摘要：目的建立一种能同时检测乙型肝炎病毒(HBV)基因组1896位点变异株与野生株的定性方法。方法设计3条特异性引物(组成2对引物),提取血清中HBV DNA模板进行PCR扩增变异株与野生株,取PCR产物在琼脂凝胶(含EB)上电泳,观察结果。结果本次实验共检测40个标本,有11个标本只检测到野生株,8个标本只检测到变异株,其余21个标本都是变异株与野生株混合感染。结论该方法是一种可行的能同时检测HBV基因组1896位点变异株与野生株的定性方法。

摘要：目的建立一种能同时检测乙肝病毒基因组1896位点变异株与野生株的快速检测方法。方法设计5条特异性引物和1条特异性探针,分别克隆出含变异株与野生株的质粒作标准模板,利用荧光定量PCR检测乙肝病毒基因组1896位点变异株与野生株。结果本次实验共检测30个标本,有7个标本只检测到野生株,4个标本只检测到变异株,其余19个标本是变异株与野生株混合感染。结论本法是可行的能同时检测乙肝病毒基因组1896位点变异株与野生株的快速方法。

摘要：目的从临床标本中扩增人偏肺病毒（hMPV）基因片段进行亚克隆，为进一步全面深入地研究人偏肺病毒奠定基础。方法根据GenBank中已知的hMPV全基因序列设计引物。收集呼吸道感染住院患儿鼻咽抽吸物697例，提取病毒核酸，运用长片段RT-PCR技术扩增目的片段，切割舍目的条带的凝胶进行纯化，并将目的片段连接到PJET1．2／blunt克隆载体，转化感受态细胞TOP10，经含氨苄青霉素的抗生素平板筛选，得到阳性克隆，提取质粒，最后对重组质粒进行PCR鉴定和测序鉴定。结果随机选取5例所获的阳性条带经PCR和测序鉴定，证实确为hMPV基因片段。结论成功构建了hMPV基因组亚克隆，可用于后续的实验研究。

摘要：目的构建人偏肺病毒(hMPV)N蛋白(hMPV-N蛋白)的原核表达载体,研究其表达效果,为临床抗体检测及预防提供基础资料。方法根据hMPV-N基因的全序列设计引物,扩增目的基因片段,连接质粒载体RSET-A,转化大肠埃希菌BL21,IPTG诱导以his为标签的目的蛋白表达,并用人血清进行检测。结果重组质粒转化诱导后,出现了与预期分子量相符的蛋白条带;采用Western blot方法,检测了102份呼吸道感染住院患儿血清标本中的抗hMPV-N蛋白IgG抗体,阳性率为53.9%。结论成功获得了hMPV-N蛋白的表达,为临床血清学检测奠定基础。