摘要：目的采用铜离子梯度法制备盐酸米托蒽醌脂质体(Mit-lipo),将其与盐酸米托蒽醌游离药(Mit-free)进行了药效学和药动学对比研究。方法采用正交设计法,以包封率为考察指标,优化盐酸米托蒽醌脂质体的制备工艺和处方。采用L1210/BDF1小鼠腹水瘤模型探讨盐酸米托蒽醌脂质体的抗肿瘤作用;KM小鼠单次静脉给予盐酸米托蒽醌脂质体和盐酸米托蒽醌游离药观察药动学参数变化。结果最佳处方和工艺条件为:采用铜离子梯度法制备脂质体,药脂比为1∶10,内相溶液为0.3mol·L-1,pH 7.5的硫酸铜溶液,孵育温度为60℃,孵育时间为30 min。盐酸米托蒽醌脂质体的平均粒径为(99.5±1.9)nm,包封率为(95.0±0.6)%。药动学实验结果表明,与盐酸米托蒽醌游离药相比,盐酸米托蒽醌脂质体在小鼠体内的AUC和t1/2更高,盐酸米托蒽醌脂质体具有长循环的特点。药效实验结果表明,盐酸米托蒽醌脂质体可显著延长荷瘤鼠的生存时间,且毒性小于盐酸米托蒽醌游离药。结论铜离子梯度法制备得到的盐酸米托蒽醌脂质体具有较高包封率,与盐酸米托蒽醌游离药相比在体内的动力学参数发生了改变,可以提高治疗指数。

摘要：目的:建立灵敏、准确、高效的液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定比格犬血浆中SYHA 136的浓度,并将该方法应用于新药SYHA136在比格犬体内的药动学研究,为其临床试验设计提供数据支持。方法:血浆样品以蛋白直接沉淀法进行预处理,内标为阿哌沙班,色谱柱为UPLC BEH C18(50 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相由水相A(1 mmol·L^-1甲酸铵-5%乙腈)和有机相B(乙腈)组成,采用二元泵进行梯度洗脱,洗脱程序如下:0~2 min:20%B→90%B,2~3.5 min:90%B,3.5~5 min:20%B,柱温设置为50℃,流速为0.3 mL·min^-1,进样量为5μL。采用电喷雾电离源(ESI),正离子多反应扫描模式(MRM),SYHA136及其内标离子监测通道为m/z 488.0→471.0和m/z 460.0→443.0。比格犬单次灌胃(ig)给予1,3,10 mg·kg^-1 SYHA136,并设置3 mg·kg^-1 SYHA136多次(连续7 d)灌胃给药组,所有给药组按照设定的时间点收集不同时间点全血样品(1 mL),分离得到血浆,进行LC-MS/MS定量分析,获得各个血浆样品中SYHA136的浓度数据,应用WinNonlin 6.3药代软件,选择非房室模型统计矩法计算药代参数。结果:SYHA136线性范围为0.005~5μg·mL^-1,灵敏度、选择性良好,无残留,日内与日间精密度(RSD)均小于9.88%。结论:该LC-MS/MS检测方法快速、精确、简便,可用于比格犬血浆中的SYHA136浓度的测定及其药代动力学研究。药代动力学研究结果表明SYHA136在比格犬体内吸收迅速,血药浓度呈一定剂量依赖性,且多次给药不会产生蓄积,药动学行为良好。

摘要：目的研究健康人群在空腹和餐后单剂量口服盐酸克林霉素胶囊受试制剂和参比制剂是否具有生物等效性(BE)。方法采用随机、开放、单剂量、单中心、自身交叉设计,液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)法测定健康受试者空腹(n=24)或餐后(n=24)给药后血浆中克林霉素的药物浓度,使用Phoenix WinNonlin软件(Certara USA Inc,7.0)计算药动学参数,使用SAS 9.2软件进行生物等效性评价。结果空腹生物等效性(BE)试验:24名健康受试者分别单次空腹服用克林霉素受试制剂和参比制剂0.15 g后,Cmax、AUC0-t及AUC0-∞的几何均值的比值分别为92.29%,95.32%和95.59%,90%CI分别为84.12%~101.27%,90.14%~100.79%和90.49%~100.98%,均落在等效区间80.00%~125.00%;餐后生物等效性(BE)试验:24名健康受试者分别高脂餐后服用受试制剂和参比制剂0.15 g后,Cmax、AUC0-t及AUC0-∞的几何均值的比值分别为95.79%,100.92%和101.65%,90%CI分别为87.75%~104.56%,93.48%~108.95%和94.09%~109.81%,均落在等效区间80.00%~125.00%。结论两制剂在空腹和餐后条件下,具有生物等效性。

