摘要：目的构建筛选出靶向特异uPA-siRNA慢病毒表达载体,感染软骨细胞后观察其对软骨细胞增殖及代谢的影响。方法根据siRNA原理设计、构建4对靶向兔uPA siRNA序列(P1、P2、P3和P4),用RT-PCR筛选出高效靶向的P2序列。各序列经慢病毒包装后,通过Lipofectamine 2000转染入兔软骨细胞后,用RT-PCR和Western blot法分别检测uPA-siRNA对细胞内uPA mRNA和蛋白表达水平的抑制效果,用CCK-8法检测uPA-siRNA对软骨细胞增殖的影响。结果成功构建4对uPA-siRNA序列并筛选出用于后续实验的高效靶向P2序列,各序列经慢病毒载体包装并成功转染到原代软骨细胞中,在感染复数(MOI)为100时感染率达到85%以上。P1、P2、P3和P4均可抑制软骨细胞中uPA基因及蛋白的表达,但P2沉默效果最好,基因抑制率达到70%,感染后软骨细胞的增殖受到促进。结论成功构建高效靶向uPA-siRNA慢病毒载体,证实其可稳定转染软骨细胞并高效抑制uPA基因表达并促进软骨细胞增殖。

摘要：目的优选枸杞提取工艺。方法以枸杞水提液中多糖含量为指标,采用均匀设计法筛选最佳提取工艺。结果枸杞提取工艺最好参数条件为加水量12倍,浸泡时间20 min,煎煮时间20 min,水提液枸杞多糖含量为333.4 mg。结论实验结果可为枸杞提取工艺的确定提供依据。

摘要：目的评价循环肿瘤细胞(CTC)检测在晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者中的临床意义。方法选择2011年6月—2012年2月石河子大学医学院第一附属医院收治的晚期原发NSCLC患者30例为肺癌组,收集同期入院治疗的肺良性疾病及健康志愿者各10例为对照组,采用密度梯度离心法联合免疫荧光法检测NSCLC患者化疗前后及对照者外周血CTC表达情况,并分析其与临床特征、疗效的关系。结果对照组外周血中未检出CTC,肺癌组患者外周血中18例(60%)检出CTC,两组CTC阳性率比较,差异有统计学意义(P=0.001)。CTC阳性与NSCLC患者年龄、性别、是否吸烟、组织学类型、分化程度均无关(P>0.05);与患者病理分期有关(P0.05),且两种方法具有一定的吻合度(κ=0.557)。相关分析显示,CTC数目与临床疗效呈负相关(r=-0.434,P=0.017)。结论治疗前CTC阳性率与NSCLC患者临床分期相关;同时发现其与疗效具有相关性,通过CTC数目可以预测晚期NSCLC患者的化疗疗效。

摘要：目的探讨分拣蛋白SNX 10基因在宫颈癌组织及细胞中的表达水平及其与HPV感染的关系,探讨SNX 10基因对宫颈癌细胞增殖及凋亡的影响。方法采用组织芯片法分析SNX10蛋白在正常宫颈及宫颈癌组织中表达情况。设计SNX 10基因的ShRNA干扰片段分别转染宫颈癌SiHa细胞和HeLa细胞,实验组包括:转染Sh-SNX10-303和Sh-SNX10-647的细胞组,未转染的细胞和非干扰转染细胞(NC组)为对照组。Western blot及qRT-PCR方法检测SNX 10基因在宫颈癌细胞中蛋白质及mRNA表达水平,通过第二代杂交俘获技术(hybrid capture system-2,HC-2)检测宫颈组织中HPV感染情况,CCK-8实验检测细胞增殖情况,流式细胞术分析干扰SNX 10基因表达后细胞凋亡率的变化。结果组织芯片实验发现宫颈癌组织细胞中,SNX10基因高表达,差异显著(P0.05);在干扰SNX10基因的表达之后,宫颈癌SiHa和HeLa细胞的增殖受到抑制,并且其凋亡率也升高(P<0.05)。结论SNX10基因对HPV感染没有影响,但在宫颈癌组织和细胞中高表达,SNX10基因可能作为一个靶标用于宫颈癌的预防和治疗。

摘要：用均匀设计法考察了超声频率、超声时间和溶剂用量对苦杏仁油提取率的影响，得到提取 苦杏仁油的优化超声工艺条件。与常规提取法相比，超声法提取具有提取时间短、收率 高、无须加热优点。

摘要：医学院校“课程思政”改革有现实的校情、教情和学情。在《医学导论》“课程思政”改革探索与实践中,教学内容突出政治性、思想性和有效性,教学设计重视发挥隐形教学的育人作用,教学实施把握全过程育人,教学评价体系重视学生参与度,成为学校医学专业“课程思政”建设的示范课。因此,培育和建设医学特色“课程思政”教育理念、内容体系、保障体系,是医学专业“课程思政”改革的必然选择。

摘要：医学专业课程中蕴含着丰富的科学精神和人文精神,是课程思政资源的重要组成部分。医学院校“课程思政”改革有现实的校情、教情和学情,尚未形成科学合理地教学体系。本研究以《医学微生物学》为例,从教学内容、教学方法探讨医学专业“课程思政”改革的思路,医学专业“课程思政”改革,要培育德医双修的教育理念、加强医学专业“课程思政”的顶层设计、建设医学专业“课程思政”的内容体系、发挥教师的“课程思政”关键作用。

摘要：基于问题的学习(problem-based learning,PBL)模式强调把学习置于真实的问题情景中,以问题为学习的起点,通过小组合作,在分析问题、探究问题、最终解决问题的过程中学习隐含于问题背后的科学知识,形成解决问题的能力,并发展自主学习和终生学习的能力。[第一段]

摘要：以社会医学课程思政建设为例,从学情分析、教学设计基本思路、课程思政教学内容的安排与实施几个方面,探索课程思政的教学设计实践路径,以期为其他医学人文类课程的课程思政建设提供参考。

摘要：目的使用CRISPR/Cas9技术构建稳定敲除PAX3-FOXO1融合基因的人腺泡状横纹肌肉瘤(ARMS)细胞系(RH30),并验证PAX3-FOXO1功能。方法运用在线网站针对PAX3、FOXO1设计sgRNA,选择切割效率最高的一组构建LV-PAX3-sgRNA、LV-FOXO1-sgRNA及LV-Cas9慢病毒载体;LV-Cas9病毒感染RH30细胞,潮霉素筛选后,通过RT-PCR及qRT-PCR检测RH30-Cas9细胞中Cas9基因表达;LV-PAX3-sgRNA及LV-FOXO1-sgRNA慢病毒载体分别感染RH30-Cas9细胞,流式分选筛选荧光阳性细胞;Sanger测序、PCR等分别验证RH30-PAX3-KO细胞及RH30-FOXO1-KO细胞中PAX3-FOXO1表达;EDU、TUNEL、Transwell实验检测敲除RH30-PAX3-KO细胞及RH30-FOXO1-KO细胞功能改变。结果成功构建靶向PAX3、FOXO1的CRISPR/Cas9慢病毒载体;PCR验证稳定表达Cas9的RH30细胞系(RH30-Cas9)构建成功;PCR、Western Blot验证靶向PAX3或FOXO1均成功敲除RH30中PAX3-FOXO1融合基因;靶向PAX3或FOXO1抑制RH30细胞增殖、侵袭、迁移,促进凋亡。结论使用CRISPR/Cas9成功构建敲除PAX3-FOXO1的RH30细胞系;敲除PAX3-FOXO1抑制了RH30细胞增殖、迁移等恶性生物学行为。