摘要：为建立一种快速鉴别不同基因型鸭甲肝病毒(DHAV)的检测方法,根据DHAV-1和DHAV-3特异性序列,分别设计合成鉴别检测引物,经一步法双重RT-PCR反应条件的优化,建立了鉴别DHAV-1和DHAV-3的一步法双重RT-PCR方法,并应用该方法对2016—2021年山东地区采集的58份临床病料样品进行病原学检测分析。结果显示:该方法能够分别扩增出DHAV-1的230 bp和DHAV-3的502 bp的特异性条带,而DTMUV、NDV、AIV-H9、FADV、DEV、GPV均无任何扩增条带。该方法最低可检测到0.62 ng DHAV-1 RNA和0.59 ng DHAV-3 RNA。该方法与病毒分离方法的符合率达100%。该方法检测58份临床病料样品,共检测出阳性样品27份,阳性率达46.55%,其中2016—2021年DHAV-1阳性率分别为33.33%,25.00%,22.22%,12.50%,11.11%,0.00%;DHAV-3阳性率分别为8.33%,16.67%,22.22%,37.50%,33.33%,37.50%。表明建立的DHAV-1和DHAV-3一步法双重RT-PCR鉴别检测方法具有良好的特异性、敏感性、准确性和临床适用性;同时发现山东地区DAHV的优势流行毒株已由DHAV-1转变为DHAV-3。

摘要：《国家布鲁氏菌病防治计划(2016—2020年)》要求,到2017年6月,各省(自治区、直辖市)畜牧兽医部门以县(市、区)为单位组织完成布鲁氏菌病基线调查。对于牛,通常以普查方式完成基线调查;而对于羊,则需要应用兽医流行病学技术,进行基线调查方案设计。只有严格按方案开展调查,才能获得较为可靠的基线数据。本文详细介绍了羊布鲁氏菌病基线调查方案设计的主要过程:确定抽样框,计算该县需要抽取的场户数,计算每个乡镇的抽样场户数,每个乡镇抽样场户的随机选择,场户内羊只抽样数量的计算,以及场户内抽样羊只的选择,可为县级羊布鲁氏菌病基线调查提供方向。