摘要：背景:慢性病毒载体技术是目前转基因中最有效和最成功的方法,技术操作简便。目的:克隆转移抑制基因KiSS-1基因不含信号肽的表达序列,构建人KiSS-1基因的慢病毒表达载体。设计、时间及地点:开放性实验于2006-09/2007-12在福建师范大学发育学院实验室完成。材料:载体pNL-IRES2-EGFP由福建师范大学发育学院实验室保存。方法:从人正常胎盘组织中提取总RNA,经反转录-聚合酶链反应得到KiSS-1基因开放阅读框cDNA序列,并将其克隆到慢病毒载体pNL-IRES2-EGFP中,构建其表达质粒pNL-IRES2-EGFP-KiSS-1。主要观察指标:KiSS-1目的基因片段的克隆,重组表达质粒pNL-IRES2-EGFP-KiSS-1的酶切鉴定及测序。结果:经酶切鉴定和基因序列测定,证实重组入载体pNL-IRES2-EGFP的片段为目的基因开放阅读框的核苷酸序列。结论:成功构建了重组质粒pNL-IRES2-EGFP-KiSS-1。

摘要：背景:研究表明,透骨消痛颗粒通过有效抑制细胞因子、基质金属蛋白酶3、氧自由基的生物效应来延缓关节宏观形态、软骨基质及软骨细胞退变的作用。目的:验证透骨消痛颗粒含药血清促进骨髓间充质干细胞增殖和诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的影响。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-12/2007-08在福建中医学院中西医结合研究院分子生物学实验室完成。材料:选用清洁级4周龄SD大鼠80只。透骨消痛颗粒,由巴戟天、杭白芍、青风藤、川芎等组成,由福州屏山药厂制作。方法:取72只SD大鼠随机分为5组,透骨消痛颗粒的水提物高剂量组、水提物中剂量组、水提物低剂量组、醇提物组各16只,空白对照组8只,分别以含14,7,3.5g/(kg?d)药量的水溶液2mL灌胃,对照组以等量生理盐水2mL灌胃,2次/d,连续给药3d后,腹主动脉采血制备血清。从另8只4周龄SD大鼠骨髓中分离出骨髓间充质干细胞,体外传代培养,取第2代骨髓间充质干细胞分为空白对照组﹑软骨诱导剂组及透骨消痛颗粒组,通过透骨消痛颗粒含药血清诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化。主要观察指标:采用MTT法检测骨髓间充质干细胞增殖和免疫组织化学检测Ⅱ型胶原在细胞分化过程中的表达。结果:透骨消痛颗粒含药血清各组均能促进骨髓间充质干细胞增殖,与空白对照组相比差异均有非常显著性意义(P0.05)。透骨消痛颗粒含药血清能增强Ⅱ型胶原在细胞分化过程中的表达,与空白对照组相比差异有非常显著性意义(P<0.01),与软骨诱导剂组相比差异有显著性意义(P<0.05)。结论:透骨消痛颗粒含药血清能有效促进骨髓间充质干细胞增殖和诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化。

摘要：背景:临床和实验研究多方面证明,以活血化瘀中药治疗股骨头缺血坏死有较好的效果。目的:验证桃红四物汤对激素性股骨头缺血性坏死股骨头局部微血管密度的影响。设计、时间及地点:随机对照实验、重复测量设计,于2006-04/2007-10在福建中医学院中心实验室完成。材料:清洁级SD大鼠40只,雌雄各半,体质量(200±20)g。采用抽签法随机分为空白组4只和模型组36只。桃红四物汤由桃仁、红花、当归、川芎、白芍和熟地组成。方法:模型组每周2次腹腔注射醋酸泼尼松龙24.5mg/kg,经6周诱导出早期激素性股骨头缺血坏死的模型,空白组每周2次腹腔注射同等剂量的生理盐水。6周后处死空白组4只和模型组4只,进行光、电镜观察,确定造模成功。随后将其余32只模型组大鼠再随机分为治疗组16只和对照组16只,分别灌服桃红四物汤12.3mL/(kg·d)[相当于生药9.2g/(kg·d)]和等量生理盐水,于灌胃后第6,8周检测股骨头局部微血管密度的变化。主要观察指标:①股骨头组织超微结构。②苏木精-伊红染色股骨头组织形态学观察。③股骨头局部微血管密度检测结果。结果:光镜观察:激素可使模型组空缺骨陷窝数明显增多,骨小梁细疏,髓腔脂肪细胞增大、增多,与空白组有明显差异(P<0.01)。电镜观察:模型组骨细胞数量减少,退变固缩或出现出现脂滴,成骨细胞减少,髓内脂肪细胞增大、增多,空白组骨细胞富含粗面内质网,多聚核糖体多,线粒体发达,嵴结构清晰,核异染色质丰富,核仁可见。股骨头局部微血管密度:治疗组股骨头局部微血管密度逐渐增高,对照组股骨头局部微血管密度较治疗组明显减低,两组相比有明显差异(P<0.01)。结论:桃红四物汤可促进激素性股骨头缺血坏死股骨头局部微血管的生长,改善股骨头局部血运,促进坏死股骨头的修复。

