摘要：为研究日粮粗纤维水平对生长中期定安鹅腿肌MSTN基因表达量及肌纤维发育的影响,选遗传背景相近、体重一致的30日龄定安鹅120只,采用单因子随机试验设计,共分3个处理组,每处理组设4个重复,每重复10只鹅。分别饲喂粗纤维水平为4.29%,5.29%和6.29%的三种日粮。试验期为35 d。结果表明:(1)日粮粗纤维水平为5.29%时,可以提高生长中期定安鹅试验末重和平均日增重,并且与6.29%组比较达到了显著水平(P<0.05);(2)日粮粗纤维水平可以显著影响生长中期定安鹅腿肌中MSTN的基因表达量(P<0.05),且腿肌中MSTN的基因表达量与生长中期定安鹅的试验末体重和平均日增重呈负相关关系;(3)日粮粗纤维水平为5.29%时,与6.29%组相比可显著提高生长中期定安鹅血清中Ig A和Ig G的含量(P<0.05);(4)日粮粗纤维水平显著影响生长中期定安鹅腿肌纤维数量和腿肌纤维密度的影响(P<0.05)。综上所述,日粮粗纤维水平为5.29%可以显著影响生长中期定安鹅的试验末体重、平均日增重和腿肌中MSTN基因的表达水平,对腿肌纤维的发育也有一定的促进作用。

摘要：为获得屯昌猪丙酮酸脱氢酶激酶4(pyruvate dehydrogenase kinase 4,PDK4)基因的编码序列(coding sequence,CDS)并分析其分子结构特征,研究屯昌猪、杜洛克猪及其杂交F1代不同组织中的PDK4基因表达水平,本研究以Genbank上公布的猪PDK4基因序列(登录号:NM_001159306)为参考设计引物,通过RT-PCR扩增、测序、拼接获得屯昌猪PDK4基因CDS区。结果显示:屯昌猪PDK4基因CDS区长度1224 bp,相对分子质量为46170.24 u,既没有跨膜结构也不存在信号肽,属于非分泌型蛋白,主要在线粒体中发挥作用,预测存在2个潜在的糖基化位点和33个磷酸化位点,α螺旋区域在预测的二级结构中占比最大。实时荧光定量PCR检测结果显示,PDK4基因在屯昌猪背最长肌中表达量最高,且极显著高于杜洛克猪及其杂交F1代猪。

摘要：为获得屯昌猪MYLPF基因的CDS区序列并分析其分子结构特征,研究屯昌猪、杜洛克猪以及其杂交F1代猪不同组织中的MYLPF mRNA表达水平,本研究以GenBank上公布的猪MYLPF基因序列(登录号:NM001006592)为参考设计引物,通过RT-PCR扩增、测序获得屯昌猪MYLPF基因CDS区。结果显示:该基因CDS区长度510 bp,编码169个氨基酸,在CDS区存在33 G>T的同义突变;该基因编码产物既没有跨膜结构,也不存在信号肽,属于非分泌型蛋白,主要在细胞质中发挥作用,预测存在1个潜在的糖基化位点和9个磷酸化位点,α螺旋区域在预测的二级结构中占比最大。荧光定量PCR检测结果显示MYLPF基因在屯昌猪背最长肌中表达量最高,屯昌猪背最长肌中MYLPF mRNA的表达量均显著高于杜洛克猪及其杂交F1代猪。本研究为探明MYLPF基因对猪肌内脂肪的影响提供了分子理论依据。

摘要：为了研究猪白细胞介素6(IL-6)的功能,试验应用Premier Primer 5.0软件,参照猪IL-6的基因序列设计合成了1对引物,成功地扩增出带酶切位点的猪IL-6基因,通过NheⅠ和HindⅢ双酶切位点将猪IL-6基因插入载体pFast-CB中,获得重组质粒pFast-CB-IL-6,并将其转化DH10Bac细胞,与Bacmid发生特异性转座作用,得到重组质粒Bacmid-IL-6,再将其转染昆虫细胞Sf 9。结果表明:经RT-PCR鉴定,获得重组杆状病毒rBacmid-IL-6。

摘要：为了研究鸡柔嫩艾美耳球虫(***)海南(HN)株3-1E基因的遗传变异情况,试验根据GenBank发表的鸡堆型艾美耳球虫(***)美国株(US)3-1E基因cDNA序列(登录号为AF113613)的开放阅读框(ORF)设计1对引物,采用RT-PCR方法从*** HN株总RNA中扩增3-1E基因,将扩增产物与pMD18-T载体连接后进行测序和序列分析,并与已发表的***相关序列进行比较。结果表明:*** HN株3-1E基因全长为513 bp,与已发表的国内外虫株的3-1E基因序列相比,核苷酸有5个位点发生变化,其中有4个位点的变化引起氨基酸发生改变,还有1个位点的变化未引起相应氨基酸发生改变。经系统发育树分析发现:同种间比较,*** HN株3-1E基因与*** sporozoite antigen株的遗传关系最近;同属间比较,*** HN株3-1E基因与*** US株的遗传关系最近。

