摘要：本研究通过高通量测序技术检测了寨卡病毒(ZIKV)感染组、血餐对照组和糖水对照组埃及伊蚊中肠组织小RNA的丰度,并筛选出差异表达的6个黄病毒NIRVS和9个棒状病毒NIRVS。针对筛选出的6个NIRVS设计引物用两步法逆转录荧光定量PCR(RT-qPCR)方法验证了ZIKV感染第4、7和10天中肠组织中黄病毒NIRVS片段的表达。结果显示,黄病毒NIRVS AeFlavi53在感染第4、7天均上调,结果与小RNA测序一致,AeFlavi34B和AeFlavi4A在感染第4天上调,第10天下调,但在第7天表达无变化,与小RNA测序结果不一致,其余片段表达量在感染组与对照组间无统计学差异。RT-qPCR与高通量测序的结果一致性差,其原因可能是因为细胞中长链piRNA前体受上游转录和下游酶切多个程序的调节,针对其设计引物进行定量检测的结果不稳定。

摘要：第一代移动生物安全三级实验室（移动P3）是按照国标GB19489—2004《实验室生物安全通用要求》标准设计建设，其主体由2台车载方舱组成。展开使用时，主、辅舱通过桥接形成“三区两缓”的整体结构，实现其高等级生物安全防护的功能。生物战、生物恐怖袭击以及自然原因所致疫情突发时，移动P3能够及时抵达现场，就地展开烈性病原体相关的实验室工作，弥补中心实验室与疫情现场距离过远、延误病原体分离检测时机的问题。

摘要：本研究旨在建立一种以白纹伊蚊Actin基因表达量作为参照的登革Ⅱ型病毒一步法实时荧光定量PCR检测技术,为登革病毒在蚊虫中的定量检测提供更准确的检测方法。根据登革Ⅱ型病毒和白纹伊蚊Actin基因保守区序列设计引物和探针,在检测体系中同时加入病毒和Actin基因的特异性引物,计算每个样本中病毒含量与Actin表达量的比值,得到更为准确的定量结果。该方法重复性好、灵敏度高,可用于实验室白纹伊蚊感染登革Ⅱ型病毒的病毒载量检测。

摘要：目的研制蚊虫嗅觉风洞并通过实验验证其性能,用于驱避剂筛选和评价。方法采用低成本、模块化的方案,设计并研制一套蚊虫嗅觉风洞,通过不同温度、湿度、风速等环境因素的调试,确定实验关键因素;通过埃及伊蚊、致倦库蚊对4种商用驱避剂涂抹人手臂和小鼠的嗅觉行为测试,验证该嗅觉风洞应用于蚊虫驱避剂筛选的可行性。结果研制的蚊虫嗅觉风洞主要分为气路控制系统和行为筛选系统两部分;不同温度、湿度、风速等环境因素测试结果显示,温度(30±2)℃、湿度(40±3)%、风速0.2 m/s为嗅觉风洞对蚊虫嗅觉行为测试的最佳因素;未使用驱避剂时,风洞内人手臂对埃及伊蚊的引诱率为(44.1±23.1)%,小鼠对致倦库蚊的引诱率为(35.6±5.1)%,均明显高于空白对照(P<0.05)。4种商业化驱避剂对埃及伊蚊的引诱率分别为(4.4±0.4)%、(2.7±0.2)%、(3.6±1.2)%和(3.6±1.2)%,对致倦库蚊的引诱率分别为0%、0%、(3.8±3.3)%和(3.8±1.6)%,与对照组相比,使用驱避剂后人手臂和小鼠对蚊虫的引诱能力明显降低,均存在显著性差异(P<0.05)。结论研制出一套蚊虫嗅觉风洞,通过2种蚊虫对现有商业化驱避剂的嗅觉行为测试,验证了该嗅觉风洞的性能,可用于蚊虫驱避剂的筛选和评价。

摘要：本文旨在建立检测登革1型和2型病毒的一步法实时荧光定量PCR方法,为登革热的诊断和预测提供技术支撑。依据登革1型和2型病毒的保守区序列设计引物和探针,建立了同时检测两个血清型登革病毒的一步法实时荧光定量PCR方法。特异性实验结果显示,该方法可检测出登1型和2型病毒,与登革3型、4型病毒、黄热病毒、流感H3N2病毒均无交叉反应,具有较好的特异性。对登革1型和登革2型的灵敏度均为102copies/μL。应用该方法,可检测出登革1型和2型病毒混合感染C6/36后不同时间点病毒复制动态。在两个血清型登革病毒混合感染C6/36细胞72~120 h登革2型病毒的拷贝数与单独感染时登革2型病毒的拷贝数相比显著下降。上述研究证实建立的一步法实时荧光定量PCR方法具有特异性好灵敏度高、重复性好等特点,能够用于登革型和2型病毒混合感染样本的检测。