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单纯疱疹病毒I型SM_(44)株胸苷激酶基因的克隆及序列测定: 收藏
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引用; 《基础医学与临床》2000年第2期20卷 34-36,40页; 作者：张峰杨国樑袁宏银解云涛胡卫东第二附属医院肿瘤科武汉430071 湖北医科大学肿瘤研究所; 为了分离、克隆单纯疱疹病毒Ｉ型（ＨＳＶ－Ｉ）ＳＭ_(４４)株胸苷激酶基因（ＴＫ），采用原代兔婴肾细胞培养ＨＳＶ－ＩＳＭ_(４４) 株病毒，提取病毒核酸作为模板，设计了ＨＳＶ－ＩＴＫ基因的上、下游引物，在引物的５’端分别引...; 为了分离、克隆单纯疱疹病毒Ｉ型（ＨＳＶ－Ｉ）ＳＭ_(４４)株胸苷激酶基因（ＴＫ），采用原代兔婴肾细胞培养ＨＳＶ－ＩＳＭ_(４４) 株病毒，提取病毒核酸作为模板，设计了ＨＳＶ－ＩＴＫ基因的上、下游引物，在引物的５’端分别引入ＢａｍＨＩ和ＥｃｏＲＩ限制性内切酶位点，通过ＰＣＲ方法扩增出ＴＫ基因，经ＢａｍＨＩ／ＥｃｏＲＩ双酶切与ＰＵＣ１９质粒载体相连接，构建重组体转化受体菌ＪＭ１０９，通过筛选和酶切鉴定，获得ＨＳＶ－ＩＳＭ_(４４) ＴＫ基因阳性克隆，行全序列测定分析，与ＨＳＶ－ＩＣＬ１０１株ＴＫ基因同源性为９９．０２％，存在１１个核苷酸和７个氨基酸的差异。ＨＳＶ－ＩＴＫ基因的克隆成功，为该基因应用于恶性肿瘤的自杀基因治疗奠定了基础。; 来源：详细信息评论

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