摘要：背景:经骶骨前入路的经皮腰骶椎前柱内固定系统即Axia LIF先后在美国及欧洲应用于临床,取得较好的临床疗效,但是在应用过程中出现了如内固定下沉、内固定控制旋转能力较差等一系列问题。目的:根据国人腰椎侧位片及CT横断面测量的解剖数据自行设计腰骶椎轴向螺钉,制成成品后在体外生物标本上进行三维运动实验和轴向抗压缩实验,对其固定节段的稳定性及轴向抗压刚度进行生物力学评价。方法:选取新鲜成人脊柱标本(L3-S5节段)6具,按正常组、峡部裂组、普通轴向螺钉固定组、自行设计轴向螺钉固定组顺序依次进行生物力学测试,分别测试各实验组在屈伸、左侧屈、左旋转运动状态下L5/S1节段的运动范围及轴向抗压缩位移。结果与结论:(1)在三维运动实验中,峡部裂组的ROM在屈伸及左旋转方向上均显著大于正常组(P0.05);(2)普通螺钉固定组与自制螺钉固定组的ROM在屈伸、左侧弯方向上均显著小于正常组(P0.05),普通螺钉固定组与自制螺钉固定组间比较差异无显著性意义(P>0.05);(3)在1 000 N的轴向载荷压缩实验中,4组所产生的压缩位移差异有显著性意义(P普通螺钉固定组>正常组>峡部裂组;(5)提示自行设计轴向螺钉可以显著提高腰骶椎在后柱失稳情况下各个运动方向的稳定性,与普通轴向螺钉相当,但在轴向抗压刚度方面明显强于普通轴向螺钉,为在防止轴向螺钉固定脊柱节段沉降和前凸损失方面提供了一种有效的解决思路。

摘要：背景:表皮干细胞的研究有相当的成绩,但皮肤移植成活过程中表皮干细胞数量及在皮肤各层中的分布动态变化规律尚需探讨。目的:观察自体全层皮肤移植成活过程中表皮干细胞随其所处微环境的改变及其变化规律。设计:对比观察的前瞻性动物实验。单位:南华大学第一附属医院烧伤整形外科。材料:选用南华大学实验动物中心提供的Wistar大鼠42只,2～3月龄,清洁级,雌雄不拘,体质量200～250g。饲养1周后按观察时间随机分为7组,术后24h组,3d组,5d组,7d组,14d组,21d组和30 d组,每组6只。抗体:一抗:兔抗鼠整合素β1多克隆抗体(武汉博士德生物公司)小鼠抗大鼠p63单克隆抗体(santa cruz公司);二抗:山羊抗兔IgG(北京中杉生物公司),山羊抗小鼠IgG(北京中杉生物公司);S-P免疫组化试剂盒和DAB显色试剂盒(北京中杉生物公司)。方法:实验于2006-05在南华大学动物实验室完成。①所有大鼠背部制作(1.5x1.5)cm2面积的自体全层皮肤移植模型,在不同时间点观察移植皮片的颜色改变,移植皮片下是否有积血、积液,皮片是否与创面粘合。②每只大鼠手术时切取少许皮片立即放入100g/L中性甲醛中固定并标记为空白对照组。③术后24h组,3d组,5d组,7d组,14d组动物分别在相应时间拆开移植皮片固定包,在各创面中央切取皮肤组织固定并标记;术后21d组和30d组术后14d拆包,继续喂养至术后21d和30d在移植皮片中央切取皮肤组织。④制作HE染色和免疫组织化学染色病理切片。主要观察指标:①切片中炎症细胞的数量、上皮化程度、纤维细胞的含量。②整合素β1和基因物质p63阳性细胞率。结果:纳入Wistar大鼠42只全部进入结果分析。①创面大体观察:术后一二天颜色苍白、水肿;术后3d皮片颜色未见有明显的好转,但皮片与创面贴附较紧密;术后7d皮片颜色明显好转,表皮颜色接近正常,皮片与创面粘连紧密,创面有部分毛根长出;术后14d皮片创周已经和创面完全愈合;术后30d皮片颜色较正常稍微深,毛发生长同正常皮肤。②苏木精-伊红染色病理切片观察结果:前4组见皮片内细胞水肿,有少量炎性细胞浸润,术后5d发现皮片部分角质细胞坏死脱落。③阳性细胞的分布和数量变化规律:整合素β1和基因物质P63阳性细胞在术前主要分布于表皮的基底层和毛囊隆突部,从术后24h阳性细胞开始在表皮的各层出现,且数量逐渐增多,术后14和21d在表皮的各层均见到较多的阳性细胞,术后30d阳性细胞主要分布在表皮的基底层,但在其它各层仍然有少量的阳性细胞出现。免疫组化切片中基因物质P63的阳性细胞数均高于同时限点β1整合素的阳性细胞数,从术后24h开始减少,到术后3d达到最低点,然后逐渐增加,到术后7d阳性细胞的比例达到或接近术前,继续增加。术后21d时阳性细胞比例达到最高点,然后又逐渐减低,术后30d时阳性细胞比例仍高于术前。结论:①表皮干细胞在自体全层皮片移植成活过程中先减少,然后逐渐增加至超过正常皮肤。②自体全层皮肤移植成活过程中,表皮干细胞在皮肤中的排列紊乱,几乎在表皮各层均能见到表皮干细胞;而后又逐渐集中于表皮的基底层和毛囊隆突部。

