摘要：目的建立在体外快速回收人工肝丢弃血浆总蛋白的方法。方法设计一种梯度pH共沉淀法,从pH 7.3开始,逐滴加入1 mol/L柠檬酸溶液,5h加完,使溶液pH值呈渐进梯度变化,至终点pH 5.1,用此法配合盐析法(氯化钠饱和度33%,4℃反应5.5h)或低温乙醇沉淀法(乙醇体积分数为0.04,-7℃反应5.5h),使等电点在pH 7.3～5.1范围内的各蛋白连环碰撞聚集而析出,形成多蛋白共沉淀,再一并回收,弃上清液以清除毒物。结果在pH 7.3～5.1范围内,用梯度pH低温乙醇法和梯度pH盐析法分别回收了41%(25 g/61 g)和50%(29 g/57 g)的血浆蛋白,上清液中未回收的蛋白主要是白蛋白及其所结合的胆红素。两法回收的蛋白溶液中,TBil下降,分别为回收前的0.07%(低温乙醇法)和0.06%(盐析法),HBV DNA降为阴性(PCR)。结论在高浓度中性盐或低温乙醇条件下,渐进微调溶液pH值,可使一连串有相邻等电点的蛋白共沉淀,采用梯度pH共沉淀法可选择性快速回收人工肝丢弃血浆中总蛋白。

摘要：背景:在已有胶原溶液灭菌方法中,微孔膜过滤和紫外线照射可不降低溶液的黏性,但紫外线只能用于表层溶液或透明管道中溶液的灭菌,限制了紫外线的灭菌效率。如果能用紫外线使一个容器中上下各液层都受照射灭菌,就可省去紫外线灭菌的循环管道,可简化操作保持灭菌蛋白特性。目的:改进紫外线灭菌法,使之适用于胶原溶液的灭菌。设计、时间及地点:体外观察实验,于2000-02/2008-06在福州市传染病医院肝病研究所完成。材料:灭菌装置由紫外灯、反光罩(可罩于摇床上)、摇床和容盘组成。方法:①容盘置于摇床上。将待灭菌的酸性胶原溶液装入容盘,液层深8～12mm。②开动紫外灯和摇床,使容盘中溶液摇动混合、暴露深层受紫外线照射。③将经照射灭菌的胶原溶液pH调为7.4,使成凝胶。主要观察指标:①胶原溶液层厚、紫外线照射时间对灭菌效果(菌落计数)的影响。②将紫外照射后的胶原溶液pH调为7.4,形成凝胶时间。结果:①液层厚8mm照射30min的胶原溶液和液层12mm照射90min的胶原溶液,经培养均显示细菌和霉菌阴性。②将用本法灭菌的胶原溶液pH变为7.4后可在1h内形成凝胶。结论:紫外线摇动灭菌法简便有效,灭菌后不影响胶原溶液成凝胶性,适用于胶原及类似蛋白溶液的灭菌。

摘要：目的观察拉米夫定治疗后无良好应答的慢性乙型肝炎患者HBVP区变异情况与基因型的关系。方法对631例拉米夫定治疗后无良好应答的慢性乙型肝炎患者进行研究。通过荧光定量PCR或核酸测序确定HBV基因型，直接测序观察P区突变，实时荧光定量PCR方法检测患者病毒载量，比较不同基因型患者的HBVDNA水平及HBVP区变异情况。计量资料采用成组设计资料t检验，计数资料采用石。检验或Fisher精确检验。结果631例慢性乙型肝炎患者中，B基因型HBV感染者272例，C基因型感染者359例，C基因型感染者患者年龄为（39．1±11．4）岁，明显大于B基因型感染患者的（33．7±9．7）岁（t=-6．55，P〈0．01）。C基因患者病毒载量为（5．96±1．22）log10拷贝／ml，高于B基因型患者的（5．58±1．21）log10拷贝／ml，t=-2．01，P〈0．05。A181V／T变异在C基因型的发生率高于B基因型（0．4％比5．3％，χ2=12．23，p〈0．01），M204I／V、L180M、T184A／G／I／S、S202G／I和V173L变异发生率在B、C基因型之间差异无统计学意义（P值均〉0．05）。M204I在B基因型的发生率为20．6％，高于C基因型的13．9％（χ2=4．91，P〈0．05）；M204V和M201IV变异在B、C基因型中的发生率差异无统计学意义（χ2值分别为1．70和2．21，P值均〉0．05）。拉米夫定耐药发生率在B、C基因型间差异无统计学意义（χ2=0．00，P〉0．05）。结论拉米夫定常见耐药位点在B、C基因型之间无明显差异，但是C基因HBV感染患者病毒载量高于B基因型HBV感染患者；M204I变异在B基因型中出现频率高于C基因型，拉米夫定加用或改用阿德福韦酯后可能会使A181V／T变异在C基因型出现的概率高于B基因型；年龄、免疫因素和非常见位点的变异或许是影响拉米夫定疗效的重要因素。

摘要：建立灵敏度高、试剂安全测定血浆游离血红蛋白(FHb)的方法。用于各项溶血试验。其方法为设计改良Trinder反应的2,4-二氯酚(2,4-DCP)方法,并进行各项性能验证。结果显示:本法灵敏度是酚法的2.39倍,批内批间重复性好。呈色稳定,FHb参考值为1～36.7mg/L,以液体枸橼酸钠抗凝剂,保存红细胞最优。FHb2,4-二氯酚法无毒、无癌原性,适用临床及生物医学工程学的各项溶血试验。