摘要：试验旨在研究饲粮不同代谢能和粗蛋白水平对产蛋后期双莲鸡配套系生产性能、蛋品质、肝脏脂代谢的影响。试验选取240只健康、体重及产蛋率接近的40周龄双莲鸡产蛋母鸡,随机分为6组,每组4个重复,每个重复10只鸡。试验采取2×3双因素设计,代谢能(ME)设定为11.30和10.88 MJ/kg两个水平,粗蛋白(CP)设定为16.2%、15.2%和14.2%三个水平,预试期2周,正试期12周。结果显示:(1)粗蛋白水平对产蛋率、料蛋比、平均蛋重无显著影响(P>0.05),但11.30 MJ/kg代谢能水平可显著降低51~54周龄双莲鸡产蛋率和平均日产蛋量(P<0.05),并显著增加平均蛋重(P<0.05)。(2)饲粮代谢能和粗蛋白互作极显著影响46周龄鸡蛋蛋白高度和哈氏单位(P<0.01),并显著影响50周龄鸡蛋蛋黄颜色(P<0.05);10.88 MJ/kg代谢能水平54周龄鸡蛋哈氏单位、蛋黄比例显著高于11.30 MJ/kg代谢能水平(P<0.05),而46、54周龄鸡蛋蛋黄颜色和46、54周龄鸡蛋蛋壳厚度极显著低于11.30 MJ/kg代谢能水平(P<0.01),50周龄蛋壳厚度显著低于11.30 MJ/kg代谢能水平(P<0.05);16.2%粗蛋白水平46周龄鸡蛋哈氏单位显著高于14.2%粗蛋白水平(P<0.05),而54周龄鸡蛋蛋黄比例极显著低于15.2%和14.2%粗蛋白水平(P<0.01)。(3)10.88 MJ/kg代谢能水平双莲鸡血清、肝脏甘油三酯水平,肝脏相对重量和腹脂相对重量以及肝脏脂肪酸合成相关基因如SREBP-1c、ACACA、FAS、SCD1表达量均显著低于11.30 MJ/kg代谢能水平(P<0.01)。综合分析,本试验条件下双莲鸡配套系蛋鸡产蛋后期(42~54周龄)代谢能和粗蛋白水平分别以10.88 MJ/kg和16.2%为宜。

摘要：探究烯效唑对扁穗雀麦生长发育和种子产量品质的影响,为其种子增产提质提供科学依据。以‘江夏’扁穗雀麦为试验材料,采取随机区组设计,在拔节期喷施不同浓度烯效唑(0、50、90、130 mg/kg),研究植株生长、种子产量和萌发特性。结果表明:烯效唑降低了植株高度,提高了抗倒伏能力。除50 mg/kg的烯效唑对生殖枝数有显著增加外(P<0.05),其余处理对植株第二节长、茎粗、分蘖数和生殖枝数影响差异不显著。喷施不同浓度烯效唑,扁穗雀麦的小穗数/生殖枝、种子数和种子产量均表现为增加,但只有50 mg/kg处理下各指标差异达显著水平(P<0.05)。90 mg/kg烯效唑处理可显著增加扁穗雀麦种子活力指数(P<0.05),但所有处理对千粒重、发芽率和发芽指数影响较小。各指标相关性分析发现,植株高度与倒伏率、分蘖数和生殖枝数极显著正相关(P<0.01);种子产量和生殖枝数显著正相关(P<0.05)。喷施50 mg/kg烯效唑,扁穗雀麦种子产量最高,达1508.31 kg/hm^(2),较对照增加13.63%,差异显著(P<0.05)。

摘要：为了建立水禽细小病毒(WPV)快速检测方法,根据序列比对结果在水禽细小病毒NS基因SF3保守区域内设计特异性引物,建立SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR通用检测方法。该方法的扩增效率(E)为90.0%,相关系数(R~2)=0.99,标准曲线方程为y=-3.607x+38.77;除WPV出现S形扩增曲线外,新城疫病毒(NDV)、H9亚型禽流感病毒(H9 AIV)、鸭坦布苏病毒(DTMUV)、鸭肝炎病毒(DHAV)、鸭肠炎病毒(DEV)、鸭呼肠孤病毒(DRV)样品均未出现S形阳性扩增曲线;批内变异系数(CV)为0.15%~0.23%,批间变异系数为0.09%~0.28%。结果表明,SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法重复性好、灵敏度高和特异性强。临床样品检测结果表明,SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR与普通PCR的符合率达98.4%,灵敏度是普通PCR的1 000倍。SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法不仅能定性检测WPV,还可以进行定量检测,可用于种鸭场、种鹅场的WPV净化检测,也可用于WPV临床大量样品的快速检测。