摘要：背景:在前期实验的基础上,本实验进一步研究健骨颗粒对去卵巢骨质疏松模型鼠血清肿瘤坏死因子α、转化生长因子β1含量的变化及相关性,借以深入探讨其对骨代谢的调节作用。目的:观察去卵巢骨质疏松模型鼠血清中肿瘤坏死因子α、转化生长因子β1含量变化以及相关性,分析补肾健脾中药健骨颗粒对去卵巢骨质疏松模型鼠骨代谢的具体调节机制。设计:以实验动物为观察对象,通过摸球法进行随机化分组。单位:福建中医学院骨伤系、福建中医学院中心实验室。对象:对象的样本量为6月龄SD雌性大鼠50只,体重350～400g,随机分成5组,每组10只,以切除卵巢为模型,用单纯随机化方法分成5组,并规定第1组为假手术组,即行腹部切口但不切除卵巢。第2～5组为造模组,即进行腹部切口双侧卵巢切除术造模。其中第2组为单纯模型组;第3组为生理盐水组;第4组为骨松宝组(骨松宝成份:淫羊藿、川芎、牡蛎等);第5组为健骨颗粒组(健骨颗粒成份:煅狗骨、淫羊藿、党参等中药)。方法:假手术组只行腹部切口但不切除卵巢,将第2～5组切除卵巢造模。于术后3个月时腹腔注射麻醉药40mg/kg戊巴比妥处死假手术组和单纯模型组大鼠,经相关指标检测确定模型成立。第3～5组大鼠按照组别分别喂服生理盐水2mL/(kg·d)、骨松宝1.5g/(kg·d)和健骨颗粒2g/(kg·d),统一于术后第13周,即模型成立后给药,用药12周后在麻醉状态下统一处死。取颈动脉血检测血清中肿瘤坏死因子-α、转化生长因子-β1及雌二醇的含量,结果用x±s表示,组间比较用t检验。主要观察指标:去卵巢后12周及喂服药物12周后各组大鼠血清肿瘤坏死因子α、转化生长因子β1、雌二醇的含量以及其相关性。结果:①去卵巢后12周,随着雌二醇水平下降,血清肿瘤坏死因子α含量明显升高,而转化生长因子β1浓度却明显降低。②当喂服健骨颗粒12周后,血清雌二醇和转化生长因子β1浓度[(54.05±15.92),(9.12±1.79)ng/L]回升明显,与同期生理盐水组相比[(27.24±2.99),(5.53±1.46)ng/L]差异有显著性意义(t=5.234,t=4.907,P<0.01),而肿瘤坏死因子α含量与生理盐水组相比却出现下降[(32.44±3.42),(65.86±35.36)ng/L,t=2.975,P<0.05]。③血清肿瘤坏死因子α与雌二醇含量呈负相关(r=-0.324,P<0.05);血清转化生长因子β1与雌二醇含量呈高度正相关(r=0.673,P<0.01);血清肿瘤坏死因子α与转化生长因子β1亦呈负相关(r=-0.387,P<0.02)。结论:健骨颗粒通过调整骨质疏松模型鼠体内雌二醇水平,制约肿瘤坏死因子α的合成、分泌及其活性,解除对转化生长因子β1的抑制作用,使破骨细胞的骨吸收活动减弱,成骨细胞的骨形成作用增强,改善骨代谢的负平衡。

摘要：应用生物陶瓷远红外线系列产品,先后组织10多所医院临床应用524例,治疗病症包括腰肌劳损、颈椎病、腰椎间盘突出症、各种骨折复位后、急性腰扭伤、软组织挫伤、网球肘、痛经、急性周围型面瘫、烧伤、急性附件炎、癌症疼痛、乳腺增生、烧伤、心肺等病症,总有效率达90.65%.为进一步明确其临床疗效评价，设计了腰肌劳损的对照研究,结果表明具有加速劳损修复的作用,经统计学处理,意义非常显著,现综合报告如下.

