摘要：本文报道一种使用网格对培养板单层贴壁细胞进行原位计数的方法。自行设计和制作了培养板底贴膜网格和4单元方格目镜网格。培养板底贴膜网格用于细胞计数区的定位,用目镜网格计数细胞。目镜网格单元方格的平均细胞计数除以方格的面积,再乘培养孔底面积,计算出一个孔的细胞总数。比较实验和统计学分析证明了这一方法的准确度、精密度和线性范围,而且本方法简便易行、低耗实用。数码显微照相技术的结合应用进一步增强了本计数方法的适用性。

摘要：采用PCR法快速筛选勒氏笛鲷(Lutjanus russelli)基因组文库,以获得(CA)n微卫星位点。勒氏笛鲷基因组DNA经限制性内切酶HaeⅢ+DraⅠ双酶切后,连接T-载体克隆,构建基因组文库。以通用引物M13+/-与重复序列引物(CA)15对基因组文库进行筛选,二次筛选后得到121个可能含有微卫星位点的阳性克隆。进行序列测定,共获得53个CA(n≥7)重复序列,重复次数主要分布于7～15(80.77%)。在所得微卫星序列中,重复单元除CA外,还观察到单碱基、三碱基、四碱基、五碱基重复单元。根据侧翼序列设计48对引物,通过优化PCR反应条件,可获得清晰可重复的目的条带。研究旨在为勒氏笛鲷遗传多样性研究及遗传图谱的构建等奠定基础,为勒氏笛鲷资源的合理开发利用提供参考。

摘要：目的风疹病毒(Rubella virus,RV)是先天性风疹综合征(先天性心脏病、先天性白内障和耳聋的三联综合征)的致病因素,本研究针对RV全基因组序列的生物信息学特点,设计RV 60-m er长链寡核苷酸探针,探讨寡核苷酸探针和功能基因芯片的设计方法。方法利用生物信息学软件Array Designer 2.0针对RV全基因组设计Tm值相近、长度均一的60-m er探针,利用其BLAST功能将所得探针在GenBank数据库进行序列比对分析,筛选得到RV特异性O ligo探针并设计成功能基因芯片。结果获得11条60-m er O ligo探针,用于打印成DNA芯片,拟用于RV检测与病毒基因表达功能分析。结论利用Array Designer 2.0软件设计芯片探针比常见其他方法更有效,尤其适合于病毒检测和病毒基因功能分析复合型芯片的设计。

摘要：以苎麻[Boehmeria nivea（L．）Gaud．]栽培品种芦竹青为材料，经Mse Ⅰ酶切并与相应接头连接，然后与生物素标记的探针（CT）15杂交，再用链亲和素包被磁珠（Dynabeads M-280）捕捉杂交产物，以21碱基接头寡核苷酸为引物经PCR扩增获得了双链目的片段，回收300—1000bp DNA片段，然后克隆到pMD18-T载体上，转化至DH5α中，这样就构建了苎麻富含（GA）n微卫星的部分基因组文库。随机挑取36个克隆，以锚定简单重复序列为引物对其进行PCR筛选。测序分析了22个阳性克隆，每个克隆都含有微卫星DNA，阳性克隆率为61．1％，微卫星种类以与探针互补的（GA／CT）n为主，占83．3％，同时还存在（TG／AC）n和三碱基、六碱基为单元构成的苎麻微卫星，如（GAC）n、（ACG）n、（TCT）n、（TCG）n、（GAA）n、（CCGACG）n、（GAGAAA）n等。最后以18个微卫星位点设计了18对苎麻微卫星特异引物。GMCT重复单元的长度从7到40范围内变化，平均为19．2，显示了它们将产生良好多态性，为一种强有力的遗传标记。苎麻微卫星DNA标记可广泛应用于苎麻基因型鉴定，基因和QTL分析，分子标记辅助育种，系谱分析等。

