摘要：目的:构建并表达抗人精浆蛋白/抗CD3的双特异性单链抗体(BsscFv),并检测其生物学活性。方法:利用重叠延伸拼接PCR,拼接抗人精浆蛋白scFv基因和抗CD3scFv基因,并在中间引入柔性短肽(GlySerGly)2,构建抗人精浆蛋白/抗CD3的BsscFv基因。测序正确后,将融合基因亚克隆入真核表达载体中,并在HeLa细胞中进行表达,采用流式细胞术(FCM)和51Cr释放试验,评价BsscFv的抗原结合活性和体外介导的特异性杀伤靶细胞的效应,以及利用裸鼠前列腺癌模型观察其在体内的抑瘤作用。结果:测序分析证实,Bss-cFv基因片段的大小为1.5kb,编码500个氨基酸,该序列与设计的完全一致。SDS-PAGE和Westernblot分析证明:表达产物存在于HeLa细胞的培养上清中,其相对分子质量(Mr)为61000。FCM结果显示:BsscFv可特异性的结合前列腺癌细胞LNCaP和CD3+淋巴瘤细胞Jurkat,结合率分别为54.1%和53.7%。体外实验表明,BsscFv可介导CTL对LNCaP细胞的杀伤。与对照组相比较,接种LNCaP的裸鼠在体内注射激活的CTL和BsscFv治疗后,肿瘤的生长明显受到抑制(P<0.05)。结论:抗人精浆蛋白/抗CD3的BsscFv具有一定的生物学活性,在体内、体外均可介导CTL杀伤靶细胞LNCaP。

摘要：目的 :探讨不同维持温度冷冻预处理超深低温保存对肌腱超微结构的影响 ,为同种异体肌腱保存移植提供依据。方法 :实验组设计维持温度为 -4 5℃、-5 0℃、-5 5℃、-60℃、-65℃、和 -70℃组 ,以 15 %二甲基亚砜为低温保护剂 ,对SD大鼠肌腱进行上述温度冷冻预处理 ,液氮中保存 1周 ,HE染色组织学观察和透射电镜肌腱超微结构观察。结果 :电镜下 -4 5℃组胶原纤维排列较稀疏 ;-60℃组多数腱细胞胞浆水肿 ,核膜不完整 ;-65℃组胞浆内细胞器破坏 ;-70℃组部分腱细胞坏死脱落。 -5 0℃组和-5 5℃组与对照组之间差异不明显 ,肌腱组织超微结构得到良好保持。结论 :肌腱组织冷冻预处理的维持温度在 -5 0℃～ -5 5℃之间 ,-5 0℃是肌腱组织冷冻预处理的最佳维持温度值 ,可获得具有大部分生物活性的肌腱。

摘要：一场秋雨一层凉．家在福州马尾区的赵炜豪老大爷又开始担心自己“扛不住”了．因为他每年换季时都会感冒。这些天．赵大爷正巧上药店买药．见到某保健品打着“提高免疫力”的广告语，就不由心动。那么，免疫力是不是越高越好，吃保健品真能提高免疫力吗？

摘要：通过总结所在军队医院卫勤分队模块化设计、训练和应用情况,探讨了模块化对卫勤分队工作效能的影响。

摘要：目的:为隐神经营养血管远端蒂皮瓣设计提出解剖学依据。方法:30侧经动脉灌注红色乳胶成年下肢标本,解剖观测内踝区动脉来源、分支、分布及吻合。结果:内踝区动脉有9个来源,构成3条纵向的血管网:(1)内踝前动脉和踝上支的前纵向血管网;(2)骨皮穿支的中纵向血管网;(3)胫后动脉肌问隙支和踝管动脉穿支的后纵向血管网。形成3个层面的血管网:(1)骨膜血管网;(2)深筋膜血管网;(3)皮神经浅静脉血管网。内踝区骨膜、筋膜、大隐静脉、隐神经和皮肤的营养血管同源。结论:内踝区血供来源为多源性,有明显的方向性,吻合十分丰富,可以设计3种包含浅深筋膜、皮神经、浅静脉及其营养血管的小腿内侧远端蒂皮瓣:(1)以胫后动脉肌间隙支为蒂,旋转轴点在内踝最凸出点上3cm;(2)以内踝前动脉筋膜穿支为蒂;(3)以踝管区动脉穿支为蒂,旋转轴点在内踝最凸出点平面。

