摘要：目的建立实时荧光聚合酶链反应（Real-time PCR）方法检测腺病毒，并分析浙江省温州地区散发性婴幼儿腹泻患者不同型别腺病毒的感染情况。方法根据GenBank中腺病毒六邻体基因序列设计一对通用引物，建立Real-time PCR方法检测婴幼儿腹泻标本中腺病毒DNA，并与免疫层析法比较；同时对Real-time PCR方法检测阳性的标本进行PCR产物测序和病毒分离培养及酶切鉴定。结果建立快速、特异检测婴幼儿腹泻标本中腺病毒DNA的Real-time PCR技术。157份婴幼儿腹泻标本中免疫层析法检测阳性3份，阳性率为1．91％；Real-time PCR检测阳性5份，阳性率为3．18％（5／157）；154份免疫层析法检测阴性标本中，有2份Real-time PCR法检测为阳性。5份Real-time PCR检测阳性标本经测序鉴定，Ad3型占1．91％（3／157），Ad7型占1．27％（2／157）；经病毒分离培养检出阳性2例，酶切鉴定为Ad3型。结论Real-time PCR技术结合PCR产物直接测序分析具有敏感、特异等优点，适用于腹泻标本中腺病毒的检测及分型。2008年2—4月浙江省温州地区散发性婴幼儿腹泻的腺病毒主要为Ad3型和Ad7型。

摘要：本研究旨在对14例临床诊断的温州籍轻型β珠蛋白合成障碍性贫血患者的血液学及分子生物学进行分析,测定其PCR产物序列,找出引起该病的致病突变位点并进行单核苷酸多态性分析。对临床诊断的患者抽取静脉血,EDTA-K2抗凝,及时提取模板,设计相关引物,进行PCR扩增后测序,最后经过序列比对和分析,找出引起β珠蛋白合成障碍性贫血的致病突变位点。结果表明:14例标本的DNA扩增产物测序分析中发现4例在IVS-2-654位点发生了C→T的杂合突变;1例为CD41/42位-TTCT缺失;2个位点存在单核苷酸多态性,分别是外显子1第59位的T/C多态性、IVS-2 nt 665,T/C多态性。结论:温州籍轻型β珠蛋白合成障碍性贫血患者单核苷酸多态性具有一定的特殊性;发现了两种基因突变类型,分别为IVS-2-654 C→T的杂合突变和CD41/42位-TTCT缺失。

摘要：目的了解社区空巢老人幸福度状况,探讨影响空巢老人幸福度的因素。方法采用整群抽样法抽取温州市区314名空巢和342名非空巢老人,采用纽芬兰纪念大学幸福度量表(MUNSH)、自行设计的人口学资料及影响因素问卷入户调查。结果空巢老人与非空巢老人人口学资料中婚姻状况、居住形式、月收入、负性生活经历及患病情况5项差异有显著性意义(P0.05),但正性情感、负性情感、正性体验、负性体验差异有显著意义(均P<0.05);不同年龄、性别、文化程度、婚姻状况、居住形式、娱乐活动、患病情况的空巢老人幸福度分项差异有显著意义(P<0.05,P<0.01);患病情况、居住条件、经济收入、娱乐活动和负性生活事件对空巢老人幸福度有重要影响(P<0.05,P<0.01)。结论温州市空巢老人总体幸福度较高但负性因子较非空巢老人多,关注空巢老人的患病情况、居住条件、经济收入、兴趣爱好和负性生活事件等有利于提高其正性情感和正性体验。

摘要：毕业实习是十分重要的教学环节之一。本文从生物技术专业的特点出发,对本科毕业生在实习过程中涉及的合作精神、毕业论文的设计、学生实践动手能力的培养等多个方面进行了阐述,对如何提高学生的团队协作精神、调动学生的学习自主性,锻炼学生的实践能力,培养学生的创新精神等措施进行了探讨。

摘要：目的构建小鼠组蛋白H3K27三甲基转移酶EZH2基因慢病毒载体及鉴定。方法以携带EZH2 cDNA的PCMV-SPORT6载体为模板,自行设计携带有Kpnl和Xmal酶切位点的引物PCR扩增出目的基因编码序列,扩增产物用内切酶酶切后定向克隆到慢病毒载体PLenti-eGFP-NEO中,通过PCR、酶切及测序验证载体;将重组慢病毒载体和包装质粒pRsv-REV、pMDlg-pRRE及pMD2G组成的四质粒系统,共转染293T细胞包装成慢病毒,收集含病毒颗粒的细胞上清液,浓缩和纯化后得到高效价的病毒液,转染293T细胞进行效价测定。结果 PCR扩增出约2241bp的序列,构建的慢病毒载体测序结果与Gene-bank报道的目的基因序列一致;四质粒系统成功共转染入293T细胞中,在细胞中能够稳定表达,包装出了2.1×108TU/ml的病毒液。结论成功构建了小鼠EZH2基因慢病毒载体,并得到2.1×108TU/ml高效价的病毒液。