摘要：背景:绝经后妇女易于发生骨质疏松,不同年龄和体质量的人群,其骨量丢失的规律不同。目的:分析年龄、绝经年限、绝经年龄、身高、体质量及人体质量指数对绝经后妇女骨密度的影响。设计:以绝经妇女为研究对象,随机抽样检测。单位:一所省级中医药研究院药品临床研究基地,一所大学医院骨科及一所大学骨伤系。对象:2000-09/2003-08福州地区自然绝经后妇女603例。方法:采用随机抽样方法,记录患者年龄、绝经年限、绝经年龄、身高、体质量及人体质量指数,采用双能X射线骨密度仪检测腰椎和股骨颈、大转子及Ward's区骨密度,用SPSS软件相关回归分析。主要观察指标:年龄、绝经年限、绝经年龄、身高、体质量和人体质量指数与骨密度的相关性及回归方程。结果:绝经后妇女的年龄、绝经年限、体质量和人体质量指数与腰椎、股骨颈、大转子及Ward's区骨密度的相关性十分显著;低体质量组骨密度明显低于超体质量组(P<0.01);影响腰椎、大转子骨密度的主要因素为年龄和体质量,影响股骨颈骨密度的重要因素为绝经年限和体质量。影响腰椎骨密度的因素依次为年龄、体质量和绝经年龄,回归方程:y=0.927-0.0093X1+0.0037X2+0.004X3,影响股骨颈骨密度的因素依次有绝经年限、体质量和绝经年龄,回归方程:y=0.687-0.0081X1+0.0048X2-0.

摘要：探讨健骨颗粒对去势骨质疏松模鼠骨密度 ( BMD)以及血清骨钙素 ( BGP)的影响。方法 :建立大鼠去卵巢骨质疏松模型 ,随机分成四组 :A生理盐水组、B骨松宝用药组、C健骨颗粒中剂量用药组、D健骨颗粒大剂量用药组。按设计分批取材 ,检测 BGP浓度和 BMD。结果 :用药 6周时 ,与 A组对比 ,各组 BGP无明显变化 ,仅 D组的腰椎密度提高 ( P<0 .0 5 ) ;用药 1 2周时 ,B、C、D组的 BMD明显上升 ,BGP显著下降 ,有统计学意义。结论 :健骨颗粒能够扭转去卵巢大鼠的高骨钙素变化 ,降低高骨转换率 。

