摘要：[目的]构建通过表达dsRNA,诱导植物基因沉默机制可抗2种病毒的表达载体。[方法]根据已报道番茄花叶病毒(ToMV)的运动蛋白基因(MP)和黄瓜花叶病毒(CMV)的沉默抑制子基因(2b)的核苷酸序列设计特异性引物,扩增到部分△MP和2b基因;然后通过重组PCR技术将2个病毒基因进行融合,获得长度为676 bp的融合基因△MP-2b。再将融合基因以反向重复的方式与大豆内含子相连,并定向插入到植物表达载体pBIN438上35S启动子下游。[结果]构建了含两种不同病毒来源基因的植物表达载体pBIN438△MP-2b(i/r)。酶切和PCR鉴定证明所构建的载体与预期的设计完全一致。[结论]为利用RNA沉默原理进行植物广谱抗病研究奠定了基础。

摘要：以异常毕赤酵母(Pichia anomala)0732-1为试材,对其抑菌产物发酵条件进行了响应面优化,并对其产物进行抑菌效果测定。利用Plackett-Burman试验,分析了5种因素对其产物抑菌的影响,确定培养液初始pH值、温度、装样量为影响其抑菌的重要因素。经最陡爬坡试验确定各因素峰值后,利用Box-Behnken试验设计和响应面方法(RSM)分析得到最优发酵条件为培养液初始pH 9.4、培养温度25℃、装样量61 mL/150 mL。在此优化条件下,抑菌圈直径为17.9 mm,较优化前提高了32.6%。

摘要：[目的]筛选出有效提高加工番茄抗盐性的丛枝菌根真菌。[方法]在温室盆栽试验条件下,分别接种Glomus mosseae、***、G intraradices和*** 4种AM真菌并设计了无盐和0.3%NaCl胁迫处理,测定接种4种AM真菌对加工番茄幼苗株高、单叶叶面积、叶绿素含量、湿重、干重、地上部和地下部N、P元素含量生长效应指标。[结果]在0.3%NaCl胁迫条件下,对加工番茄促生效应最好的是***和***。接种后加工番茄植株单株干重比对照增加65%和60%;地上部N含量比对照提高了66.48%和40,54%,地上部P含量比对照提高了69.76%和79.06%。[结论]***和***接种加工番茄可有效提高加工番茄的耐盐性,具有较好的应用前景。

摘要：利用基因沉默的原理构建了能转录产生dsRNA,诱导植物发生RNA沉默的沉默载体。根据已报道的番茄花叶病毒(ToMV)的运动蛋白基因(MP)和黄瓜花叶病毒(CMV)的沉默抑制子基因(Rep)的核苷酸序列设计特异性引物,扩增到△MP基因片段和Rep基因片段;然后通过重组PCR技术将2个病毒基因进行融合,获得长度为711bp的融合基因△MP-Rep。将融合基因以反向重复的方式与大豆内含子相连,得到含有融合基因反向重复序列的重组质粒pBlue SK-Intron△MP-Rep(i/r)。再用限制性内切酶BamHⅠ切下包含Intron在内的反向重复的融合基因,并定向插入到植物表达载体pBIN438上,构建了含2种病毒基因的植物表达载体pBIN438△MP-Rep(i/r)。酶切和PCR鉴定证明所构建的载体与预期的设计完全一致。该研究结果为利用RNA沉默原理进行植物广谱抗病研究奠定了基础。

摘要：为了明确侵染新疆椒样薄荷的病毒种类,从伊犁采集了2株表现明显病毒症状的病株。通过dsRNA分离、单引物扩增、克隆和测序,从椒样薄荷病样中获得352bp核苷酸序列。序列分析结果表明,该片段为黄瓜花叶病毒(CMV)1a基因的部分序列。根据所获病毒信息,针对CMV 2a基因、2b基因和CP基因设计了3对特异引物,对病株进行了相应目标基因的RT-PCR,结果均扩增到预期的目标片段。对其中1个目标片段进行克隆和测序,获得了包含CMV CP基因在内的774bp核苷酸序列。该研究结果表明,新疆椒样薄荷受到CMV侵染。

摘要：为了提高球孢白僵菌CXJ-1(Beauveria bassiana CXJ-1)在液体发酵过程中分生孢子的产孢量,采用响应面法对球孢白僵菌CXJ-1产孢的发酵工艺条件进行优化。采用单因素实验确定了产孢发酵条件最适初始pH、发酵转速和发酵温度。通过Plackett-Burman实验设计和Box-Behnken实验设计响应面分析优化,确定了球孢白僵菌CXJ-1产孢最佳发酵工艺参数为:温度28.07℃,转速198.95r/min,初始pH 6.10,预测孢子浓度可达9.5×108个/mL,在优化发酵条件下进行验证实验,孢子浓度达到9.7×108个/mL,表明验证值和预测值有较高的吻合度。

摘要：为了获得以沼液为基质的枯草芽孢杆菌S37的最优发酵培养基,以S37生物量含量为评价指标,采用单因子试验、正交试验对枯草芽孢杆菌S37的发酵培养基进行单因素多水平和多因素多水平考察。结果表明:最优发酵培养基为MgSO4·7H2O 1.6g/L、KNO30.6g/L、CaCO32.3g/L、玉米粉2g/L、KH2PO42.6g/L、豆粕3.0g/L。最佳培养基条件下,枯草芽孢杆菌生物量吸光值达到1.005,其OD600值比优化前的0.275提高了2.65倍。筛选出了发酵枯草芽孢杆菌的最佳培养基配方,为以沼液为基质发酵枯草芽孢杆菌S37工业化生产提供了技术依据。

摘要：为提高链霉菌菌株LG-9发酵液的抑菌活性,在单因素试验的基础上,利用Minitab软件中的Plackett-Burman设计和响应面分析,以发酵液对棉花黄萎病菌(Verticillium dahliae)的抑菌圈大小为响应值,对链霉菌LG-9的液体发酵条件进行优化。结果表明,菌株LG-9的最佳发酵条件为250 m L三角瓶装样量101.19 m L、培养基初始p H 7.2、接种量7.5%、温度31.32℃、转速160 r/min和摇培时间69.02 h。在此条件下的抑菌圈直径大小为22.45 mm,较未优化前提高10.43%。