摘要：本研究旨在了解白三叶(Trifoliumrepens)SSR位点信息和序列特征,开发多态性SSR引物,区分20份白三叶材料。对白三叶不同颜色的花瓣进行转录组(RNA-seq)测序,并根据转录组测序结果中的SSR位点批量设计引物,随机选择60对引物进行多态性验证,选择多态性高的引物指纹图谱构建。结果表明,白三叶转录组中含有SSR位点的序列有24960个,出现频率为13.25%,平均约5.29 kb出现1个SSR位点;白三叶转录组SSR重复碱基类型有6种,其中三碱基重复占比最高(33.70%),其次为双碱基(28.26%)和单碱基重复(25.02%),其他碱基重复类型较低,仅占总SSR的9.01%。A/T(24.85%)、AG/CT(16.48%)和AAG/CTT(8.89%)分别为单碱基到三碱基的优势重复单元;单碱基至六碱基各基元重复次数集中在4~21次,占总数量的98.11%;序列长度变化在12~35 bp,占总数的96.43%;根据SSR位点序列设计出18594对引物,占总SSR的74.50%;60对随机引物中能扩增出条带的有52对,多态性引物17对,分别占86.7%和32.7%;以多态性较高的5对引物构建的白三叶指纹图谱,能够有效地将20个不同白三叶品种区分开。本研究中白三叶转录组SSR位点分布频率高,类型丰富,具有较高的多态性,在白三叶遗传多样性分析、分子标记辅助育种和指纹图谱构建中具有较大的应用潜力。

摘要：猪肉中多不饱和脂肪酸具有促进发育、保护血管、防治多种疾病等作用,但普通饲料养殖的恩施黑猪肉饱和脂肪酸含量高,易让人肥胖和患高血压,已成产业发展瓶颈;研究出可降低猪肉饱脂肪酸和提高猪肉多不饱和脂肪酸的饲料,能提高猪肉保健功效,促进恩施黑猪肉产业发展。本试验通过饲料设计配方优化得出,恩施黑猪饲粮中添加生物有机硒1.5 mg、亚麻油80 g、维生素E 160 mg、鱼粉130 g,可将猪肉中的多不饱和脂肪酸从61.68%提高到73.83%,显著增加猪肉多不饱和脂肪酸(P<0.05),提高猪肉的安全性、健康性和食味品质。

摘要：【目的】试验旨在分析山羊Z-DNA结合蛋白(Z-DNA binding protein 1,ZBP1)基因3′-端非翻译区(3′-UTR)、内含子1和外显子7区域中单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点与产羔性能之间的关联性,为高繁殖力山羊分子育种提供新的遗传标记。【方法】选取麻城黑山羊、黑头羊和波尔山羊作为研究样本,采集血样提取DNA,根据转录组数据所选SNP位点在山羊ZBP1基因序列中的位置信息设计引物,利用多重单碱基延伸SNP分型技术(SNaPshot)分析所选SNP位点的遗传多样性,采用一般线性模型(GLM)对ZBP1基因SNP位点与3个品种山羊的产羔性能进行关联分析。【结果】山羊ZBP1基因中存在12个潜在的SNPs位点,其中7个SNPs位点(g.9734 A>G、g.9772 T>C、g.352 C>T、g.955 C>T、g.1880 G>A、g.2566 T>C和g.7919 G>A)具有多态性,除g.9734 A>G在麻城黑山羊群体中仅有AA和GA 2种基因型外,其余6个SNPs位点在麻城黑山羊、波尔山羊和黑头羊群体中均表现为CC(AA)、CT(GA)和TT(GG)3种基因型。波尔山羊群体中g.9734 A>G、g.9772 T>C位点表现为低度多态(PICA和g.7919 G>A位点表现为低度多态(PICC、g.352 C>T、g.955 C>T、g.1880 G>A和g.2566 T>C位点表现为中度多态(0.25G、g.352 C>T和g.7919 G>A位点表现为低度多态(PICG、g.9772 T>C和g.352 C>T位点在3个山羊群体中均处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05),波尔山羊及麻城黑山羊群体中g.2566 T>C位点处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05)。关联分析结果显示,g.9772 T>C位点与波尔山羊头胎产羔数显著关联(PT和g.7919 G>A位点与波尔山羊总体产羔数均显著或极显著关联(PT位点与黑头羊总体产羔数极显著关联(PC位点与麻城黑山羊头胎产羔数显著关联,g.9734 A>G和g.9772 T>C位点与麻城黑山羊总体产羔数均显著关联(PT、g.2566 T>C、g.7919 G>A和g.9734 A>T位点之间处于强连锁平衡状态(D’>0.85,r2=1);黑头羊群体中g.352 C>T和g.2566 T>C位点之间及g.2566 T>C、g.9734 A>T和g.9772 T>C位点之间处于强连锁平衡状态(D’>0.83,r2=1);麻城黑山羊群体中g.352 C>T和g.9772 T>C位点之间处于强连锁平衡状态(D’>0.87,r2=1)。【结论】本研究筛选出7个SNPs,在山羊群体中共存在5个完全连锁的SNPs,其中g.352 C>T、g.7919 G>A、g.9772 T>C和g.9734 A>G 4个SNPs位点可分别作为特定山羊品种育种过程中产羔性能的潜在候选遗传标记,为山羊产羔性能研究提供参考数据。

