摘要：目的建立一种基于错配杂交及化学发光技术的检测亚甲基四氢叶酸还原酶(m ethylenetetrahydrofolate reducatase,MTH-FR)基因多态性的新方法。方法针对多态位点设计两条寡核苷酸探针,分别与野生型及突变型序列互补。将两条探针分别与含多态位点C677T的PCR扩增产物杂交,然后用化学发光法检测,根据两条探针的发光值之比确定样品的基因型。结果用本法随机检测了50例DNA样品,结果3种基因型的发光值之比可以严格区分,其中野生型(C/C)15例,杂合型(C/T)28例,突变型(T/T)7例,与参考方法(PCR-RFLP)的检测结果完全一致。结论本方法操作简便、检测快速而且费用低廉,可广泛应用于MTHFR基因突变及多态性检测。

摘要：目的建立一种基于错配杂交化学发光检测p16基因启动子区过甲基化的定量分析方法.方法用亚硫酸氢钠修饰基因组DNA,所有未甲基化的胞嘧啶都被转变为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶则不发生变化.设计合成1对不含CpG位点的引物,同时扩增甲基化或非甲基化目的DNA片段,用2条分别与甲基化及非甲基化CpG位点互补的寡核苷酸探针与扩增产物进行杂交及化学发光检测,通过探针杂交信号强度比确定样品DNA中甲基化的p16基因的比例.结果错配杂交化学发光法具有较好的精密度(CV=5.2%～6.4%)和灵敏度(2.5×10-4pmol),检测已知混合样品的p16基因甲基化率分别为0%、23%、52 %、70% 及93%,与实际结果一致.结论本研究建立的错配杂交化学发光法是一种检测快速、操作简便的p16基因甲基化的定量检测方法.

摘要：目的建立一种新的荧光原位杂交法,快速检测鉴定伤口中的常见病原菌,指导临床早期合理使用抗生素。方法采用荧光同位素标记的,设计针对引起伤口感染的金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、铜绿假单胞菌、肠球菌和大肠埃希氏菌常见五种病原菌的核糖体16 SrRNA序列的互补的DNA寡核苷酸探针,将探针置于玻片上于50℃杂交1 h,用杂交缓冲液于50℃洗涤10 min,干燥后置于荧光显微镜下观察,整个过程大约需要2 h的时间。结果经438例临床标本测试,与培养法比较,荧光原位杂交法的敏感性和特异性分别为94.1%和81.1%。结论该方法适用于伤口感染常见病原菌的快速检测鉴定。

摘要：目的建立一种基于错配杂交及化学发光技术检测亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolatere-ductase,MTHFR)基因多态性的新方法。方法针对多态位点设计两条寡核苷酸探针,分别与野生型及突变型序列互补。将2条探针分别与含多态位点C677T的PCR扩增产物杂交,根据2条探针的发光值之比确定样品的基因型。结果用本法随机检测50例DNA样品,结果3种基因型的发光值之比可以严格区分,其中野生型(C/C)15例,杂合型(C/T)28例,突变型(T/T)7例,与参考方法(PCR-RFLP)的检测结果完全一致。结论本方法操作简便、快速且费用低廉,可广泛应用于MTHFR基因突变及多态性检测。

摘要：目的建立一种基于错配杂交及酶联免疫检测亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性的新方法。方法针对多态位点设计两条寡核苷酸探针,分别与野生型及突变型序列互补。将两条地高辛标记的探针分别与含多态位点C677T的PCR扩增产物杂交,然后显色检测,根据两条探针的吸光度值之比确定样品的基因型。结果用本法随机检测了50例DNA样品,结果三种基因型的发光值之比可以严格区分,其中野生型(C/C)15例,杂合型(C/T)28例,突变型(T/T)7例,与参考方法(PCR-RFLP)的检测结果完全一致。结论本方法操作简便、检测快速而且费用低廉,可广泛应用于MTHFR基因突变及多态性检测。

摘要：目的建立一种基于错配杂交及酶联免疫检测亚甲基四氢叶酸还原酶(Methylenetetrahy drofolate redu-catase,MTHFR)基因多态性的新方法。方法针对多态位点设计两条寡核苷酸探针,分别与野生型及突变型序列互补。将两条地高辛标记的探针分别与含多态位点C677T的PCR扩增产物杂交,然后显色检测,根据两条探针的吸光度值之比确定样品的基因型。结果用本法随机检测了50例DNA样品,结果可见三种基因型的发光值之比可以严格区分,其中野生型(C/C)15例,杂合型(C/T)28例,突变型(T/T)7例,与参考方法(PCR-RFLP)的检测结果完全一致。结论本方法操作简便、检测快速而且费用低廉,可广泛应用于MTHFR基因突变及多态性检测。