摘要：背景:异种脱蛋白松质骨因其来源广泛和独特的生物学特性有望成为较好的骨组织工程支架,其关键点为免疫原问题,如能解决免疫原问题,则有望开发出一种新型植骨材料。目的:通过理化方法制备脱蛋白松质骨,对其结构、组成及生物安全性能进行分析,探讨异种脱蛋白松质骨作为骨组织工程载体可行性。设计、时间及地点:对比观察实验,于2008-02/2009-01在黑龙江省纤维化生物治疗重点实验室完成。材料:取成年猪和山羊股骨远端松质部分,1∶1氯仿甲醇液脱脂、体积分数30%H2O2脱蛋白,制得脱蛋白松质骨。方法:①通过红外光谱仪、X射线衍射分析仪、氨基酸分析仪、力学测试仪进行载体性能测试。②取第3代人髂骨骨髓间充质干细胞调整浓度为2×108L-1细胞悬液,接种到载体至饱和,倒置显微镜和扫描电镜观察种子细胞黏附及生长增殖情况。③40只BALB/C小鼠随机分为实验组和对照组,每组20只。分离小鼠股后肌肉制成肌袋,实验组植入猪脱蛋白松质骨,对照组直接缝合。术后1,2,4,8周检测分析血清肌苷、谷草转氨酶、谷丙转氨酶水平。④采用免疫酶组织染色方法分析猪脱蛋白松质骨和植入小鼠体内4周脱蛋白松质骨标本的免疫原性。主要观察指标:体外实验分析脱蛋白松质骨理化性能、免疫原性。动物实验分析生物安全性能。结果:脱蛋白松质骨载体无机成分主要是与人骨天然成分相同的羟基磷灰石,经过一系列处理后,胶原蛋白并没有被脱除,这种结构保持了较好的力学性能。脱蛋白松质骨由于脱除了主要的免疫原性物质,其免疫原性较弱,毒性低。人骨髓间充质干细胞接种于载体后生长分化良好。结论:异种脱蛋白松质骨是一种良好骨组织工程载体。

摘要：背景:研究证明脱蛋白松质骨具有良好的孔隙结构、生物可降解性和力学特性,但是应用于临床还要考虑其安全性。目的:观察异种脱蛋白松质骨支架与经诱导骨髓间充质干细胞的相容性以及对其生物学行为的影响。设计、时间及地点:体外观察实验,于2008-02/10在黑龙江省纤维化生物治疗重点实验室完成。材料:取成年猪新鲜股骨远端松质部分,初制为3cm×0.5cm×0.5cm大小。抽取山羊髂骨骨髓,梯度密度离心法分离提纯骨髓间充质干细胞,传至第2代时换含1×10-7mol/L地塞米松、1×10-2mol/Lβ-甘油磷酸钠、100mg/L维生素C的培养液进行成骨诱导。方法:无菌条件下将支架材料置入6孔板内,每孔1块,重复3孔。调整细胞悬液浓度为2×109L-1,向每块支架滴加细胞悬液1mL,培养5h后将骨块翻面后沿6孔板内壁缓慢加入诱导培养液10mL。另3孔接种相同数量细胞单纯培养做对照分析。主要观察指标:倒置相差显微镜下观察细胞贴附及基质分泌情况,MTT法分析种子细胞与支架复合培养1,3,5,7d后的存活和增殖能力,复合培养1,3,5,7d后检测碱性磷酸酶活性,流式细胞仪分析复合培养7d后细胞周期、DNA倍体水平及细胞凋亡率。结果:复合培养3d时接种于支架上的细胞在孔隙内表面贴壁生长,并分泌较多的细胞外基质,复合培养5,7d,细胞基质分泌旺盛,几乎充满支架孔隙。在各个时间点复合材料组骨髓间充质干细胞增殖峰值高于单纯培养组,但差异无显著性意义(P>0.05)。复合材料组倍增时间为3d,单纯培养组为3.15d。各时间点两组碱性磷酸酶活性差异无显著性意义(P>0.05)。两组细胞周期大致相同,未见异倍体细胞。结论:异种脱蛋白松质骨与骨髓间充质干细胞有良好的细胞相容性并促进细胞生长分化。

摘要：背景:异种脱蛋白松质骨来源广泛且具有独特的生物学特性,若能解决其免疫原问题,将有望利用异种脱蛋白松质骨开发出一种新型植骨材料。目的:探讨异种脱蛋白松质骨作为骨组织工程支架的性能,及其在山羊脊柱横突间融合中的作用。设计、时间及地点:细胞-支架学体内实验,于2008-02/10在黑龙江省纤维化生物治疗重点实验室完成。材料:6～8月龄健康雄性山羊12只,由牡丹江医学院动物中心提供。方法:取成年猪股骨远端松质部分,通过理化方法制成脱蛋白松质骨支架,对其形态结构、组成成分、生物力学特性以及材料对种子细胞生物学行为的影响进行检测分析。羊髂骨穿刺取骨髓,梯度密度离心法分离获得第3代骨髓间充质干细胞。将支架材料复合一定量的自体骨髓间充质干细胞、重组人骨形成蛋白2构建组织工程骨。12只羊建立L3、4双侧横突间植骨模型,修复组于左侧植入组织工程骨,对照组于右侧植入相同体积的自体髂骨。主要观察指标:分别于植入后4,8,12周行X射线片和组织学观察对比分析。结果:采用脱蛋白处理后的松质骨可见大小不等、相互交通、开放孔隙的网架结构,孔径200～500μm,孔隙率60%左右,其无机成分为羟基磷灰石,有机成分为胶原,力学性能保存良好,细胞相容性良好。X射线片结果显示:植入第4周,横突桥接处部分区域模糊,以内侧明显,此时修复组材料密度略低于对照组;第8周上下桥接部间隙变小,大量连续骨痂生成;12周后完全融合,两组材料密度接近。移植区组织学观察结果显示:修复组植入后第4周以多点方式形成新骨,第8周岛状生成的骨组织贯穿整个移植材料,12周编织骨交错排列,髓腔形成,成骨活性接近自体髂骨移植;对照组植入后4周有较多新骨形成,8周时出现大量胶原纤维,周边成骨明显,至12周纤维组织减少,成骨活跃。结论:以异种脱蛋白松质骨为支架材料,复合骨髓间充质干细胞、重组人骨形成蛋白2构建组织工程骨,体外X射线衍射分析及力学测试与体内成骨实验均证明其具有良好的组织相容性和较强的成骨能力,是一种良好的组织工程骨支架材料。

摘要：目的探索对分课堂与项目式教学模式在医学英语教学中的有效融合。方法选取2019年7月至2020年7月牡丹江医学院外语教研部医学专业两个班级学生作为研究对象进行回顾性分析,按照教学模式不同分为观察组(n=60)和对照组(n=60),观察组给予对分课堂融合项目式教学模式,对照组给予常规教学模式。比较两组学生考核成绩、评判性思维能力评分,调查学生对教学模式的满意度。结果观察组学生英语听力、笔试部分成绩均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组评判性思维能力各项评分、总分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组学生对教师态度、主动讲解、课堂气氛、教学设计以及教学实施方面满意度高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论对分课堂与项目式教学模式在医学英语教学中的融合应用,在提高学生考核成绩、评判性思维能力评分作用显著,学生对教学模式满意度高,可广泛推广。