摘要：【目的】研究TP53凋亡效应因子(PERP1)在卵泡发育中的调控作用及表达机制。【方法】以蛋鸡卵巢组织为材料,克隆蛋鸡PERP1基因CDS区全长序列,并构建PERP1基因过表达载体,通过转染鸡卵泡颗粒细胞,采用实时荧光定量PCR检测转染后PERP1基因,增殖凋亡相关基因BCL2、c-Myc,以及氧化应激相关基因SOD2、CAT的相对表达量。利用3个在线生物信息学分析软件分别预测鸡PERP1基因核心启动子区,并根据预测结果设计6个启动子缺失片段引物,以蛋鸡血液组织为材料,克隆PERP1基因5′-UTR的6个启动子缺失片段并构建重组质粒,并以荧光素酶报告基因试验验证启动子活性区域位置。采用4个转录因子在线预测软件进行启动子活性区转录因子的预测分析。【结果】本研究成功获得鸡PERP1基因的CDS区全长序列并成功构建了PERP1基因的过表达载体。PERP1基因过表达后,与对照组相比,抗凋亡基因BCL2和促增殖基因c-Myc表达量极显著下调(P0.05)。生物信息学软件预测和荧光素酶报告载体试验结果表明,PERP1基因核心启动子位于CDS区上游(―441/―71 bp)的位置。转录因子预测结果发现Sp1、ZEB1、Zic3、c-Jun、AP-2alpha、AP-1、NF-1、c/EBPalp、Adf-1、HNF-3、CACCC-bi、c-Myc和Smad4共13个候选转录因子。【结论】PERP1基因具有促进颗粒细胞凋亡的功能,调控该基因的表达对卵泡发育具有重要意义。

摘要：【目的】利用单碱基编辑器在宁乡花猪肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)基因第2外显子处引入终止密码子,以获得MSTN基因表达沉默的肾成纤维细胞系,为后期培育MSTN碱基编辑猪奠定基础。【方法】首先在MSTN基因的第2外显子处设计1条单向导RNA(single guide RNA,sgRNA),将其连接至pMLM3636-puro质粒,形成重组表达载体pMLM3636-puro-MSTN,与含有红色荧光碱基编辑器YE1-BE3-FNLS共转入宁乡花猪肾成纤维细胞中,在红色荧光和嘌呤霉素双筛选条件下,挑取单克隆细胞,测序验证后,分析阳性单克隆细胞的蛋白表达情况。【结果】在MSTN基因第2外显子处发生了碱基定点突变,目标位点的氨基酸序列由色氨酸(TGG)转变成终止密码子(TAA),且G→A突变率为5.5%。Western blotting检测结果表明,试验组10号单克隆细胞的MSTN蛋白表达量与野生型相比降低了60%。【结论】本研究运用单碱基编辑技术在宁乡花猪MSTN基因编码区引入终止密码子,使翻译提前终止,导致蛋白表达量显著降低,为后期MSTN基因碱基编辑猪的生产奠定基础。

摘要：试验旨在研究棉籽壳与甜菜渣混贮发酵后的品质变化。采用双因素交叉分组设计,将甜菜渣(SBP)和棉籽壳(CSH)分别按鲜重比70:30、75:25、80:20、85:15混合,分别采用添加发酵菌和不添加发酵菌两种方式进行混贮,共分为8组,每组3个重复。密封发酵1、2、6个月。结果显示,各组发酵饲料的感官评定等级均达良好以上,其中CSH-A30组、CSH-N30组、CSH-A25组、CSH-N25组、CSH-A20组发酵饲料感官评定等级达到优等。发酵2个月时,棉籽壳添加量对发酵饲料的干物质(DM)含量具有极显著影响(P0.05);CSH-A组发酵饲料的NDF、ADF含量均显著高于CSH-N组(P0.05),ADF含量增加了9.3%(P<0.01);发酵6个月时,发酵饲料DM含量比发酵前降低了5.8%(P<0.01),ADF含量增加了9.6%(P<0.01)。研究表明,以70%~75%甜菜渣、25%~30%棉籽壳混合,添加菌种发酵2个月较为适宜。

摘要：外源猪生长激素基因被导入湖北白猪．为避免羊、猪之间在金属硫蛋白启动上的同源性而造成ＰＣＲ检测结果的假阳性，分别将ＰＣＲ合成反应的两个引物设计在羊金属硫蛋白基因启动子一侧和猪生长激素一侧，使ＰＣＲ合成反应的结果特异地反映外源基因的整合性，准确地鉴定出转基因猪．ＤＮＡ印迹分析结果表明，４３头待检仔猪中有６头呈外源基因整合阳性．