摘要：目的建立地鼠多瘤病毒（hamster polyomavirus，HaPyV）PCR检测方法，并应用于乙型脑炎减毒活疫苗生产过程中地鼠肾细胞的感染检测。方法设计针对HaPyV衣壳蛋白VP1基因片段的特异引物，以含HaPyV VP1片段的质粒PMDl9T—HaPyV688为模板进行PCR扩增并测序确认扩增产物。以多种病毒DNA为模板进行PCR扩增，并对扩增产物进行斑点杂交鉴定以验证PCR方法的特异性。将定量的质粒PMD19T-HaPyV68810倍系列稀释后进行PCR敏感性检测。以小鼠多瘤病毒（murinepolyomavirus，MuPyV）检验PCR法对质粒DNA和病毒DNA检测的一致性。应用建立的方法对生产用地鼠肾细胞悬液进行HaPyVDNA检测。结果仅含有质粒PMDl9T—HaPyV688和MuPyVDNA的样品能够扩增出600bp的片段，经斑点杂交及测序证明其分别为HaPyV和MuPyV的VPl特异基因片段。PCR所能检出的PMD19T—HaPyV688和MuPyV的最少DNA拷贝数分别为5300和590。7个亚批生产用地鼠肾细胞悬液的HaPyV检测结果均为阴性。结论建立的PCR方法具有较高的敏感性和特异性，可用于生产用地鼠肾细胞HaPyV感染的检测。

摘要：目的研究我国人群中诺如病毒(norovirus,NoV)GⅠ.1和GⅡ.4型特异性IgG、IgA和组织血型抗原(histo-blood group antigen,HBGA)阻断抗体水平,从血清学角度认识我国诺如病毒流行情况,为疫苗研发、临床实验和疫苗免疫策略的设计提供数据参考。方法采用间接ELISA法和HBGA受体阻断试验,对采集自广州、襄阳和烟台的839份自然人群(年龄跨度为6月龄至88周岁)血清中NoV特异性IgG、IgA和HBGA阻断抗体进行检测并对检测结果进行统计学分析。结果人群NoV GⅠ.1和GⅡ.4型特异性IgG抗体总阳性率为91.9%和93.0%,IgA抗体总阳性率为48.6%和75.6%,HBGA阻断抗体效价分别为5.04(95%置信区间:4.63~5.49)和18.15(95%置信区间:16.11~20.44)。IgG和IgA抗体阳性率均随年龄呈上升趋势。各年龄组GⅠ.1和GⅡ.4特异性IgG抗体阳性率范围分别为79.2%~100.0%和76.7%~100.0%,其中0.5~<1岁为81.7%和85.0%,1~<2岁为79.2%和76.7%,至12~<18岁增加至98.1%和96.3%,其后分别维持在96%和98%以上。各年龄组GⅠ.1特异性IgA抗体阳性率范围为11.7%~93.8%,其中0.5~<1岁为11.7%,随年龄增加快速上升,至45~<60岁和≥60岁达到93.3%和93.8%;GⅡ.4型特异性IgA抗体阳性率范围为50.8%~88.8%,其中0.5~<1岁为50.8%,12~<18岁开始达到并保持在86.7%~90.7%。GⅠ.1型HBGA阻断抗体效价总体呈随年龄上升趋势,其中0.5~<12岁各年龄组抗体效价显著低于18岁及以上各年龄组(GMT:2.98~4.07 vs 8.21~11.62,P<0.001),12~<18岁年龄组抗体效价显著低于45岁及以上各年龄组(GMT:5.21 vs 11.03~11.62,P<0.05),差异均有统计学意义;GⅡ.4型HBGA阻断抗体效价未见明显的随年龄变化趋势,仅在2~<5岁和22~<45岁人群间具有统计学差异(GMT:26.73 vs 11.87,P<0.01)。结论获得了我国中东部地区人群血清中NoV GⅠ.1和GⅡ.4型特异性IgG、IgA和HBGA阻断抗体数据,揭示了其在不同年龄组的分布规律,为我国NoV疫苗的研发提供了初步的血清流行病学资料。