摘要：目的建立一种特异、敏感、快速地检测致腹泻肠道腺病毒F亚属的巢式PCR方法,了解引起肠道致腹泻感染中腺病毒的携带情况。方法根据腺病毒F亚属基因编码序列,设计一对通用引物扩增靶基因片段,扩增后片段长度为520 bp,另根据相对保守序列设计一对特异性的引物以第一次PCR扩增后的产物为模板,再进行PCR扩增,片段长度为300 bp。通过ABI3130基因检测仪来评价该方法的特异性;对腺病毒模板做10倍比系列稀释后进行巢式PCR检测,并对其敏感性进行分析,对PCR扩增产物进行电泳和测序鉴定。结果肠道致腹泻肠道感染中通过巢式PCR扩增反应可检出腺病毒F亚属,通过基因序列测定证实了PCR产物的特异性;在敏感性检测中PCR检测肠道腺病毒模板的下限为2.08×10-4μg/ml。结论本研究建立了一个快速、特异、敏感的肠道腺病毒PCR检测方法,适用于流行病学调查及临床检测。

摘要：目的发现湖南省农村社区人群犬伤的主要危险因素;根据主要危险因素提出防控措施建议,做好狂犬病预防控制工作。方法采用1∶1匹配的病例对照研究设计方法,通过文献搜索和预试验制订问卷,对研究对象开展问卷调查。应用1∶1匹配的病例对照研究资料处理方法进行单因素分析,用条件logistic回归进行多因素分析。结果有效调查共1 406人,单因素分析发现"职业为散居儿童"等20个影响因素关联差异有统计学意义(P<0.05),经条件logistic回归分析:"经常看见圈养、拴住或有人看管的狗"(OR=1.20,95%CI:1.02~1.42)、"在自己家里经常看见狗"(OR=1.23,95%CI:1.02~1.48)、"经常看见疯狗或疑似疯狗"(OR=1.31,95%CI:1.01~1.71)、"经常看见自家养或熟悉的狗"(OR=1.33,95%CI:1.04~1.68)、"在亲友邻居家经常看见狗"(OR=1.47,95%CI:1.12~1.92)、"触碰家养或熟悉的狗尾巴、腿、屁股等部位"(OR=1.44,95%CI:1.21~1.72)为犬伤的危险因素,"看见陌生狗靠近时采取防卫措施"(OR=0.48,95%CI:0.34~0.68)、"看见陌生狗会分辨疯狗流浪狗"(OR=0.78,95%CI:0.67~0.92)和"防范陌生狗"(OR=0.83,95%CI:0.70~0.99)为犬伤的保护因素。结论犬伤与多种危险因素有关,降低犬密度、减少与犬接触机会和避免触碰狗的尾巴等敏感部位、防范和防卫陌生狗可减少犬伤风险;开展狂犬病健康教育,提高农村社区居民对疯狗和疑似疯狗的分辨能力和防范意识,及时采取防卫措施,可降低犬伤风险。

摘要：目的克隆奈瑟氏淋球菌外膜蛋白PIA基因,构建稳定的真核重组表达载体,并在HELA细胞中表达。方法根据淋球菌PIA基因序列,利用Primer Premier5.0生物学软件设计一对特异性扩增引物,以淋球菌国际标准株基因组DNA为模板,PCR扩增除掉信号肽后PIA基因开放读码框(ORF),将其插入真核表达载体pcDNA3.1(+),构建含目的基因的pcDNA3.1(+)/PIA重组质粒,PCR及酶切鉴定重组载体,脂质体转染HELA细胞,以间接免疫荧光法检测PIA基因在HELA细胞中的表达。结果成功构建了pcDNA3.1(+)/PIA重组质粒;pcDNA3.1(+)/PIA能在HELA细胞中高效表达PIA蛋白。结论重组质粒pcDNA3.1(+)/PIA构建成功并在HELA细胞中高效表达了PIA蛋白,为该蛋白的抗原性及功能学研究奠定了基础。

摘要：目的探讨新发晚期血吸虫病(晚血)发生的危险因素。方法在洞庭湖2个血吸虫病流行县,采用1:2配对病例-对照研究。选择2006-2007年新发现的腹水型和巨脾型晚血病人60例作为病例组;以配对条件选择120例慢性血吸虫病人作为对照组。设计包含晚血危险因素的问卷,采用面对面的调查方式收集信息。使用SPSS12.0软件进行晚血病人发生的单因素及条件logistic回归的危险因素分析。结果乙肝病史(OR=10.729)、接触疫水方式(OR=3.919)、年均接触疫水天数(OR=5.457)和近10年化疗次数(OR=1.578)4个因素为晚血发生的危险因素;血吸虫病查出次数为晚血发生的保护因素;未发现晚血与年人均收入、文化程度、晚血家族史、血吸虫病检查次数和血清学检查阳性次数5个因素的关联性。结论长期接触疫水、反复感染、未能及时检查诊断和治疗是晚血发生的关键因素,合并乙肝病毒感染可加速晚血的形成。

