摘要：目的:研究慢病毒介导的PLK1(Polo-like kinase1)基因RNAi对食管鳞癌细胞侵袭转移的影响.方法:利用RT-PCR和Western blot检测不同食管鳞癌细胞中PLK1的表达.根据人PLK1mRNA序列设计干扰片段,Western blot检测干扰效率;利用划痕愈合实验及Transwell实验研究靶向PLK1的RNAi对食管鳞癌细胞体外侵袭转移能力的影响.将有效干扰序列构建至慢病毒干扰载体pGLV/H1/GFP+Puro中,测序鉴定.重组慢病毒载体与包装质粒共转染293T细胞包装病毒,制备的重组病毒感染食管鳞癌细胞,利用荧光定量PCR和Western blot检测干扰效率;利用裸鼠肺转移模型实验研究慢病毒介导的PLK1基因RNAi对食管鳞癌细胞在体内侵袭转移能力的影响.结果:筛选出一种高表达PLK1的食管鳞癌细胞株TE-8用于实验研究;筛选出有效的干扰片段,并成功构建靶向干扰PLK1基因的慢病毒载体,制备重组病毒颗粒用于感染食管鳞癌细胞;靶向PLK1的RNAi在体内外均能明显抑制食管鳞癌细胞的侵袭与转移.结论:靶向干扰PLK1基因的重组慢病毒能够抑制食管鳞癌细胞的侵袭与转移,PLK1基因影响着食管鳞癌的恶性进展.

摘要：背景:长期大量应用糖皮质激素可诱发股骨头坏死,其发病机制尚需深入研究。目的:通过兔股骨头坏死模型,应用光、电镜观察,从形态学角度探讨其发病机制。设计:随机对照观察。单位:潍坊医学院形态学实验室,病理学教研室,外科学实验室。材料:实验于2002-03/2003-03在潍坊医学院形态实验中心完成,成年新西兰白兔40只,随机分为生理盐水对照(10只)、氟美松组(10只)、马血清3组(20只)。方法:生理盐水对照组用生理盐水10mL/(kg·d)静脉注射,连续7d。氟美松组肌肉注射氟美松10mL/(kg·d),连续7d。马血清组静脉注射马血清10mL/kg,间隔3周,重复注射同量的马血清一次并连续7d肌肉注射氟美松10mL/(kg·d)。分别在第5周、第10周取实验动物的股骨头的软骨下区,用光镜、电镜观察组织学及超微结构变化。主要观察指标:①各组动物的组织形态学观察。②超微结构变化。结果:所有的实验动物均存活并纳入实验结果分析。①组织形态学观察:生理盐水对照组股骨头软骨下骨细胞排列规则,骨细胞体积小,呈扁椭圆形,胞体位于骨陷窝内,骨髓腔内血管分布均匀。氟美松,马血清两组股骨病变特征相似:骨髓腔内造血组织显著减少,脂肪组织明显增多;在股骨干骺端及软骨下区发现骨小梁萎缩,骨细胞核固缩,空骨陷窝数增多。②超微结构变化:生理盐水对照组正常骨细胞呈扁椭圆形,位于骨陷窝内。细胞核位于细胞一端,核膜完整,细胞质内线粒体丰富。氟美松,马血清两组电镜发现骨细胞内有脂滴,骨髓腔毛细血管狭窄,血管内皮细胞受损。结论:肾上腺糖皮质激素可诱发兔股骨头坏死,激素引起脂肪在骨髓腔内堆积,骨髓腔内压升高而导致股骨头缺血,诱发骨细胞坏死。