摘要：背景:与正常生理性皮瓣相比,静脉皮瓣的主要优点在于摆脱了动脉血管分布区域对传统轴型皮瓣的供区与受区的限制,但其成活率不稳定。目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子-聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物(bFGF-polylactic-co-glycolicacid,bFGF-PLGA)缓释微球对兔静脉皮瓣成活的影响。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-05/10在南华大学完成。材料:健康新西兰大白兔24只,随机分为3组:bFGF-PLGA缓释微球组、空微球组、空白对照组,8只/组。方法:应用正交设计试验进一步优化碱性成纤维细胞生长因子微球的制备工艺,采用优化处方制备bFGF-PLGA微球。3组兔均制作侧腹壁静脉皮瓣,术前5d,bFGF-PLGA缓释微球组向皮瓣皮内注射28.85g/L优化处方后的bFGF-PLGA微球3mL(含碱性成纤维细胞生长因子20μg),空微球组同法注射同等质量空微球+等量碱性成纤维细胞生长因子混合溶液,空白对照组注射等量生理盐水。主要观察指标:考察bFGF-PLGA微球外观形态和粒径分布,检测其载药量、包封率、体外释药性质。术后7d检测皮瓣成活率,取兔皮肤标本行CD34+免疫组化染色,检测CD34+的表达及皮瓣内微血管密度。结果:所制微球表面光滑圆整,球体均匀度好,无粘连现象;微球粒径98%分布在12.50～43.49μm,平均粒径26.93μm,径距0.611±6.60;载药量为[(23.11±0.44)×10-3]%,包封率为(86.51±0.83)%;突释期内微球的体外释放度为27.78%,30d后体外累积释放度高达81.56%,微球的体外释药规律符合Higuichi方程(r=0.997)。空微球组、空白对照组的静脉皮瓣成活率及皮瓣内微血管密度基本相似(P=0.597,P=0.336),但均明显低于bFGF-PLGA缓释微球组(P=0.000)。免疫组化染色结果显示,bFGF-PLGA能够促进皮瓣与周围建立血供关系,改善皮瓣的成活,并表达较为丰富的CD34+。结论:应用W/O/W复乳-干燥法可成功制备表征良好、载药量和包封率高的bFGF-PLGA微球,该微球通过较长时间地持续释放活性碱性成纤维细胞生长因子,可明显促进兔静脉皮瓣的存活。

摘要：目的观察缺血再灌注损伤（IRI）对大鼠肝组织内细胞周期调控相关基因转录和表达的影响，探讨生长阻滞和DNA损伤修复基因（Gadd45a）和早期生长反应基因1（Egr-1）参与DNA损伤后修复的可能机制。方法按随机成组对照设计将大鼠平均分为正常对照组、缺血组、再灌注30min、1h、2h、3h及24h组，于相应时间点获取大鼠肝组织样本，将利用芯片实验筛选出的关键基因Gadd45a和Egr-1作为目的基因，并采用RNA印迹法和实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）验证基因芯片筛查的结果，采用荧光免疫组织化学染色检测冰冻新鲜肝组织样本Egr-1的表达，采用免疫组织化学染色检测肝组织样本Gadd45a的表达。结果RNA印迹检测结果显示，RT-PCR产物与待测的目标基因一致；表达谱芯片信号与RT-PCR的检测显示，目的基因的表达变化特征均为再灌注早期（1h）升高4倍以上，其中Egr-1的表达上调9．39倍，Gadd45a的表达上调8．28倍及热休克蛋白70—1a的表达上调10．8倍；再灌注后24h均降至正常水平，芯片初筛结果与RT-PCR的检测结果一致，是准确、可靠的。荧光免疫组织化学检测显示，再灌注1h组和2h组肝组织细胞核Egr-1的表达均为阳性；免疫组织化学检测显示，随着再灌注时间的增加，细胞核和细胞浆内Gadd45的表达逐渐升高。结论Gadd45a和Egr-1基因均是核因子κB调控通路的关键基因，在大鼠肝脏IRI中参与调控了细胞周期G2／M期的停滞和修复受损的DNA。

