摘要：目的 构建并鉴定携带大鼠线粒体融合蛋白（rMfn2）基因的重组腺病毒AdS-mCMV-增强绿色荧光蛋白（EGFP）-CMV-rMfn2表达载体.方法 设计含有Not Ⅰ和HindⅢ酶切位点的引物,应用聚合酶链反应（PCR）法扩增目的基因rMfn2,将扩增产物连接到穿梭质粒上,构建重组穿梭质粒pDC316-mCMV-EGFP-CMV-rMfn2.测序鉴定重组穿梭质粒后,与腺病毒骨架质粒pAd5在JM109感受态细胞中同源重组,获得重组腺病毒AD-rMfn2,而后感染HEK293细胞进行包装、扩增、纯化,并测定病毒滴度;逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）及Western blot检测目的基因rMfn2在HEK293细胞中的转录及表达.结果 腺病毒穿梭质粒经PCR、双酶切及测序鉴定证明构建正确,目的基因rMfn2正确克隆至腺病毒骨架质粒中;在HEK293细胞中包装、扩增获得了高滴度的重组腺病毒AD-rMfn2,其滴度为4×1013 TU/L;AD-rMfn2感染HEK293细胞48 h后,可检测到目的基因rMfn2的转录和蛋白表达.结论 成功构建重组腺病毒AD-rMfn2.

摘要：目的观察重症肝炎、肝衰竭患者心理痛苦状况,分析患者疾病认知与心理痛苦的关系。方法选取2019年3月~2020年4月海南省干部疗养院收治的63例重症肝炎、肝衰竭患者,设计一般资料调查问卷,询问患者基线资料情况,采用心理痛苦管理筛查工具(DT评分)评估患者并分为心理痛苦严重组和心理痛苦轻微组;评估并比较两组疾病认知,分析重症肝炎、肝衰竭患者疾病认知与心理痛苦的关系。结果 63例重症肝炎、肝衰竭患者22例心理痛苦严重,占34.92%;心理痛苦严重组年龄 1,P <0.05),其中疾病认知低下带来的影响较显著,可能作为独立风险因子;经双变量Pearson直线相关性检验结果显示,疾病认知与心理痛苦状况呈负相关(r=-0.420,P <0.05)。结论重症肝炎、肝衰竭患者心理痛苦状况不容乐观,可能与疾病认知低下有关,部分患者心理痛苦严重,临床应重视重症肝炎、肝衰竭患者心理痛苦状况,并早期给予疾病认知低下重症肝炎、肝衰竭患者针对性干预,以改善患者心理痛苦状况。