摘要：背景:治疗型关节炎护膝具有通经活络、疏导瘀滞、行气活血的作用,已证实是防治膝骨性关节炎行之有效的医疗仪器。目的:通过观察兔膝骨性关节炎关节软骨组织的病理变化,探讨治疗型关节炎护膝的治疗作用。设计、时间及地点:随机对照动物观察,于2006-01/10在解放军南京军区福州总医院动物实验中心及病理中心完成。材料:健康6月龄日本大耳白兔54只,由无锡市惠山江南动物实验中心提供。治疗型关节炎护膝由福建中医学院和福州大学生物医学研究所共同研制,包括疏密波、热软膜程序,两种程序联合为温热动态干扰变频疏密波。微波仪产地日本。方法:取10只兔作为正常对照组,剩余44只采用改良Hulth法建立膝骨性关节炎模型,造模后随机分为模型对照组9只、微波对照组9只、疏密波组9只、热软膜组8只、疏密波+热软膜组9只。造模后7d开始每日强迫兔活动30min,之后正常对照组、模型对照组不进行任何干预,其余组兔固定后分别对应给予微波仪治疗、疏密波治疗、热软膜治疗、疏密波+热软膜联合治疗,30min/次,1次/d,连续16周。主要观察指标:通过CR片、光镜和电镜观察膝关节组织形态学变化。结果:干预16周后,CR片显示正常对照组关节间隙正常,关节面平整光滑,无骨赘;模型对照组内侧间隙明显变窄,有明显骨赘。光镜下正常对照组关节软骨四层结构清晰可辨,软骨细胞排列整齐呈柱状,染色质分布均匀,细胞核清晰;模型对照组关节软骨层变薄,部分区域软骨细胞核固缩、坏死,软骨细胞排列紊乱,四层结构不易分辨。电镜下正常对照组软骨细胞呈椭圆形,细胞及胞膜完整,包质内可见丰富的粗面内质网、高尔基体、线粒体,细胞核完整,染色质分布均匀;模型对照组软骨细胞明显固缩且外形不规则,细胞周晕消失,胞浆内细胞器凝成高电子密度的片状物不易分辨,细胞核不规则,染色质浓聚,散裂于核中。疏密波+热软膜组在病理程度上的改变明显轻于模型对照组,软骨表面裂纹少,胶原纤维结构基本完整,固缩的软骨细胞少,虽可见部分退变的软骨细胞,但部分软骨细胞具有较多的细胞器,某些区域形成软骨细胞簇。微波对照组、单纯疏密波组、单纯热软膜组膝关节组织形态学变化介于模型对照组和疏密波+热软膜组之间。结论:治疗型关节炎护膝的疏密波+热软膜程序能延缓膝关节软骨宏观形态、软骨细胞及软骨基质的退变,效果优于微波仪治疗或单纯的疏密波、热软膜治疗。

摘要：[目的]通过计算机三维有限元方法,了解在应力状态下不同材料的人工髋关节假体组合对骨界面的应力分布规律,从生物力学角度为人工髋关节的临床应用和设计制造提供有益的参考。[方法]采用三维有限元法对全髋置换前后进行单髋站立生物力学测试,分析假体植入前后股骨和髋臼总体的应力模式和植入后各种组合的假体对骨界面的应力分布规律。[结果]1、各种假体置换后等效应力(vonMises)峰值均位于假体远端相应股骨区域,但应力峰值有所下降,以股骨距区下降最为明显,遮挡率最大,而以弹性模量较钛合金低的CFR/PSF作为柄的股骨的相应区域的遮挡率较低。2、各种组合的假体对股骨界面的应力从近端至远端均呈逐渐增高趋势,而对于相同的柄比较而言,不管是金属-金属、陶瓷-陶瓷、陶瓷-聚乙烯还是金属-聚乙烯组合,其相应界面应力值无明显差别(P>0.05),但以CFR/PSF作为柄对股骨相应界面存在较高的应力。3、置换前在髋臼顶穹部存在较高应力,并逐渐向周围递减;置换后应力主要集中在髋臼的周边区域,但从髋臼顶部→后下→前下呈逐渐递减趋势;而在相同区域的不同组合其界面应力值无明显差别(P>0.05)。[结论]1、各种假体植入后均在股骨距处形成较高的应力遮挡,而用弹性模量较低的CFR/PSF作为柄,其股骨相应区域的应力遮挡率较低,但股骨相应界面应力较大,而界面应力过大是产生假体微动主要因素。2、股骨界面从近端至远端呈逐渐增高趋势的应力规律符合该假体的设计原理;相同假体柄的不同组合其股骨和髋臼相应界面应力值无明显差别,实验表明力学因素并不是选择假体组合的主要标准。

摘要：目的 :观察解毒化瘀汤灌洗治疗大鼠慢性骨髓炎的疗效。方法 :建立慢性骨髓炎动物模型 ,随机分成 3组 :中药组、抗菌溶液组及生理盐水组 ,闭式灌洗治疗 1月 ,按设计分期观察白细胞计数、血清溶菌酶含量、骨 X线、病理组织学等指标。结果 :中药组与生理盐水组之间有非常显著性差异 ( P<0 .0 1 ) ;在血清溶菌酶、骨 X线指标方面 ,中药组明显优于抗菌溶液组 ( P<0 .0 5)。结论 :解毒化瘀汤有效抑制慢性骨髓炎的发展过程 ,可能与其提高机体免疫能力有关。