摘要：背景:由于骺板在股骨的生长发育过程中有重要的作用,内固定的设计要求尽量避免对骺板的损伤,因此对儿童股骨骺板的定位显得尤其重要。目的:探讨新型儿童股骨颈螺钉固定儿童股骨颈骨折的生物力学性能。方法:由南华大学解剖室提供的6具儿童尸体上取下股骨12根,X射线排除骨病后,分别采用3枚新型儿童股骨颈螺钉固定;3枚2.0 mm克氏针固定。分别进行生物力学实验,测试其轴向压缩、扭转刚度。结果与结论:轴向压缩刚度及最大3 N·m的扭转力矩下扭转刚度,儿童股骨颈螺钉分别为(190.74±20.88)N/mm、(0.18±0.045)N·m/(°),克氏针为(138.95±15.19)N/mm、(0.120±0.036)N·m/(°),两者比较差异均有显著性意义(P<0.05);显示儿童股骨颈螺钉的抗压能力和抗扭能力上明显强于克氏针。实验说明儿童股骨颈螺钉是一种符合儿童股骨近端解剖学特点,能够满足儿童股骨颈骨折需要的新型内固定器械,具有良好的生物力学性能。

摘要：近年来,腰椎后路动态内固定技术的研发及应用发展迅速,其种类繁多,主要包括动态内固定器械的设计及新材料的应用,但绝大多数需行开放手术.与传统开放减压植骨融合固定术比较,微创减压附加非融合固定的Hybrid手术日益得到重视.笔者针对几种可经皮微创置入的腰椎后路动态内固定技术综述如下.

摘要：背景:功能性水凝胶是一种新型的生物材料,作为伤口敷料必须通过生物学评价系列标准进行全面检测,证明材料具有良好的生物相容性后方可应用于临床。目的:对新型伤口敷料聚乙烯醇明胶酯化水凝胶的生物组织相容性进行评价。设计、时间及地点:材料学实验,于2008-04/2009-06在南华大学公共卫生学院中心实验室完成。材料:NCTCL-929小鼠成纤维细胞株由中山大学医学院细胞库提供。实验所用动物均由南华大学动物部提供。聚乙烯醇、明胶由广东省化学试剂工程技术研究开发中心提供。方法:将10g聚乙烯醇在100mL水中完全溶解后,70℃加入5g明胶,使其分散均匀,然后加入盐酸充分搅拌,进行酯化反应。将分散液浇注到模具中转化为膜状物,制成厚度为1mm的圆形薄片。按照国家标准GB/T16886的评价要求,对聚乙烯醇明胶酯化水凝胶进行细胞毒性试验、溶血试验、全身急性毒性试验和致敏试验。主要观察指标:聚乙烯醇明胶酯化水凝胶的生物组织相容性。结果:聚乙烯醇明胶酯化水凝胶浸提液的细胞毒性反应为0～1级;溶血率未超过5%;注射聚乙烯醇明胶酯化水凝胶浸提液后,小鼠无死亡、惊厥、瘫痪、呼吸抑制、腹泻和体质量下降等不良反应发生;观察72h,小鼠脊柱两侧皮肤未出现红斑、水肿等刺激反应。结论:聚乙烯醇明胶酯化水凝胶伤口敷料具有良好的组织相容性,是一种可用于临床的生物材料。

