摘要：目的:探索并设计一种新颖的双靶点嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)结构,获得相应CAR-T细胞并验证其对肿瘤细胞的体内外杀伤效果。方法:构建并制备5种包含人源化CD19 scFv和CD79b scFv、CD8 hinge&TM-4-1BB-CD3ζ和/或CD3ε链胞内区的双靶点CAR-T细胞,荧光素酶法和ELISA法检测CAR-T细胞对3M-CD19-CD79b-Luc靶细胞的杀伤能力和细胞因子的分泌,选取最优结构CAR-T细胞治疗Daudi-Luc细胞构建的白血病小鼠模型并评估其疗效,同时使用其他靶点代入优选结构,相同方法验证该结构的稳定性及有效性。结果:CAR-19-79b-T细胞培养7 d后,CAR-19表达率为21.6%-36.3%,CAR-79b表达率为21.7%-37.8%。CAR-19-79b-T细胞在10∶1效靶比时,对3M-CD19-CD79b-Luc细胞的杀伤率均显著高于T细胞对照组,其中CARⅢ、CARⅣ号结构细胞杀伤能力最强,均显著高于T细胞组(P0.05)。杀伤显著且分泌细胞因子水平低的CARⅣ细胞对Daudi-Luc白血病小鼠治疗效果明显,延长小鼠生存周期至64 d,T细胞对照组小鼠于(41.0±2.4)d全部死亡。相同结构构建的CAR-19-BCMA-T和CAR-19-22-T均表现出了显著的杀伤能力和较低的细胞因子水平。结论:成功设计了一种新颖的抗双靶点CAR-T细胞,能够高效杀伤相应的肿瘤细胞,同时分泌较少的细胞因子(如TNF-α,IFN-γ),而且对Daudi淋巴瘤小鼠动物模型有显著的治疗效果,该双靶点CAR结构表现出良好的杀伤特异性和安全性。

摘要：目的:利用三维数字化模型重叠法,探讨无托槽隐形矫治器伸长后牙的效率,为临床方案设计提供参考。方法:选择24例后牙伸长量不小于0.5 mm的Invisalign患者,共126颗观测牙。于矫治前、后分别采用i Tero扫描,获取患者数字化模型,分别命名为“实际初始”和“实际终末”模型。在ClinCheck软件中获取该方案的初始、终末模型,命名为“虚拟初始”和“预期终末”模型。以STL格式导出后分别导入Geomagic Studio,将初始模型与实际终末、预期终末模型分别重叠,得到实际伸长量与预期伸长量。采用SPSS 23.0及GraphPad Prism 5.0软件对数据进行统计学分析,计算伸长后牙的效率并分析可能的影响因素。结果:无托槽隐形矫治器伸长后牙的效率为30.2%,实际伸长量与预期设计伸长量间呈直线相关(P<0.05),直线回归方程为y=0.305x-0.010;实际伸长量与预期伸长量的差值与矫治器数量呈正相关(P<0.001),与预期伸长量呈正相关(P<0.001);低角患者实际伸长量与预期伸长量的差值比均角患者大(P<0.05)。结论:无托槽隐形矫治器伸长后牙的效率较低,约为30.2%,垂直生长型影响矫治效率,可对低角患者设计更多的过矫正。

摘要：目的:设计并制备一种分别靶向B细胞表面抗原CD19和CD22的CAR-T细胞,检测其对肿瘤细胞的体内外杀伤效果。方法:将含有人源化CD19 Sc Fv的二代CAR分子和带有CD3ε链作为共刺激结构域的CD22 Sc Fv CAR分子以P2A自剪切肽连接,序列连接于慢病毒载体p LTR-CMV-MCS中,以HEK-293T细胞包装相应的慢病毒载体,感染健康志愿者提供的T细胞制备CAR-19-22-T细胞,同时以相同二代结构分别构建单靶向CAR-T细胞作为参照。构建表达荧光素酶、CD19和/或CD22的前列腺癌3M细胞(靶细胞)。将各种CAR-T细胞与靶细胞共同培养,采用荧光素酶化学发光法和ELISA法检测其对靶细胞的杀伤能力和细胞因子的分泌水平。通过尾静脉注射Raji-Luc细胞构建NOD-SCID免疫缺陷小鼠白血病模型,分别注射各组CAR-T细胞进行治疗并评估其疗效。结果:培养7 d的CAR-19-22-T细胞的CAR-19表达率为13.7%,CAR-22表达率为14.3%。CAR-19-22-T细胞在10∶1效靶比时,对3M-CD19-Luc、3M-CD22-Luc和3M-CD19-CD22-Luc细胞的杀伤率均显著高于T细胞[(78.1±14.4)%vs(11.1±4.3)%(、46.7±10.7)%vs(12.4±2.7)%(、90.5±4.3)%vs(14.3±3.7)%,均P0.05)。结论:成功设计并制备了一种双靶点CAR-19-22-T细胞,其能够有效杀伤表达CD19和/或CD22抗原的肿瘤细胞,对Raji-Luc细胞的白血病模型小鼠有显著的治疗效果。

