摘要：目的建立一种特异、敏感、快速地检测致腹泻肠道腺病毒F亚属的巢式PCR方法,了解引起肠道致腹泻感染中腺病毒的携带情况。方法根据腺病毒F亚属基因编码序列,设计一对通用引物扩增靶基因片段,扩增后片段长度为520 bp,另根据相对保守序列设计一对特异性的引物以第一次PCR扩增后的产物为模板,再进行PCR扩增,片段长度为300 bp。通过ABI3130基因检测仪来评价该方法的特异性;对腺病毒模板做10倍比系列稀释后进行巢式PCR检测,并对其敏感性进行分析,对PCR扩增产物进行电泳和测序鉴定。结果肠道致腹泻肠道感染中通过巢式PCR扩增反应可检出腺病毒F亚属,通过基因序列测定证实了PCR产物的特异性;在敏感性检测中PCR检测肠道腺病毒模板的下限为2.08×10-4μg/ml。结论本研究建立了一个快速、特异、敏感的肠道腺病毒PCR检测方法,适用于流行病学调查及临床检测。

摘要：目的克隆奈瑟氏淋球菌外膜蛋白PIA基因,构建稳定的真核重组表达载体,并在HELA细胞中表达。方法根据淋球菌PIA基因序列,利用Primer Premier5.0生物学软件设计一对特异性扩增引物,以淋球菌国际标准株基因组DNA为模板,PCR扩增除掉信号肽后PIA基因开放读码框(ORF),将其插入真核表达载体pcDNA3.1(+),构建含目的基因的pcDNA3.1(+)/PIA重组质粒,PCR及酶切鉴定重组载体,脂质体转染HELA细胞,以间接免疫荧光法检测PIA基因在HELA细胞中的表达。结果成功构建了pcDNA3.1(+)/PIA重组质粒;pcDNA3.1(+)/PIA能在HELA细胞中高效表达PIA蛋白。结论重组质粒pcDNA3.1(+)/PIA构建成功并在HELA细胞中高效表达了PIA蛋白,为该蛋白的抗原性及功能学研究奠定了基础。

摘要：目的探讨新发晚期血吸虫病(晚血)发生的危险因素。方法在洞庭湖2个血吸虫病流行县,采用1:2配对病例-对照研究。选择2006-2007年新发现的腹水型和巨脾型晚血病人60例作为病例组;以配对条件选择120例慢性血吸虫病人作为对照组。设计包含晚血危险因素的问卷,采用面对面的调查方式收集信息。使用SPSS12.0软件进行晚血病人发生的单因素及条件logistic回归的危险因素分析。结果乙肝病史(OR=10.729)、接触疫水方式(OR=3.919)、年均接触疫水天数(OR=5.457)和近10年化疗次数(OR=1.578)4个因素为晚血发生的危险因素;血吸虫病查出次数为晚血发生的保护因素;未发现晚血与年人均收入、文化程度、晚血家族史、血吸虫病检查次数和血清学检查阳性次数5个因素的关联性。结论长期接触疫水、反复感染、未能及时检查诊断和治疗是晚血发生的关键因素,合并乙肝病毒感染可加速晚血的形成。