摘要：背景：选择合适的吻合材料可提高气管、支气管重建的成功率，减少吻合口瘢痕狭窄。国内目前常用的缝合材料为丝线、涤纶线和人工合成吸收缝线，3种材料中哪种更加有助于预防和减轻术后瘢痕肉芽增生与管腔狭窄尚缺乏相关实验证据。目的：以常用的丝线、涤纶线和人工合成吸收缝线作为缝合材料，创新性开展了3种材料对兔气管切开后吻合口组织病理变化及转化生长因子β1表达影响的观察比较。设计、时间及地点：随机对照动物实验，病理组织学观察，于2005-09/2006-10在南华大学动物实验部完成。材料：人工合成可吸收缝线购自巴西强生专业产品有限公司。缝合丝线、涤纶线分别购自杭州富阳医用缝合针线厂及杭州华威医疗用品有限公司。方法：体质量1.6~2.0 kg健康成年新西兰大白兔36只，雌雄不限，随机抽签法分为丝线组、涤纶线组和人工合成吸收缝线组，每组12只，分别选用丝线、涤纶线、人工合成吸收缝线进行气管切开后端端吻合。主要观察指标：术后1，2，4周观察吻合口组织病理学变化及转化生长因子β1表达。结果：36只兔全部进入结果分析。术后1，2周3组吻合口愈合状态无明显差别，均有大量炎症细胞浸润，以中性粒细胞为主，集中在缝线周围，并出现灶性出血，缝线形成异物肉芽肿。术后4周，丝线组、涤纶线组均有缝线残留形成异物肉芽肿形成，并有明显纤维组织增生，人工合成吸收缝线组缝合线已基本吸收。与术后1，2周比较，术后4周，丝线组、涤纶线组转化生长因子β1表达降低，但差异无显著性意义；人工合成吸收缝线组降低明显（P 〈 0.05）。结论：3种缝合材料中人工合成吸收缝线组织相容性好，可有效减少手术刺激引起炎症反应的量和程度，更加有助于预防和减轻术后瘢痕肉芽增生和管腔狭窄。

摘要：背景:以往的三维有限元研究多集中在成人骨科生物力学方面。目的:以三维有限元方法分析儿童股骨近端解剖钢板固定股骨转子下骨折的生物力学性能。方法:从6具儿童尸体上取股骨12根,X射线排除骨病后分为2组,实验组采用儿童股骨近端解剖钢板固定,对照组采用重建钢板固定。分别进行生物力学实验,测试其轴向压缩、扭转刚度、弯曲刚度。选取1名健康男性儿童进行螺旋CT扫描技术,获得股骨近端图像数据,建立儿童股骨近端三维有限元模型,并进行三维有限元力学分析。结果与结论:在轴向压缩刚度、扭转刚度上儿童股骨近端解剖钢板与重建钢板两者比较差异无显著性意义(P>0.05);在抗弯曲刚度上,两者相比差异有显著性意义(P<0.05)。结果显示儿童股骨近端解剖钢板的抗压能力、抗扭能力上与重建钢板相当,而在抗弯曲能力上强于重建钢板。生物力学三维有限元分析显示儿童股骨近端解剖型钢板的设计符合生物力学原理,具有较好的强度、刚度和稳定性,能够满足对儿童股骨近端骨折固定的需要。儿童股骨近端解剖型钢板对固定股骨转子下骨折具有良好的生物力学性能。

摘要：背景:过氧化物酶体增殖物激活受体γ是细胞分化重要的调控因子,通过调节其他转录因子的表达,参与调节骨髓间充质干细胞的分化。目的:构建pEGFP-N1-过氧化物酶体增殖物激活受体γ真核表达载体,体外转染兔骨髓间充质干细胞,为过氧化物酶体增殖物激活受体γ受体功能和基于过氧化物酶体增殖物激活受体γ受体靶点的药物筛选提供分子研究平台。设计、时间及地点:单一样本观察,于2007-09/2008-07在南华大学附属一医院临床研究所完成。材料:选择雄性2～5月龄新西兰大白兔,用于分离培养骨髓间充质干细胞。方法:应用密度梯度离心法分离骨髓间充质干细胞,贴壁法不断纯化。从正常小鼠的肝组织中提取总RNA,反转录-聚合酶链反应法获得过氧化物酶体增殖物激活受体γcDNA,经XhoⅠ,ApaⅠ双酶切,定向克隆到真核表达载体pEGFP-N1,构建重组质粒pEGFP-N1-过氧化物酶体增殖物激活受体γ。主要观察指标:经酶切分析和测序鉴定重组质粒中过氧化物酶体增殖物激活受体γ基因的完整性和真实性,脂质体介导下体外转染骨髓间充质干细胞,荧光倒置显微镜下观察瞬时表达及转染效率,提取总RNA和总蛋白,进行反转录-聚合酶链反应和Westernblot检测。结果:获得的过氧化物酶体增殖物激活受体γ基因片段经酶切和测序鉴定正确,重组质粒经酶切和测序鉴定证实构建正确,成功转染骨髓间充质干细胞,在其中检测到目的基因及蛋白表达。结论:实验成功构建了pEGFP-N1-过氧化物酶体增殖物激活受体γ重组质粒,同时在转染的骨髓间充质干细胞中获得了过氧化物酶体增殖物激活受体γ的高效表达。