摘要：目的了解某省二级及以上医疗机构导管相关血流感染(CRBSI)预防与控制实施现状,为医疗机构采取有效措施落实最佳证据,降低CRBSI提供参考依据。方法依据《血管导管相关感染预防与控制指南(2021版)》自行设计调查问卷,于2021年7月对某省二级及以上医疗机构CRBSI防控现状进行调查。结果共回收问卷87份,有效问卷79份,有效回收率90.8%。79所医疗机构的CRBSI监测工作(89.9%)和防控制度的制定(94.9%)基本落实,但制度更新滞后,仅78.7%予以更新。68.4%的医院关注了本院近3年的CRBSI发病率,关注中心静脉导管(CVC)、经外周静脉置入中心静脉导管(PICC)、透析导管相关感染发病率的医院较少,最低仅占38.9%。置管前评估(100%)和置管时置管者无菌操作技术(≥97.5%)落实较好。CRBSI防控指南落实的四个薄弱环节:仅有3.8%的医院选用含洗必泰醇浓度>0.5%的消毒剂进行皮肤消毒,54.4%的医院紧急状态下置管不能保证有效无菌操作技术时未在2 d内拔管,43.0%的医院存在病房内置管现象,43.0%的医院在使用导管输血后未在4 h内更换附加装置;26.6%的医院表明重症监护病房(ICU)是CRBSI发病率最高的科室。结论目前临床上CRBSI防控措施的落实与指南有一定差距,建议医务人员加强对最佳实践标准的认识,切实遵照指南落实感染防控工作,最大限度降低CRBSI的风险。

摘要：目的了解社区慢性心力衰竭人群现状特点,依据人群特点制定慢性心力衰竭社区管理方法,同时探讨社区管理能否使患者获益,以期为慢性心力衰竭的综合防治提供新思路。方法选取2012年3—4月长沙市浏府街社区自愿参与调查的慢性心力衰竭患者288名,采用自行设计的问卷调查该社区心力衰竭人群特点;另选取2012年5月—2013年5月该社区自愿参加慢性心力衰竭社区疾病管理的患者200名,采用自行设计的系统的慢性心力衰竭社区疾病管理方法,对其药物治疗、健康教育、生活方式、自我管理等进行干预,观察干预前后患者基本指标控制情况、心力衰竭常规药物使用率、心力衰竭知识知晓率、自我管理情况、明尼苏达生活质量(MNLF)评分、再住院次数、心血管事件发生率等。结果 (1)共发放调查问卷288份,回收279份,回收率为96.88%,有效问卷274份,有效率为98.21%,患者平均年龄为(68.7±10.6)岁;MNLF评分为(22.13±14.64)分;低盐低脂饮食率68.61%(188/274);定期测量血压率41.97%(115/274);高血压控制率为35.40%(97/274);主动随诊率为25.18%(69/274);主动健康教育率为8.03%(22/274)。(2)干预后,患者心率控制率、血压控制率均高于干预前(P0.05)。干预前,患者血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)/血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(ARB)使用率、β-受体阻滞剂使用率、慢性心力衰竭知识知晓率、低盐低脂饮食率、戒烟率、定期测量血压率、定期测量脉搏率均低于干预后(P<0.05)。通过绿色通道就诊者31例,双向转诊者5例,家庭随访者5例。结论慢性心力衰竭社区疾病管理能使患者获益,是一种值得提倡的管理模式。

摘要：目的肝癌衍生生长因子(HDGF)是近年来逐渐引起重视的一种细胞生长因子,在许多肿瘤细胞中高表达。本研究拟构建RNAi干扰慢病毒载体,沉默HDGF基因在大肠癌SW480细胞中的表达,观察细胞的增殖状态。方法RT-PCR方法检测HDGF基因在大肠癌中的表达。利用Invitrogen公司在线网站设计HDGF干扰序列,片段合成后构建慢病毒RNAi表达载体,随后利用293FT细胞将其包装成成熟慢病毒颗粒去感染SW480细胞,经Blasticidin抗性选择培养后,建立了稳定表达HDGFsiRNA的SW480细胞株。实时荧光定量PCR和Western Blot检测HDGF基因在mRNA和蛋白水平表达变化;生长曲线和MTT法观察细胞增值情况的改变。结果HDGF基因在大肠癌SW480细胞中表达较高。成功的构建了HDGF慢病毒RNAi表达载体,并建立了稳定表达靶向干扰HDGF基因表达的siRNASW480细胞株。沉默HDGF基因在表达后,能明显体外抑制细胞的增殖。结论针对HDGF基因的慢病毒RNAi载体能明显下调HDGF基因的表达,并在体外显著抑制大肠癌细胞增殖能力。

摘要：目的了解护生对血液传播疾病的认知、态度与实践行为等,为健康教育、职业防范及控制血液疾病传播提供科学依据。方法采用目标抽样方法,自行设计问卷调查表,从某院定点20所高校护理系实习生中随机抽取357人作为调查对象进行调查。结果护生对经血液传播疾病的了解不全面,存在不安全行为,应加强护生对经血液传播疾病相关知识的培训及健康教育。结论护生对血液传播疾病有一定认识,但不够准确和全面。有必要开展血液传播疾病的知识培训。

