摘要：目的 观察人骨肉瘤细胞U2OS中TPP1表达受抑制后其端粒长度和放射敏感性变化，探讨在端粒酶阴性肿瘤细胞中TPP1与端粒长度及放射敏感性之间的关系。方法 根据TPP1 mRNA编码序列设计并合成干扰siRNA序列，瞬时转染U2OS细胞；使用RT-PCR和Western blot分别在基因和蛋白水平检测干扰前后TPP1表达量的变化；利用Real-time PCR检测细胞端粒长度的变化；运用流式细胞术（Annexin V-FITC法）检测细胞凋亡情况；采用克隆形成实验分析放射敏感性的变化。结果 siRNA转染U2OS细胞后，siRNA干扰组的mRNA基因表达抑制率为（65.70±2.10）%，蛋白表达抑制率为（74.80±3.20）%；siRNA干扰组相对端粒长度（0.99±0.07）明显短于阴性对照组（1.64±0.05）及空白组（1.55±0.05）（F=113.68，P〈0.01），而阴性对照组与空白组间端粒长度差异无统计学意义；siRNA干扰组细胞凋亡率为（13.67±0.85）%，高于阴性对照组（8.59±0.38）%及空白组（8.18±0.21）%（F=92.32，P〈0.01）；siRNA干扰组细胞株SF2 值（0.6074±0.0115）较空白组（0.8062±0.0056）降低显著（F=246.45，P〈0.01），放射增敏比为1.33。结论 在端粒酶阴性细胞U2OS中，特异性地沉默TPP1能够引起端粒长度的缩短，并且增加了细胞的放射敏感性，推测干扰TPP1引起端粒缩短很可能是其放射增敏的机制之一。

摘要：目的比较一种一体化调强射野设计方式与常规射野设计方法在乳腺癌根治术后调强放疗中的剂量学差异。方法选取41例左侧乳腺癌根治术后患者的CT图像,进行胸壁、部分腋窝、锁骨上、内乳等靶区及危及器官(OAR)勾画。对每一套CT图像分别制作一体化射野设计的调强计划和常规调强计划。评估两种计划靶区和OAR剂量学分布。结果两种计划靶区剂量分布和OAR受照剂量均满足临床要求,靶区剂量学参数差异无统计学意义(P>0.05)。一体化调强计划相比于常规计划:患侧肺V5降低9.7%(t=2.407,P0.05)。结论一体化调强射野设计技术显著降低了患侧肺和心脏的受照体积与受照剂量,有望减轻乳腺癌根治术后放疗的不良反应。新型设计方案选取了较多的样本,包含不同分期的左乳癌根治术患者,对乳腺癌根治术后调强放疗临床应用具有普遍性,可以作为一种新的照射方式推广。

摘要：目的探讨4种准直器角度优化技术对胃癌调强放疗计划靶区(PTV)及危及器官(OAR)剂量学的影响。方法选取2015-2016年间武汉大学中南医院接受调强放疗的10例胃癌患者,调强放疗计划均采用常规5个野(330°、10°、45°、90°、180°),其他优化参数一致。在Eclipse计划系统中分别用4种不同的准直器角度优化技术设计调强放疗计划。准直器角度优化技术包括准直器角度设为默认0°(CL0)、与0°垂直的90°(CL90)、采用Eclipse自动角度优化(CLA)以及将准直器角度设为X-Jaws围绕靶区PTV距离最短时的角度(CLX)。主要剂量学参数包括PTV适形指数(CI)、均匀指数(HI)、平均剂量(Dmean)及OAR受量,并且考虑治疗时间(Time)、治疗跳数(MU)、控制点(CP)、分野数(SF)及适形距离(Fx)等参数。结果以CL0优化为对照,4种准直器角度优化技术PTV的CI、HI及Dmean比较差异无统计学意义(P>0.05),然而CLX能显著增加靶区PTV的Dmean(P<0.05);CLX优化能够减少肝(V30减少1.54%)、左肾(V12减少1.46%)等受量,但会轻微增加小肠和脊髓的最大剂量(<1%),而CL90与CLA优化会导致增加胃受量。4种不同的准直器角度优化中,CLX优化能够减少MU (减少25.02%)、CP (减少26.03%)、Fx (减少20.27%)及SF (平均减少1.3个分野)。对于Time,CLX相对减少10.03%;CL90与CLA能够减少MU、CP、Fx和SF,且CL90在减少Time方面有一定的优势,而CLA会相对增加Time (增加5.04%)。结论在胃癌的调强放疗计划中,采用CL90、CLA和CLX 3种准直器角度优化技术能够获得与常规CL0的准直器角度优化相当的剂量分布,且能减少MU,从而减少漏射和照射时间,提高治疗效率。

