摘要：目的 探讨人血浆中识别脑钠肽前体N端片段的特异性识别位点.方法 根据文献及应用优势抗原表位分析法,设计并人工合成了脑钠肽前体（NT-proBNP）P-3-11,P41-54,P73-86,P57-73等4段多肽序列.用各合成多肽免疫新西兰兔,采取化学发光竞争酶免疫法检测兔抗血清的抗体效价及反应特异性.收集82例临床心血管病、糖尿病及健康人的血浆,用BNP fragment EIA商品试剂盒及P41-54,P73-86和P57-7多抗制备的竞争酶联免疫反应试剂同时进行检测,用配对t检验分析方法对结果进行评估.结果 P57-735次免疫后兔子的抗血清滴度达1∶80 000以上,检测限为10 pmol/L.P41-54免疫兔子抗血清的滴度为1∶80 000,检测限为10 pmol/L.P73-86免疫兔子抗血清滴度为1∶40 000,检测限为50 pmol/L.P-3-11多肽片段免疫兔子的抗血清滴度不高.用P41-54,P73-86和P57-73免疫多抗制备的ELISA试剂检测临床人血浆标本,所得数据与商品试剂盒的检测数据比较P值均＜0.05,差异显著.结论 人血浆中NT-proBNP的特异性识别位点并非落在P41-54,P73-86和P57-73区域.

摘要：目的建立多重RT—PCR技术检测儿科呼吸道标本中常见病毒的方法。方法参照病毒核酸序列设计多重RT—PCR引物，并检索NCBI数据库初步验证其特异性，以实验室阳性株验证引物特异性，优化多重RT—PCR反应条件。并对2008年61份儿童呼吸道标本进行检测，阳性片段测序验证扩增片段特异性。结果采用多重RT—PCR引物对流感病毒A型（IVA）、流感病毒B型（IVB）、副流感病毒1型（PIVl）、副流感病毒3型（PIV3）、呼吸道合胞病毒（RSV）和鼻病毒（RHV）等6种病毒进行扩增，均无非特异性扩增条带，分剐获得171，489，307，585，155，501bp片段，与设计相符；对引物的相关性实验结果表明引物之间不会因相互干扰而出现假阳性结果，61份儿童呼吸道标本多重RT—PCR扩增，阳性率为50．82％（31／61），核酸序列与经NCBI数据库Blast比对同源性高。结论实验证明，所建立的多重RT—PCR技术检测儿童呼吸道标本中常见病毒的方法，敏感度、特异度和可重复性均较好，为常见呼吸道病毒检测提供了一种方便易行的方法。

摘要：目的从临床标本中扩增人偏肺病毒（hMPV）基因片段进行亚克隆，为进一步全面深入地研究人偏肺病毒奠定基础。方法根据GenBank中已知的hMPV全基因序列设计引物。收集呼吸道感染住院患儿鼻咽抽吸物697例，提取病毒核酸，运用长片段RT-PCR技术扩增目的片段，切割舍目的条带的凝胶进行纯化，并将目的片段连接到PJET1．2／blunt克隆载体，转化感受态细胞TOP10，经含氨苄青霉素的抗生素平板筛选，得到阳性克隆，提取质粒，最后对重组质粒进行PCR鉴定和测序鉴定。结果随机选取5例所获的阳性条带经PCR和测序鉴定，证实确为hMPV基因片段。结论成功构建了hMPV基因组亚克隆，可用于后续的实验研究。

摘要：目的构建人偏肺病毒(hMPV)N蛋白(hMPV-N蛋白)的原核表达载体,研究其表达效果,为临床抗体检测及预防提供基础资料。方法根据hMPV-N基因的全序列设计引物,扩增目的基因片段,连接质粒载体RSET-A,转化大肠埃希菌BL21,IPTG诱导以his为标签的目的蛋白表达,并用人血清进行检测。结果重组质粒转化诱导后,出现了与预期分子量相符的蛋白条带;采用Western blot方法,检测了102份呼吸道感染住院患儿血清标本中的抗hMPV-N蛋白IgG抗体,阳性率为53.9%。结论成功获得了hMPV-N蛋白的表达,为临床血清学检测奠定基础。