摘要：目的:介绍近几年银杏叶提取物治疗老年病的概况,为其进一步的临床应用和科研设计提供参考资料。资料来源:检索清华全文数据库1994-01/2005-10关于银杏叶提取物和老年疾病、心脑血管相关的文章,限定文章语言种类为中文,检索词“银杏叶提取物,老年,心脑血管”。资料选择:对资料进行初审,选取包括处理组和对照组的文献,筛除明显不随机的研究,对剩余的文献开始查找全文。纳入标准为:①随机对照研究。②实验或临床研究包含平行对照组。③处理组为应用银杏叶制剂。排除标准:重复性研究。资料提炼:共收集到221篇关于银杏叶提取物治疗老年性疾病的随机和未随机研究文章,25个动物实验或临床研究符合纳入标准。排除的196篇文章,175篇为未随机研究或重复性研究,21篇为综述类文章。资料综合:25个试验包括约1099例患者和355只实验动物,证实了银杏叶提取物在糖尿病治疗方面具有调节血脂水平,从而改善胰岛抵抗作用;在高血压方面有效地改善老年高血压患者的高凝状态并改善血液流变性;在心脑血管方面能保护缺血性心肌,提高大鼠脑去甲肾上腺素、5-羟色胺含量,可通过上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达,对脑缺血再灌注损伤起保护作用,能够明显改善脑梗死伴糖尿病患者的各项血液流变学特性;在抗衰老、老年痴呆方面能保护脑组织ATP酶的活性,抑制氧自由基对线粒体核糖核酸的损害而延缓老年大鼠脑衰老的进程,改善老龄大鼠的学习和记忆功能。银杏叶提取物已用于高血压、糖尿病、脑衰老、老年痴呆、心脑血管等疾病的治疗;无副性事件报道。结论:银杏叶提取物是一种很有前途和价值的药物,在老年病的治疗领域中具有广阔的应用前景。

摘要：目的:探索基于人甲胎蛋白基因启动子构建的siRNA表达载体介导目的基因RNA干扰的可行性,为实现肝癌细胞靶向RNAi治疗作一初步研究。方法:PCR法扩增获得人甲胎蛋白基因启动子并插入pSilencerl．0-U6中以置换其U6启动子;依据hLRH-1基因RNAi靶位点设计出siRNA模板DNA,体外合成相应寡核苷酸片段后经退火形成短双链,再克隆构建成靶向人hLRH-1基因siRNA表达载体;脂质体转染法将上述重组质粒转入HepG2细胞中,实时定量PCR法初步分析所建系统在AFP表达细胞中触发靶基因hLRH-1的RNAi效应,以及hLRH-1调控下游靶基因的表达改变。结果:获得人甲胎蛋白基因启动子驱动的siRNA表达载体pSiAFP。所建的RNAi载体系统可在表达AFP的HepG2细胞中有效诱导靶基因hLRtH-1表达下调,抑制率约达85%;同时调控hLRH-1下游靶基因CyclinE1与Oct 4的表达相应下调。结论:人甲胎蛋白基因启动子驱动的siRNA表达载体可在表达AFP的HepG2细胞中有效介导靶基因的RNAi效应。

摘要：根据γ一刀的原理,我们利用^(60)CO放疗和模拟定位机,设计并研制了与之配套的准直仪及定位器。通过对16例脑深部小型肿瘤及AVM的等中心放疗,确立了靶点定位的方法,放射剂量的计算以及间歇性等中心放射治疗的设计.

摘要：目的:研制新型免缝合异种主动脉生物瓣膜,并在体外将其与临床常用机械瓣膜进行初步比较研究。方法:将无支架猪主动脉瓣缝合到NiTi形状记忆合金支架上,并在TH-1200型人工心脏瓣膜体外脉动流实验台检测自制的25#的新型瓣膜和临床常用机械瓣膜的平均跨瓣压差、有效开口面积及返流百分比情况。结果:免缝合异种主动脉生物瓣膜的设计和制作方法达到人工瓣膜的技术要求。自制的25#的新型瓣膜在模拟心输出量为3、4和5L/min的条件下进行测试的平均跨瓣压差(4.215±0.220)、(5.168±0.367)、(6.158±0.487)mmHg,有效开口面积(1.998±0.186)、(2.325±0.387)、(3.184±0.241)cm2及返流百分比(5.331±0.284)%、(4.984±0.521)%、(3.609±0.264)%符合国家标准。且各项指标优于机械瓣膜的指标。结论:该型瓣膜具有血流动力学良好,跨瓣压小,无需抗凝等优点,且简化了手术操作,降低了手术难度。新型瓣膜总体性能优于临床常用机械瓣膜。

摘要：目的:优选葛泽清肝胶囊的提取工艺。方法:采用L9(34)正交表设计试验,以葛花苷、23-乙酰泽泻醇B、丹酚酸B、丹参酮ⅡA和熊果酸的提取率及浸膏得率为考察指标,选择乙醇浓度、溶剂用量、提取时间和浸泡时间作为考察因素,每个因素各取3个水平,在此基础上,再进行提取次数考察。结果:采用70%乙醇浸泡1 h,热回流提取2次,每次1.5 h,溶剂用量第一次为12倍量,第二次为10倍量,葛花苷、23-乙酰泽泻醇B、丹酚酸B和熊果酸的提取率均达到83%以上,丹参酮ⅡA的提取率在74%以上。结论:优选的提取工艺对各指标性成分的提取率均较高,可增加各处方药材的利用率。