摘要：目的:利用CRISPR/Cas9技术构建Myo10蛋白敲除稳定细胞系,探讨Myo10对结肠癌细胞SW620形态、增殖和细胞周期的影响。方法:根据sgRNA设计网站选择并合成5对针对人Myo10基因的sgRNA序列,经退火形成双链后,用T4DNA连接酶将其与经BsmBⅠ线性化的Lenti-CRISPR v2慢病毒载体连接,包装成病毒感染SW620细胞。经嘌呤霉素筛选后用Western Blot检测Myo10的表达,选择敲除效率最高的sgRNA序列,进行单克隆细胞筛选,最后再用Western Blot验证Myo10是否敲除。用显微镜、Rhodanmine phalloidin细胞染色观察细胞形态;CCK-8实验及流式细胞术检测细胞增殖及细胞周期变化。结果:经测序鉴定成功构建了5对sgRNA-LentiCRISPR v2慢病毒载体,嘌呤霉素筛选后得到Myo10完全敲除的SW620细胞系。敲除Myo10的SW620细胞形态变圆,其增殖能力明显减弱,细胞周期S期比例增加。结论:成功构建Myo10完全敲除的SW620稳定细胞系;Myo10可影响SW620细胞形态和增殖能力;该实验为后续深入探讨Myo10作为结直肠癌潜在靶向基因的机制研究奠定了基础。

摘要：目的:研究宫颈癌术后放疗患者不同骨盆勾画及限量方式对调强放射治疗(IMRT)计划剂量的影响。方法:选取11例宫颈癌术后患者,对患者CT图像勾画靶区和小肠、直肠、膀胱、股骨头、髋骨、腰骶骨、骨盆等危及器官。针对每例患者分别设计3个计划,包括限制骨盆的IMRT(BM)计划、限制髋骨的IMRT(OC)计划以及限制髋骨和腰骶骨的IMRT(OC+LS)计划,并评估3组计划的靶区和危及器官的剂量分布。结果:3组计划的计划靶区覆盖率均能满足临床要求,且小肠、直肠、膀胱、股骨头等危及器官的剂量学参数相当,差异无统计学意义(P>0.05)。对于骨盆剂量,对髋骨和腰骶骨进行限量的IMRT(OC+LS)计划的骨盆Dmean、V10、V20、V30、V40和腰骶骨Dmean、V20、V30、V40均显著低于其他两个计划(P<0.05)。与IMRT(BM)计划相比,IMRT(OC+LS)计划可使骨盆V20和V30降低约10.1%和8.0%。与IMRT(OC)计划相比,IMRT(OC+LS)计划可使腰骶骨的V20和V30降低约17.6%和27.9%。IMRT(OC)计划髋骨的剂量略低于IMRT(OC+LS)计划,但二者剂量体积参数差异均在1%以内。结论:宫颈癌术后放疗行保护骨盆的IMRT计划时,若将髋骨和腰骶骨限量,则可以在在满足靶区临床要求以及常规危及器官保护的基础上,有效降低骨盆受量,更好地保护骨髓。