摘要：目的分离人甲型H1N1流感病毒,探讨血凝素基因的生物学特征。方法采集流感患者鼻咽分泌物,MDCK细胞进行病毒分离,血凝抑制实验测定病毒滴度,提取病毒总RNA,设计特异性引物,RT-PCR扩增HA基因ORF开放阅读框cDNA,克隆到pUCm-T载体,转化大肠杆菌XL1-Blue,经蓝白斑筛选阳性克隆,PCR鉴定后进行基因序列测定,通过生物信息学软件对HA的基因组结构和生物学特征进行分析。结果通过MDCK细胞培养成功分离出人甲型H1N1流感病毒,并于接种后24 h出现CPE,第二代病毒培养物滴度为256;成功扩增出产物大小为1 701 bp的H1N1流感病毒HA基因;构建了pUCm-T/HA载体并测序成功;BLAST结果显示与A/California/04/2009(H1N1)病毒株核苷酸与氨基酸同源性均为99%,所分离的毒株包含20种566个氨基酸。结论甲型H1N1流感病毒的分离和HA基因的测序,为后续HA蛋白的功能学研究奠定了坚实基础。

摘要：目的探讨临床患者痰标本中分离的结核分枝杆菌rpoB基因突变与利福平耐药之间的关系。方法对115株结核分枝杆菌应用L-J药敏培养法,检测对利福平、异烟肼、乙胺丁醇、链霉素、氧氟沙星的耐药情况;根据rpoB基因序列设计包含利福平耐药决定区(RRDR)的扩增引物,PCR法进行扩增,运用生物信息学方法对耐药决定区扩增产物序列进行比对分析,对耐药株与非耐药株基因突变率进行统计学分析。结果 115株结核分枝杆菌经比例法药敏试验,RIF耐药株53株,占所有菌株的46.09%;53株RIF耐药株中39株rpoB基因存在不同位点的变异,突变率为73.58%,突变位点包括531、526、522、516、513、511,最主要的突变位点集中在531位,引起氨基酸呈Ser531Gln、Ser531Leu、Ser531Trp 3种形式改变;RIF敏感株62株,其中有2株检测到rpoB基因的突变,敏感株与耐药株突变率经McNemar统计检验,差异有统计学意义(P<0.05)。结论岳阳地区rpoB基因变异与利福平耐药呈高度相关,rpoB基因最主要的突变位点位于531位和526位。

摘要：目的对东洞庭湖出口洪道整治工程岳阳县麻塘大堤段水利血防工程灭螺效果进行血防效果评估。方法收集岳阳县2008～2017年东洞庭湖出口洪道整治工程设计资料和周边环境钉螺调查资料,结合现场调查综合评价其防治效果。结果工程实施前至2017年春季,麻塘大堤北闸沉螺池涵闸改造防螺工程实施后垸外洲滩钉螺密度下降94. 1%,沉螺池闸内及下游渠道钉螺降为0;麻塘大堤块石护坡防螺工程实施后垸外易感地带钉螺密度下降72. 0%,大堤护坡沿线钉螺降为0。两处血防水利工程实施后均未查出感染性钉螺。结论岳阳县东洞庭湖出口洪道整治工程防灭螺效果显著,各项指标达到血防要求,但工程实施后仍需加强工程维护与疫情监测。

摘要：目的探讨基于智能手机应用的健康教育能否降低学龄儿童及其家庭成员的盐摄入量。设计平行、整群随机对照试验,将学校随机分配到干预组或对照组(1∶1)。背景从2018年9月15日至2019年12月27日,在中国北部、中部和南部3个省份纳入54所小学。参与者592名小学3年级儿童[每所学校约11名儿童,其中308名(52.0%)男孩;平均年龄8.58岁(标准差0.41)],以及1184名成年家庭成员[其中551名(46.5%)男性;平均年龄45.80岁(12.87)]。干预在手机应用程序的支持下,对干预组中的儿童进行关于减盐的健康教育,并布置家庭作业,以带动全家参与减盐的相关活动。主要结局测量干预组和对照组在第12个月随访时盐摄入量(通过24小时尿钠排泄量测量)改变值的差值。结果基线调查后,来自27所学校的297名儿童和594名成年家庭成员被分配到干预组,另外27所学校的295名儿童和590名成年家庭成员被分配到对照组。在试验期间,由于儿童转到另一所学校或成年家庭成员无法参加随访评估,27名(4.6%)儿童和112名(9.5%)成年人失去随访。干预组其余287名儿童和546名成人,以及对照组的278名儿童和526名成人完成了12个月的随访评估。干预组儿童基线时的平均盐摄入量为5.5[标准差(SD)1.9]g/天,干预组成人10.0(SD 3.5)g/天,对照组儿童5.6(SD 2.1)g/天,成人10.0(SD 3.6)g/天。在研究期间,干预组和对照组儿童的盐摄入量均有所增加,但干预组增加的幅度较小[调整混杂偏倚变量后平均干预效果为-0.25 g/天,95%可信区间(CI):-0.61~0.12;P=0.18]。干预组和对照组成人的盐摄入量均有所下降,但干预组的盐摄入量变化更大(平均效果-0.82 g/天,-1.24~-0.40;P<0.001)。对儿童收缩压的平均效果为-0.76 mmHg(-2.37~0.86;P=0.36),成人为-1.64 mmHg(-3.01~-0.27;P=0.02)。结论采用儿童带动家长的方式,基于手机应用程序的健康教育可有效降低成人的盐摄入量和收缩压,但对儿童的效果并不显著。这种新颖的方法有可能被更大规模地推广,但在此之前方案需要进一步加强,才能减少包括学童在内的人群盐摄入量。试验注册中国临床试验注册ChiCTR1800017553。