摘要：为探究牦牛骨形态发生蛋白(Bone morphogentic protein 7,BMP7)生物学特性和对雌性牦牛生殖生理的调控作用。研究基于牦牛BMP7基因(NW_005392954.1)设计引物,以发情期牦牛的卵巢、子宫的cDNA为模板进行扩增,借助DNAMAN 8.0等软件、NCBI等网站对扩增产物进行生物信息学分析。通过western blot和qRT-PCR对牦牛的卵巢、子宫的BMP7蛋白和mRNA进行定量分析,结果表明:扩增的BMP7基因为428 bp,编码142个氨基酸,其基因序列与水牛、奶牛和山羊等反刍动物的同源性均可达到98.59%,且在0~29位氨基酸存在信号肽,属于分泌型蛋白。western blot和qRT-PCR结果显示发情期卵巢表达量显著高于子宫(P<0.05)。研究结果表明,BMP7可能参与调控牦牛的繁殖性能,为牦牛在高压低氧环境下生殖生理机制方面的研究提供参考。

摘要：为建立一种操作便捷、灵敏度高、特异性强且便于基层兽医检测羊传染性脓疱病毒(ORFV)的方法,本研究基于ORFV-VIR基因设计了外引物F3、B3和内引物FIP、BIP共2对引物,对其进行扩增并连接至载体pMD19-T,构建阳性质粒pMD19-T-VIR。通过设置60℃~67℃温度梯度,比较优化了检测ORFV的LAMP反应条件。比较普通PCR、RT-PCR与LAMP这三种检测方法的特异性和敏感性,选择最优检测方法应用于后续临床样品的检验。结果显示,LAMP检测63℃下孵育40 min,羟基萘酚蓝可通过肉眼直接观察测定结果;特异性结果显示,ORFV与山羊痘病毒(GTPV)、绵羊痘病毒(SPPV)、牛O型口蹄疫病毒(FMDV)的核酸均无交叉反应;敏感性分析LAMP最低检测量是PCR的10倍,为5.1×10^(1)copies/μL,与RT-PCR相同。临床样品检测结果显示,LAMP阳性检测率为38.346%,远高于普通PCR的阳性率(13.46%)。结果表明,LAMP法具有检测操作简便、灵敏高、耗时少等优点,适合基层检测,可作为ORFV临床检测的候选方式。

摘要：本研究旨在根据鸡新城疫病毒(Newcastle disease virus)F基因序列,利用Oligo 7设计RPA引物以及nfo探针,建立快速检测新城疫病毒的结合胶体金试纸条的RPA检测方法。在试验中,对探针浓度、引物浓度、反应温度、反应时间进行了优化;并将检测结果与荧光RT-PCR商品化试剂盒的检测结果进行了比较。结果显示,本方法采用50μL体系,37℃20 min即可对新城疫病毒F基因进行快速检测。该方法灵敏度高,特异性强,重复性好,检测结果与荧光RT-PCR商品化检测试剂盒检测结果一致,为养殖场检测新城疫病毒提供了一种简便可靠的检测方法。

摘要：目前详细的羊传染性脓疱病原学流行病学调查资料相对匮乏,本试验采取羊传染性脓疱基线调查抽样设计,对2021年崆峒区羊传染性脓疱流行病学调查分析,进一步了解羊传染性脓疱在崆峒区地区的三间分布、风险环节、流行特点及其规律,为崆峒区制定羊传染性脓疱病的综合防控措施提供全面科学理论支持。

摘要：目的对规模羊场常用疫苗,即羊小反刍兽疫疫苗、口蹄疫疫苗和羊痘疫苗联合免疫程序进行优化设计。方法分别设置口蹄疫疫苗组、小反刍兽疫疫苗组和山羊痘疫苗组、两两免疫组和三种疫苗同时免疫组来分别免疫绵羊,测定各试验组免疫后7 d、14 d、21 d、28 d、60 d、90 d、150 d的实验羊免疫血清抗体产生情况及抗体存续时间。结果:小反刍兽疫疫苗免疫效果最优为单独免疫组,口蹄疫疫苗免疫效果最优为口蹄疫、小反刍兽疫联合免疫组,羊痘疫苗免疫效果最优为羊痘单独免疫组。结论可采用口蹄疫、小反刍兽疫联合免疫,羊痘单独免疫的免疫模式,既可以减少免疫副反应又能提高免疫效果,同时降低了免疫接种的劳动强度。

摘要：随着计算机技术的发展，计算机已成为工厂化畜牧业经营管理和现代育种规划的重要工具。计算机信息管理系统是工厂化养猪工艺的组成部分，是体现一个猪场管理现代化程度的标志。对提高生产效率，降低劳动强度、生产成本起着重要作用。其应用主要包括饲料配方设计、辅助生产...