摘要：目的:探讨妊娠期糖尿病(GDM)患者的自我管理行为、自我效能的现况及两者之间的相关关系。方法:采用自行设计的一般资料调查问卷、糖尿病自我管理行为量表及糖尿病自我效能量表对167例GDM患者进行问卷调查。结果:167例GDM患者的自我管理行为总得分率为66.49%,属中等偏低水平,各维度得分率由高到低依次为膳食节制、运动锻炼、高低血糖处理和血糖监测;自我效能总得分率为72.98%,属中等水平,各维度得分率由高到低依次为病情控制、饮食控制、运动锻炼和血糖监测;自我管理行为及其各维度与自我效能及其各维度均呈正相关关系(P<0.05)。结论:GDM患者自我管理行为水平、自我效能水平有待提高,自我管理与自我效能相辅相成,护理人员可通过提高患者自我效能水平从而改善其自我管理行为状况。

摘要：背景低剪切力能诱导血管炎症反应,从而引起高血压的发生、发展。雌激素可以通过雌激素受体介导的途径调节免疫系统和炎症反应,对高血压具有保护作用。目的为了解女性高血压流行现状和影响因素,探究剪切力、雌二醇与女性高血压的相关性及在不同剪切力下雌二醇对高血压的影响,进而探究雌二醇与剪切力的交互作用对高血压的影响。方法选取2021年1—8月于湖南省人民医院心内科住院的纳入288例女性高血压患者作为病例组,并从湖南省人民医院体检科随机抽取296例女性非高血压体检者作为对照组。使用自行设计的问卷调查研究对象的一般资料,抽取研究对象清晨空腹静脉血进行实验室指标的检测,采用彩超多普勒进行血管彩超检查计算剪切力。采用多因素Logistic回归构建高血压预测模型并绘制列线图,绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线)评价高血压预测模型,对雌二醇进行四分组分层分析,探究不同剪切力二分组下各雌二醇分组对高血压发生的影响,利用相乘交互作用模型评价雌二醇和剪切力之间的交互作用。结果病例组与对照组年龄、受教育程度、BMI、绝经、高血压家族史、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、雌二醇、尿酸(UA)、肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、剪切力、血液黏稠度(WBV)比较,差异有统计学意义(P60岁〔OR=2.172,95%CI(1.361,3.468)〕、绝经〔OR=14.940,95%CI(1.938,115.176)〕、高血压家族史〔OR=1.614,95%CI(1.014,2.570)〕、BMI 24~28 kg/m^(2)〔OR=3.454,95%CI(2.072,5.758)〕、BMI>28 kg/m^(2)〔OR=6.750,95%CI(2.380,19.146)〕、TG 1.30~1.83 mmol/L〔OR=1.980,95%CI(1.114,3.520)〕、TG>1.83 mmol/L〔OR=2.311,95%CI(1.308,4.082)〕、TC 4.29~5.12 mmol/L〔OR=2.222,95%CI(1.250,3.950)〕、TC>5.12 mmol/L〔OR=1.884,95%CI(1.062,3.341)〕、LDL-C>2.81 mmol/L〔OR=1.546,95%CI(1.150,2.078)〕、HDL-C>1.17 mmol/L〔OR=0.140,95%CI(0.065,0.301)〕、BUN>5.47 mmol/L〔OR=3.249,95%CI(2.380,4.434)〕、Scr>69μmol/L〔OR=1.166,95%CI(1.126,1.207)〕、UA>324μmol/L〔OR=1.040,95%CI(1.029,1.050)〕、WBV4.41 mPa·s〔OR=3.456,95%CI(2.557,4.671)〕、雌二醇10.60~23.99 ng/L〔OR=0.005,95%CI(0.001,0.020)〕,剪切力>8.21 dyne/cm^(2)〔OR=0.033,95%CI(0.017,0.062)〕是高血压发生的影响因素(P8.21 dyne/cm^(2)人群中,雌二醇≥15.39 ng/L与高血压降低的关系更显著〔OR=0.012,95%CI(0.005,0.019),P<0.05〕。结论雌二醇≥10.60 ng/L是高血压的保护因素;在低剪切力下雌二醇对高血压的保护作用更大;剪切力与雌二醇对高血压具有相乘交互作用。

摘要：目的:探索Mirror形体设计软件在下颌骨整形的应用优势。方法:将95例面部轮廓整形的患者随机分为设计组和对照组两组,应用Mirror形体设计软件对设计组患者进行术前形态分析设计、模拟术后形态,并对比测量出改变数据,对照组患者直接进行手术而不使用Mirror形体设计软件,对比两组患者术后医患满意率的差别。结果:应用Mirror形体设计软件进行术前分析设计的设计组患者,其医患满意率大于未使用设计软件的对照组患者,差别有统计学意义。结论:通过应用Mirror形体设计软件能很好的对患者形态进行测量分析,并模拟出术后形态,达到医患理想要求,并通过改变数据来指导手术进行,本系统能够加强医患之间的交流,对容貌进行定量分析诊断,使整形手术更加精准完美。