摘要：目的建立饮用水大肠埃希菌的双重PCR检测方法,并评价效果。方法选取大肠埃希菌的保守序列16SrRNA基因E-16SrDNA和乳糖操纵子LacI基因序列E-LACI作为双重PCR方法的两段扩增基因,根据GenBank上已知序列设计合成两段基因引物,使用大肠埃希菌标准菌株构建双重PCR方法。使用双重PCR方法和国标法同步检测所采集水样中的大肠埃希菌,对比评价双重PCR方法的真实性、可靠性和预测概率。确定双重PCR方法检验水样中大肠埃希菌的应用范围。结果成功构建饮用水中大肠埃希菌检测的双重PCR方法,本方法最低检测限为40 CFU/L,灵敏度为66.7%,特异度为100%,阳性预测值为100%,阴性预测值为97.7%,与国标法的一致率为97.8%。结论本研究所建立的饮用水中大肠埃希菌双重PCR检测方法具有较高的真实性和灵敏性,适用于饮用水中大肠埃希菌的快速检验。

摘要：目的:优化伏立康唑磺丁基醚-β-环糊精包合物的制备工艺。方法:采用振荡法制备伏立康唑磺丁基醚-β-环糊精包合物,将伏立康唑包合率作为指标,采用星点设计法,设定三因素五水平考察包合温度、包合时间、磺丁基醚-β-环糊精与伏立康唑投料比对包合工艺的影响,并分别进行多元线性、二项式方程和三项式方程拟合,建立模型,效应面法选取最优工艺。结果:伏立康唑磺丁基醚-β-环糊精包合工艺为:包合温度32℃、时间1.9 h、磺丁基醚-β-环糊精与伏立康唑投料比2.1∶1,伏立康唑的包合率预测值与实际值的偏差为2.6%。结论:以星点设计-效应面法建立的数学模型预测效果良好,该方法适用于伏立康唑磺丁基醚-β-环糊精包合物的制备工艺优化。

摘要：　　N-(3-甲胺基丙基)四氢呋喃-2-甲酰胺(1)是制备阿夫唑嗪的重要中间体,阿夫唑嗪临床上广泛用于治疗前列腺增生[1].有关1的合成,文献[2]采用由3-甲胺基丙腈(2)与2-四氢呋喃甲酰氯(3)缩合生成N-(3-丙氰基)-N-甲基四氢呋喃-2-甲酰胺,再在高温、高压下催化氢化转位制得1.由于反应条件苛刻且使用贵重金属催化剂致使生产成本较高,为了避免高温、高压等苛刻的反应条件,设计了由N-甲基丙二胺(4)在水溶液中以盐酸成盐保护、用3直接酰化的方法制备1,从而使反应条件温和、步骤减少,便于工业化生产.……

摘要：目的：研究两种辛伐他汀片的人体相对生物利用度，评价其生物等效性。方法：20名健康男性志愿者按照2制剂2周期的随机交叉试验设计，分别13服单剂量参比制剂和受试制荆，剂量均为20mg，采用液相色谱-串联质谱法测定人血浆中辛伐他汀的浓度，用DAS1．0软件计算各药代动力学参数并进行生物等效性统计分析。结果：受试制剂和参比制剂的主要药动学参数：cmax分别为（3．72±1．77）和（4．02±2．30）ng／ml；tmax分别为（1．5±0．8）和（1．3±0．5）h；AUC0-12h分别为（12．11±7．33）和（12．21±5．92）ng·h·ml^-1；AUC0-∞分别为（15．52±9．79）和（15．48±9．65）ng·h·ml^-1；t1/2分别为（6．5±4．2）和（5．8±4．7）h。两制剂的cmax、tmax、AUC0-12h和AUC0-∞均元显著性差异，双单侧t检验结果表明，受试制剂cmax的90％置信区间落在参比制剂的70％-143％范围内，受试制剂AUC的90％置信区间均落在参比制剂的80％-125％范围内，受试制剂的相对生物利用度为（103．4±32．6）％。结论：两制剂具有生物等效性。

