摘要：目的:应用半巢氏聚合酶链式反应(PCR)技术检测临床分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)主动外排系统qac基因,了解qac基因的存在状况。方法:根据MRSA主动外排系统qacA和qacB基因序列设计引物,采用半巢氏PCR法对中南大学3所附属医院2006年8月至2008年3月临床分离的80株MRSA分别扩增qacA/B和qacB基因,并进行序列分析。结果:在80株受检MRSA中,检出qacA/B基因19株,检出率23.75%;qacB基因18株,检出率22.5%。序列分析显示,qac基因与qacA的参考序列(X56628)98%相同,与参考序列qacB(AF535087)97%相同。结论:半巢氏PCR法可成功检测MRSA的主动外排系统qac基因。qac基因阳性株在临床分离的MRSA中占有较高的比例,可能与其多重耐药有关。

摘要：在20世纪70年代末,在国际上几乎同时出现了2个最有影响的试验设计方法,即西方流行的拉丁超立方体抽样(latin hypercube sampling)和我国统计学家方开泰提出的均匀设计(1978年).与正交设计相比,均匀设计放弃了试验的"整齐可比"性,而是让试验在其试验范围内,充分地"均匀分散",试验次数因而大幅减少[1].

摘要：向结肠癌SW480细胞中导入针对Survivin基因的siRNA,研究RNA干扰对SW480细胞增殖和凋亡的影响,为结肠癌的基因治疗提供实验依据,同时寻求新的、有效的RNA干扰片段。设计3条特异性干扰靶向Survivin基因的siRNA,转染24,48,72h后,Western蛋白印迹法检测Survivin蛋白变化,同时噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖。3条siRNA分别作用于SW480细胞,转染24,48,72h后,3组Survivin蛋白表达均出现下调(P<0.05),在48h时达到顶峰,抑制率分别为66.5%±2.1%,49.6%±2.8%和47.8%±3.1%,差异具有统计学意义(P<0.05);MTT法显示Survivin基因沉默后,细胞增殖受到明显抑制。脂质体所介导的体外SurvivinsiRNA,能有效地沉默结肠癌细胞的Survivin基因,从而抑制结肠癌细胞的增殖和促进细胞的凋亡,特别是针对保守区域设计的靶向siRNA,干扰效果更为显著。

摘要：目的 :设计靶向端粒酶逆转录酶(telomerase reverse transcriptase,h TERT)的mi RNA表达框架,探讨其对h TERT的表达、端粒酶活性及K562增殖的影响,以期为慢性髓系白血病提供新的基因治疗策略。方法:构建靶向h TERT的mi RNA表达框架,脂质体法转染K562细胞,银染法及荧光定量PCR法检测端粒酶活性及h TERT的表达情况。Annexin V/PI双染检测细胞凋亡。结果:mi RNA表达框架转染48 h后,h TERT的表达明显下降,端粒酶活性明显减低,K562细胞凋亡率增加。结论:靶向h TERT的mi RNA表达框架能够有效干扰h TERT的表达,抑制端粒酶活性,诱导K562细胞的凋亡。以mi RNA表达框架为基础的RNAi技术,有望成为分子水平治疗慢性髓系白血病的有效工具。

摘要：目的:构建针对h TERT基因的人工mi RNA表达框架,并验证其对Hep G2细胞端粒酶活性的抑制作用。方法:应用融合PCR技术针对不同位点设计并构建3个靶向h TERT的人工mi RNA表达框架,对各表达框架鉴定后,将其单独或两种共转染Hep G2细胞,采用TRAP-银染法和TRAP-二聚体蝎形探针荧光定量PCR法检测细胞端粒酶活性。结果:3个针对h TERT基因的人工mi RNA表达框架均成功构建,单独或共转染Hep G2细胞后,Hep G2细胞的端粒酶活性均被不同程度的抑制,且两种表达框架共转染的抑制作用明显大于单独转染,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:靶向h TERT基因的人工mi RNA表达框架能有效而特异抑制Hep G2细胞端粒酶活性,多位点联合抑制是一种有效的实验方案。

摘要：为了探索“病原生物学与免疫学”精品在线开放课程的建设与实践,提升课程的教学效果和教学质量,本研究利用在线开放课程,把“病原生物学与免疫学”需要掌握的知识点通过视频、动画、图片等多元化方式展现给学生,采取多样化的教学手段和方法开展教学,通过多元化的评价方式评估学习效果,有效培养医疗卫生人才。围绕“以学生为中心”的基本理念,基于临床传染病病原体的特点及人体免疫的过程,组建了“病原生物学与免疫学”在线开放课程建设团队,确定了课程建设思路,完成了线上课程资源制作,优化了课程设计,构建了混合式教学模式。“病原生物学与免疫学”在线开放课程的建设,拓展了课堂教学方式,提升了学习者学习乐趣,激发了学习者学习的主观能动性,有利于学生更好地掌握知识。

摘要：为研究前动力蛋白1(PROK1)对结直肠癌细胞增殖与迁移的作用机制,设计合成3条针对PROK1基因的靶向干扰序列,采用荧光显微镜观察干扰片段的转染情况,实时荧光定量PCR分析靶向干扰PROK1基因后PROK1 mRNA下调的表达水平,采用MTT、平板克隆形成试验、transwell迁移实验检测敲除PROK1后对HT29细胞增殖和迁移的影响。结果显示:荧光标记的Cy3-siRNA成功转染到HT29细胞中;3条靶向PROK1基因siRNA-62、siRNA-341、siRNA-1121转染HT29细胞48 h后,沉默效率分别为35%、70%、50%;与阴性对照组相比,siRNA-341组细胞增殖明显被抑制,24 h抑制最显著(p<0.01);siRNA-341组的细胞克隆形成率(19.3±1.989 9)与空脂质体对照组(30.3±3.780 6)和阴性对照组(32.3±2.404 1)相比显著减少(p<0.05);siRNA-341组通过小室迁移的细胞数(76±9.539 3)与空脂质体对照组(212±2.645 7)和阴性对照组(193±7.539 8)相比明显减少(p<0.01)。本研究发现PROK1基因促进结直肠癌细胞的增殖和转移,PROK1基因有望成为治疗结直肠癌潜在的靶位点。

摘要：目的建立一种检测甲型H1N1、季节性H1N1、H3N2与乙型流感病毒的SYBR GreenⅠ实时荧光PCR方法。方法设计针对甲型H1N1、季节性H1N1、H3N2与乙型流感病毒HA基因的引物,分别进行SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR反应,同时进行熔解曲线和Tm值分析,并作灵敏度和重复性试验。结果该方法与H5、H7、H9亚型流感病毒及副流感病毒1、2、3型均无交叉反应。构建的荧光定量标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,扩增效率为:95.588%,检测灵敏度为101copies/反应体系,结果重现性好。成功地验证性检验了32份盲样标本。结论本研究建立的SYBR GreenⅠ实时荧光PCR方法敏感、不需荧光标记探针、成本低及高通量,能用于人类流感病毒的分型检测。

摘要：撰写毕业论文是我系根据医学检验专业的特点设计的 ,从88级学生就开始要求毕业学生在毕业实习中撰写毕业论文,在提高教学质量、培养学生科研思维等方面收到了较好的效果.

摘要：撰写毕业论文是我系根据医学检验专业的特点设计的教学活动 ,从 1988级学生开始就要求学生在毕业实习中撰写毕业论文 ,在提高教学质量。