摘要：为研究鸡柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)HN株SO7基因的遗传变异情况,根据Gen Bank发表的SO7基因的c DNA序列(登录号:X15898)的ORF设计一对引物,用RT-PCR方法从柔嫩艾美耳球虫HN株总RNA中扩增SO7基因,将扩增产物与p MD18-T载体连接后进行测序和序列分析,并与已发表的相关序列进行比较,分析SO7基因的遗传变异情况。结果获得673 bp的目的片段,HN株的SO7基因序列与已发表国内外虫株的SO7基因序列相比,核苷酸有7个位点发生了变化,引起4个位点的氨基酸发生改变,其中有3个位点的变化未引起相应的氨基酸发生改变。系统发育树分析表明,同种间HN株SO7基因与YZ株的遗传关系最近。

摘要：根据已报道的柔嫩艾美耳球虫3-1E基因序列设计引物,以孢子化卵囊总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增得到1条特异片段,将扩增产物克隆至p MD-18T载体,转化感受态菌JM109,经酶切鉴定获得阳性重组质粒并对其进行测序。测序结果与已发表的国内外相关虫株的3-1E基因序列比较,核苷酸的同源性均在99.2%-99.8%,氨基酸的同源性均在98.2%-100%。然后将重组质粒和表达载体p GEX-4T-1分别用Xho I和EcoR I酶切后构建重组表达载体p GEX-3-1E,并将其转化入大肠杆菌BL21中,提取质粒经酶切和PCR鉴定正确后,用IPTG诱导表达。表达产物经SDS-PAGE和Western blot检测显示,3-1E基因在大肠杆菌中成功表达,融合蛋白的分子量为44.7 ku,诱导表达5 h的蛋白表达量可达到30%以上。

摘要：针对海南黑山羊PRLR基因内含Ⅰ、内含子Ⅱ,设计2对特异性引物进行PCR-SSCP检测,并研究该基因与产羔性能的相关性。结果表明:引物P1扩增片段不存在多态性;引物P2扩增片段存在多态性,表现为AA,AB,BB 3种基因型,测序结果发现,引物P2位点有3处变异,即AA型与BB型相比在该片段第62 bp处有一个T→C的突变,第78 bp处有一个碱基缺失,第114处有C→T的突变。统计结果发现AA型平均产羔数显著优于其他2种基因型(P<0.05)。

摘要：猪繁殖与呼吸综合征是危害养猪业重要传染病之一,CD163是猪繁殖与呼吸综合征感染易感细胞受体之一。从Marc-145细胞克隆出CD163基因并测序,再根据得到序列,应用Primer5.0软件设计引物,成功地扩增出带酶切位点CD163 ORF基因,通过HindⅢ和XhoⅠ双酶切位点将CD163基因克隆入真核表达载体pcDNA3.1-myc-His中,获得重组质粒pcDNA3.1-CD163,并将重组质粒pcDNA3.1-CD163在BHK细胞上进行表达鉴定。结果表明,Marc-145细胞CD163蛋白在BHK细胞中得到了表达。这为进一步研究CD163受体在PRRSV感染Marc-145细胞过程中作用以及与其他受体之间相互作用提供试验数据。

摘要：试验旨在研究日粮能量和蛋白质添加水平对蛋鸭生产性能的影响。采用3×3完全随机试验设计,3个能量添加水平(10.8、11.3和11.8MJ/kg)和3个蛋白质添加水平(17.0%、19.0%和21.0%)。选用16周龄的金定蛋鸭432只,随机分为9组,即试验1组(10.8 MJ/kg、17.0%)、试验2组(10.8 MJ/kg、19.0%)、试验3组(10.8 MJ/kg、21.0%)、试验4组(11.3MJ/kg、17.0%)、试验5组(11.3MJ/kg、19.0%)、试验6组(11.3MJ/kg、21.0%)、试验7组(11.8MJ/kg、17.0%)、试验8组(11.8MJ/kg、19.0%)和试验9组(11.8MJ/kg、21.0%),每组4个重复,每个重复12只鸭,试验期90d。结果表明:①日粮中能量的添加水平显著影响蛋鸭平均蛋重(P0.05);②日粮中蛋白质的添加水平对蛋鸭生产性能的影响差异均不显著(P>0.05);③在本试验添加水平范围内,能量和蛋白质的互作效应未对蛋鸭的生产性能产生影响(P>0.05)。综合认为,在海南地区产蛋期蛋鸭能量添加水平11.3 MJ/kg,蛋白质添加水平17.0%效果较好。