堂。为了确保教学目标的实施,教师需要设计符合低年级学生知识结构特点而又能激发学生兴趣的教学任务,在教学任务分析、解决方法提出以及课堂讨论环节充分发挥学生的学习主体作用,同时要在总结环节和评价环节发挥教师的主导作用,引导和督促学生认真完成教学任务的分析、解决,从而实现教学目标。

摘要：为了提高学生创新能力和解决目前实验教学中存在的问题,在生物化学与分子生物学实验教学中引入了任务驱动型教学法。教学任务设计时要能够激发学生学习兴趣,学生分析教学任务后能提出实验方案,完成教学任务时既要发挥教师的指导作用,又要鼓励学生独立完成操作;同时教师要充分发挥教学评价的导向作用,鼓励学生独立思考并提出自己独特的实验方案和解决方法。应用任务驱动型教学法,充分调动了学生的主观能动性,提高了解决问题的能力,为未来从事临床医学研究工作奠定了良好的基础。

摘要：生物化学是医学院校的基础医学课程,目前主要存在学校顶层设计不支持生物化学教学、教师医学基础知识薄弱、教学改革重形式轻实效等问题,学校应该通过制定相关配套政策鼓励科研人员从事生物化学教学、加强对生物化学进行医学基础知识培训,同时在教学改革要因地制宜,提升教师在教改中的话语权。解决这些问题,为医药卫生事业又好又快发展培养高素质医学人才。

摘要：目的:建立检测血管紧张素原(angiotensinogen,AGT)基因2种常见突变的等位基因特异性PCR技术。方法:应用针对AGT基因T174M和M235T这2种常见的突变位点设计的等位基因特异性PCR技术,对海南汉、黎族人群中AGT基因突变类型进行了检测,同时对经上述等位基因特异性PCR检测的样本进行序列测定。结果:在海南汉、黎族人群中,T174M突变位点可检测出TT、TM、MM 3种基因型,M235T突变位点可检测出MM、MT、TT 3种基因型,用等位基因特异性PCR鉴定的AGT基因突变的基因分型结果与序列测定结果完全符合。结论:等位基因特异性PCR技术操作简便,重复性和稳定性好,可作为鉴定AGT基因突变类型的可行方法。

摘要：目的:建立检测胆固醇酯转运蛋白(cholesterol ester transfer protein,CETP)基因6种常见突变的等位基因特异性PCR技术。方法:应用针对CETP基因TaqIB(G→A)、I405V(A→G)、D442G(A→G)、R451Q(G→A)、A373P(G→C)和I14A(G→A)这6种常见的突变位点设计的等位基因特异性PCR技术,对海南汉、黎族人群中CETP基因突变类型进行了检测,同时对经上述等位基因特异性PCR检测的样本进行序列测定。结果:在海南汉、黎族人群中,TaqIB(G→A)突变位点可检测出GG、GA、AA3种基因型,I405V(A→G)突变位点可检测出AA、AG、GG3种基因型,D442G(A→G)突变位点可检测出AA、AG2种基因型,但在海南汉、黎族人群中未检测到R451Q(G→A)、A373P(G→C)和I14A(G→A)3种突变类型,用等位基因特异性PCR鉴定的CETP基因突变的基因分型结果与序列测定结果完全符合。结论:等位基因特异性PCR技术操作简便,重复性和稳定性好,可作为鉴定CETP基因突变类型的可行方法。

摘要：目的:为获得抗SARS的转基因植物疫苗,进行了SARS S1基因的克隆,植物表达载体构建的研究。方法:根据SARS S蛋白受体结合结构域318-510氨基酸区域,设计合成长579 bp的序列片断(S1基因)。并以之为模板,进行PCR扩增,扩增产物被克隆至pGEM-Teasy载体进行序列测定。然后将S1基因插入植物表达载体pCAMB IA2301的35S启动子和NOS终止子之间,构建植物表达载体pCS1。将重组体转化大肠杆菌***1,并对重组体进行了鉴定。结果:酶切鉴定和序列分析显示,克隆的目的基因与设计的片断序列一致;双酶切表明,植物表达载体的构建完全正确。结论:成功地克隆了S1基因和构建了含有S1基因的植物表达载体,为进一步获得抗SARS的转基因植物疫苗打下了基础。