摘要：目的探讨假性蛋白激酶毛球族同源蛋白3(TRB3)在肝癌(HCC)细胞增殖、凋亡和迁移中的调控作用及机制。方法免疫组织化学及蛋白质印迹法(Western blot)检测HCC患者癌组织及癌旁组织TRB3的表达;体外检测肝癌细胞系HepG2和Huh7细胞中TRB3的表达,同时设计小干扰RNA靶向抑制TRB3后:CCK8、EdU检测细胞增殖;流式细胞术检测凋亡;Transwell评估迁移能力;同时Western blot检测凋亡、迁移相关蛋白和AKT磷酸化活性的变化。两组间均数比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果Western blot检测发现TRB3在肝癌组织中的表达显著上调,与癌旁正常肝组织相比,其相对表达水平分别为0.78±0.12和0.29±0.09,P<0.01,差异有统计学意义;小干扰RNA抑制TRB3后,CCK8、EdU检测发现HepG2和Huh7细胞的增殖活性明显减弱(P值均<0.05);流式细胞学检测结果显示HepG2和Huh7细胞的凋亡比例显著增加(P值均<0.01);Western blot检测也发现凋亡调控蛋白BAX和Bim表达亦显著增加(P值均<0.01);Transwell结果显示HepG2和Huh7细胞的迁移能力下降(P值均<0.05),迁移调控蛋白MMP4和MMP9的表达亦显著下调。Western blot结果显示AKT的磷酸化水平显著增加。结论TRB3通过抑制AKT的磷酸化活性,调控肝癌细胞增殖、凋亡、迁移。TRB3可能是一种潜在的治疗肝癌的靶向位点。

摘要：目的原核表达和纯化腺相关病毒(AAV)衣壳保守区抗原肽,制备抗AAV衣壳保守区的兔多克隆抗体。方法设计并合成编码AAV衣壳蛋白保守区的DNA,将序列克隆到载体pET30a,获得质粒pET30a-AAV-CR,原核表达并纯化保守区多价抗原肽,考马斯蓝染色法及Western blot法对AAV保守区多价抗原肽进行鉴定。将日本大耳朵白兔分为实验组与对照组(1只/组),实验组注射AAV保守区蛋白制备多克隆抗体,对照组注射PBS,ELISA检测抗体效价,Western blot及细胞免疫荧光法检测抗体应用效果。结果成功构建了表达AAV衣壳保守区抗原肽的质粒pET30a-AAV-CR,表达纯化得到相对分子质量为17000的蛋白质;纯化后的蛋白可在兔体内诱导产生针对AAV衣壳保守区的抗体,且该抗体能广泛性识别AAV1-AAV10衣壳蛋白序列。结论诱导出AAV衣壳保守区蛋白并成功获得了抗AAV衣壳保守区的多克隆抗体,为后续载体开发以及生物学功能研究奠定了基础。

摘要：目的评价益母草注射液应用于人工流产女性的有效性和安全性,为临床合理用药提供参考。方法应用真实世界研究,采用前瞻性、非随机对照、多中心登记队列研究设计,共纳入2019年8月至2021年12月全国170家医院的人工流产女性8893例,其中观察组7506例,对照组1387例。对照组按其疾病诊治规范给予基础治疗,观察组在对照组基础上给予益母草注射液。最终观察组7473例、对照组1378例完成研究。观察两组女性术后阴道流血时间、术后阴道流血量、复经天数,并记录益母草注射液的不良反应发生情况。结果与对照组相比,益母草注射液应用于人工流产术,可有效缩短术后阴道流血时间(P5~60mL)差异有统计学意义(P<0.001)。结论益母草注射液应用于人工流产术,可有效缩短术后阴道流血时间,减少术后出血量,促进月经恢复,止血调经作用明显,值得临床推广应用。