摘要：按照单因子试验设计将比利时兔、新西兰白兔和加利福尼亚兔作为三个试验处理，进行生产性能观察和比较。结果表明，比利时兔妊娠期长、生长速度快、成活率高，新西兰白兔和加利福尼亚兔屠宰率和净肉率高。在陇东农村宜大力推广比利时兔。

摘要：试验设计了7个猪精液常温保存的稀释液配方,通过测定有效存活时间、总存活时间、存活指数、抗温力、顶体形态等项目,筛选出了2号配方,主要成分为葡萄糖、卵黄、安钠咖、青链霉素。在13—15℃条件下,有效存活时间为112.5小时,总存活时间215.5小时。用2号配方稀释液稀释精液保存2—3天,输配母猪,情期受胎率为79.3%,总受胎率93%。

摘要：环介导等温扩增技术是一门新兴的分子生物学检测技术,已广泛用于各种微生物的检测。通过对环介导等温扩增技术的原理、引物设计遵循原则、操作程序简要说明,对近年来环介导等温扩增技术在细菌、RNA病毒、DNA病毒引起的动物传染病中研究和具体应用进展做了重点综述,并对其研究应用前景进行了展望,为该技术广泛应用于动物传染病的诊断提高参考。

摘要：目的建立检测家兔豆状囊尾蚴感染的滚环扩增(RCA)方法。方法以家兔血清中豆状囊尾蚴来源的novel⁃miR1为诊断靶标,设计连接序列和锁式探针,并对连接序列和锁式探针的比例、反应时间、酶用量、dNTP用量以及扩增反应时间等5个重要条件进行优化,建立检测豆状囊尾蚴感染的RCA方法。将novel⁃miR1标准品倍比稀释为1 fmol/L至100 nmol/L的9个不同浓度的样品,评价RCA方法的灵敏度。用优化后的RCA方法分别检测健康家兔和豆状囊尾蚴感染家兔血清miRNA各20份(实验室保存样品),并通过受试者工作特征(ROC)曲线分析其敏感性和特异性。20只雌性家兔每只经口感染1000个豆状带绦虫虫卵,采集感染前和感染后每个月的家兔血样制备血清miRNA,用优化后的RCA方法进行检测,评价其应用效果。结果电泳结果显示,RCA扩增产物的DNA停留在加样孔中,形成一条明亮条带。反应条件优化试验结果显示,连接序列浓度为2μmol/L、锁式探针浓度为1μmol/L(连接序列和锁式探针的比为2∶1)、T4 DNA连接酶为350 U、连接180 min时连接效率最高。在100μl的扩增体系中,dNTP浓度为0.5μmol/L,扩增240 min时,RCA扩增效果最佳。优化后RCA的最低检测浓度为10 pmol/L。RCA检测健康家兔和豆状囊尾蚴感染家兔血清miRNA样品的平均荧光值分别为53.298±1.707和97.498±5.892,差异有统计学意义(t=7.206,P<0.01)。ROC分析结果显示,当阳性临界值为61.69时,RCA方法的敏感性和特异性均为95%,AUC为0.9550,似然比为19.00。RCA检测豆状囊尾蚴感染后不同时间的家兔血清miRNA结果显示,20份感染前的血清中19份检测结果为阴性,1份为阳性;感染后1个月的血清中,17份为阳性,2份为疑似,1份为阴性;感染后2个月的血清,1份为阴性,其余为阳性;感染后3个月的血清,3份为阴性,其余为阳性。结论建立了检测家兔豆状囊尾蚴感染的RCA方法,该方法在豆状囊尾蚴感染后3个月内的家兔血清中检出novel⁃miR1,具有良好的应用潜力。