摘要：构建C群脑膜炎奈瑟菌外膜蛋白Nhh A重组载体p ASK-IBA37plus-nhh A。以脑膜炎奈瑟菌C群菌株为实验材料,根据Gene Bank上的已知序列设计引物,通过聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增C群脑膜炎奈瑟菌外膜蛋白Nhh A基因(nhh A)。将nhh A与p ASK-IBA37 plus质粒用EcoRI,Xho I进行双酶切并尝试不同条件进行连接;连接产物实现在大肠杆菌TOP10感受态细胞中的转化。使用验证质粒图谱初筛和PCR与EcoRI,Xho I双酶切双重验证法复筛的方式筛选p ASKIBA37plus-nhh A阳性转化子。最后将构建好的p ASK-IBA37plus-nhh A进行基因测序。成功构建C群脑膜炎奈瑟菌外膜蛋白Nhh A重组载体p ASK-IBA37plus-nhh A,同时发现nhh A与p ASK-IBA37plus摩尔数之比为5.1、连接体系20μL、DNA终浓度为1.7 ng/μL时,获得的转化子阳性率能达到18.8%,且转化子菌落总数数量适中,方便后续筛检。同时,测序得到1 797 bp的nhh A序列信息,在Gen Bank上进行序列相似性比对,发现该基因与脑膜炎奈瑟菌NGH38的外膜蛋白GNA992(Neisseria meningitidis strain NGH38 outer membrane protein GNA992)基因的相似性为98%。

摘要：目的：研究2种曲克芦丁片的人体相对生物利用度，评价其生物等效性。方法：20名健康男性志愿者按照2制剂2周期的随机交叉试验设计，分别单剂量口服参比制剂和受试制剂，剂量均为900mg，采用液相色谱-串联质谱法测定人血浆中曲克芦丁的浓度，用DAS1．0软件计算各药代动力学参数，并进行生物等效性统计分析。结果：受试制剂和参比制剂的主要药代动力学参数：cmax分别为（1．83±0．90）和（2．02±1．54）ng／ml；tmax分别为（1．20±0．50）和（1．00±0．40）h；AUC0-12h分别为（8．48±3．74）和（8．51±5．44）ng·h·ml^-1；AUC0-∞。分别为（9．47±4．55）和（9．97±6．15）ng·h·ml^-1；t1／2分别为（2．80±2．00）和（4．00±2．40）h。2种制剂的cmax、tmax、AUC0-12b和AUC0-∞均无显著性差异，双单侧t检验结果表明，受试制剂cmax的90％置信区间落在参比制剂的70％-143％范围内，受试制剂AUC的90％置信区间均落在参比制剂的80％-125％范围内，受试制剂的相对生物利用度为（113．6±39．5）％。结论：曲克芦丁片2种剂具有生物等效性。

摘要：目的优化多西他赛白蛋白纳米粒(DTX-HSANps)的处方和制备工艺,并对其进行初步的质量评价。方法采用NabTM技术制备DTX-HSANps,通过Plackett-Burman实验设计,对DTX在油相中的浓度、人血白蛋白(Humanserumalbumin,HSA)在水相中的浓度、水相溶液的pH、油水相体积比、乳化器的转速和均质压力共6个因素进行考察,以粒径、稳定性及过药量作为指标,筛选影响产品质量的关键因素。采用Box-Behnken效应面法筛选最优的处方工艺,对样品的粒径、包封率、载药量、微观形态进行表征。结果确定HSA在水相中的浓度、水相溶液的pH和均质压力为影响产品质量的关键因素。根据最佳处方工艺制备三批样品,冻干复溶后,DTX-HSA Nps的粒径为(107.3±1.3)nm,PDI为(0.123±0.012),载药量为(3.9±0.2)%,包封率为(92.0±0.6)%。结论所制备的DTX-HSANps粒径分布均匀,理化性质稳定,具有较高的产品开发价值以及较好的临床应用潜力。