摘要：　路易斯巴斯德（1822－1895），法国杰出的有机化学家，现代微生物学的奠基人。他首先发现了碳酸盐分子的旋光性，开创了立体化学的研究。通过对发酵现象的多年研究，他证明了发酵是由不同种类的微生物引起，并发明了至今仍广为应用的“巴斯德消毒法”。在同“生命自然发生说”的争论过程中，他用著名的曲颈瓶实验，彻底推翻了“自然发生说”。此外，他还对当时流行的蚕病、鸡霍乱、炭疽病、狂犬病的病原体进行了研究，提出传染病是由病原微生物引起，并提出接种疫苗以防治传染病，为造福人类做出了巨大的贡献。　　在巴斯德的科学研究生涯中，他一贯踏踏实实，全身心地投入科学研究，形成了他特有的科学技术思想与研究方法。1　积极吸取他人的经验　　英国著名物理学家牛顿有一句名言：“如果我比别人看得远些，那是因为我站在巨人的肩上。”的确，杰出的科学家往往都善于积极吸取前人的经验，巴斯德也不例外。在巴斯德之前，意大利生物学家斯巴兰扎尼就坚信，生命只能来源于生命，并在这方面做了许多有效的工作。1859年达尔文《物种起源》的出版，也使巴斯德得到启示，生命只能由生命而来，微生物必有母体。著名的法国化学家巴拉也对巴斯德的研究工作提出过许多宝贵的意见［1］。正是广泛地吸取了这些科学家的理论和经验，巴斯德才于1860－1864年期间设计出著名的曲颈瓶实验，给“生命的自然发生说”以致命的一击。这对于生命科学、医学都具有不可估量的意义。辩证法认为，人的认识来源分为直接经验和间接经验两种，排斥任何一方面都是不行的。巴斯德在做好自己研究工作的同时，广泛地吸取他人的经验，将二者有机地结合起来，才使自己得到了不断地提高。

摘要：根据GenBank已登录的鸡和鹌鹑IFN-α基因序列,用Oligo6.0设计一对能同时扩增鸡和鹌鹑INF-α基因的共用引物,利用RT-PCR方法从经ConA诱导培养的三黄鸡、鹌鹑外周血淋巴细胞中分别扩增到IFN-α ORF全长cDNA,并克隆到pET-28a（＋）载体上。将测序结果分别与GenBank中已收录的家禽类IFN-α核苷酸序列进行同源性比较及遗传进化分析。结果发现鸡、鹌鹑IFN-α cDNA遗传进化稳定,与GenBank中收录的鸡、鹌鹑IFN-α核苷酸序列同源性为98.6%-99.8%、99.8%。鸡与其它家禽类的IFN-α核苷酸序列比较分析发现,与鹌鹑亲缘性较高,同源性达86.9%-87.1%,但与家水禽（鸭、鹅）差距较大,同源性最高也只有67.6%;鹌鹑IFN-α核苷酸序列与家水禽同源性在也只在62.7%-62.9%之间;基因遗传进化树分析可见家禽类IFN-α被分成两个大分枝,分别是由鸡和鹌鹑两个小分支组成的一个大分支与家水禽独立分支组成。

摘要：目的:建立马、牛、猪、鸭肉四重聚合酶链式反应(PCR)反应体系,为牛肉掺假检测提供参考。方法:选取马、牛、猪、鸭肉阳性样本,根据线粒体基因组中细胞色素b(cytochrome b)序列,设计多重PCR引物,同时对马、牛、猪、鸭肉进行PCR及电泳检测,建立四重PCR反应体系,并运用该体系对市场40份牛肉制品进行检测。结果:引物比例为马:牛:猪:鸭=1:1:2:1时,46℃退火温度下反应35个循环,四重PCR效果较好;建立四重PCR反应体系,四重PCR条带清晰且亮度较为一致,几乎没有二聚体产生,扩增灵敏度高。根据样品检测结果,烤牛肉串、牛肉丸的掺假率较高,分别为36.4%、75%,牛排未检出除牛肉外的三种动物源成分,但不排除有其他动物源成分的掺入。结论:四重PCR反应体系可用于牛肉掺假检测。

摘要：目的对基于DNA条形码的肉制品掺伪中非定向筛选技术进行探索。方法以线粒体基因组中COI基因为靶标,设计猪、牛、羊、马、鸡、鸭、鹅、鼠8种动物源物种间的通用引物和特异性引物,建立禽畜肉的DNA条形码检测方法。同时应用该技术对50份市售的肉制品进行检测。结果本研究建立了DNA条形码筛选技术,电泳条带通过基因测序能正确识别猪、牛、羊、马、鸡、鸭、鹅、鼠8种动物源成分,结合分子克隆技术能实现对混合肉的检测。50份市售肉制品的DNA条形码结果显示,16份掺杂了除牛羊肉以外的其他禽畜肉。结论 DNA条形码技术能打破传统标准中PCR法检测目标唯一性的局限,具有良好的应用前景。