摘要：从地衣分离获得了Bt菌株BRC-ZQL3,为提高其产孢水平,应用数学统计方法对该菌株发酵培养基进行优化.通过单因子分析,研究碳源、氮源、初始pH等因子对产孢的影响;再采用2水平Plackett-Burman设计,筛选影响产孢的8个因子,实验结果表明培养基成分中3个重要影响的因子,分别为CaCO3、玉米粉、酵母膏;利用响应面分析法对以上3个因子进行3水平的优化,获得了最佳培养基,其配方质量分数为:黄豆饼粉2%、玉米粉0.42%、酵母膏0.39%、磷酸二氢钾0.025%、七水硫酸镁0.035%、碳酸钙0.04%,初始pH值为7.2.优化后产孢水平达到3.92×108mL-1,与响应面数学模型的预测值只有2.9%的误差,比初始发酵培养基产孢水平提高了60.66%.

摘要：采用二次回归旋转组合设计方法,对苏云金杆菌WB7菌株的培养基配方进行了摇瓶优化筛选。建立了产孢量与五种原料的数学模型,分析了各试验因子的单因素效应和互作效应。试验所得的最佳培养基组合为:玉米淀粉3.3%,黄豆饼粉4%,酵母粉0.725%,蛋白胨0.4%,鱼粉1.05%。

摘要：通过设计蛋白酶基因引物,对苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)库斯塔克亚种菌株8010蛋白酶基因进行克隆,获得了6个蛋白酶基因片段,即中性蛋白酶A、色氨酸合成酶β链、色氨酸合成酶α链、碱性蛋白酶A、磷酸化水解酶和糖原磷酸化酶基因,以及1个未知功能的DNA片段(可能是编码蜡质芽孢杆菌组特有蛋白的基因).

摘要：为提取短短芽胞杆菌FJAT-0809-GLX的胞内代谢物质,利用超声波破碎其细胞,对胞内代谢物质进行优化提取。在超声波输出功率、超声时间以及料液比进行单因素试验的基础上,利用Design-expert进行试验设计,响应面优化得到胞内代谢物质的最佳提取工艺。单因素试验结果表明,当超声时间为30min时,获得的胞内代谢物质较多,胞内代谢物质得率为11mg·g^(-1);超声波功率为100 W时,所得胞内代谢物质得率最高,为9.33mg·g^(-1);料液比1∶25时所得胞内代谢物质得率最高,为12.22mg·g^(-1)。进一步通过响应面优化发现,超声时间、超声功率、料液比3个因素对胞内代谢物质得率的影响程度依次为:料液比>超声破碎时间>超声功率。最佳超声波提取方法为:超声功率为318.68 W,超声时间为10min,料液比为1∶25,在此条件下提取的胞内代谢物质得率为12.987 8mg·g^(-1)。

摘要：苏云金芽孢杆菌是世界上应用最为广范的微生物刹虫剂,但其发酵成本较高。综述了固态、液态发酵原料的研究进展,分析了污水、污泥等作为原料发酵生产Bt杀虫剂的可能性和应用前景。

摘要：根据蜡状芽胞杆菌plcR基因和papR基因序列设计特异引物,对6个Bt菌株(WB1、WB7、WB9、HD98、8010、8311)及5个Bc菌株(6A1、6A2、6A3、6A4、6S1)进行了PCR检测。结果显示,3个Bt菌株及4个Bc菌株含有plcR-papR基因。克隆了Bt8010、Bc6A2和6A3的plcR、papR基因,核苷酸序列分析表明,三个菌株的plcR、papR基因与NCBI数据库中的Bt、Bc及Ba相应序列都有很高的相似性。Bt8010的plcR基因编码框由846个核苷酸组成,可编码282个氨基酸;papR基因的编码框由144个核苷酸组成,可编码48个氨基酸。推导的氨基酸序列分析表明,Bt8010的PapR有21个氨基酸的信号肽序列,PlcR没有信号肽序列。与Bc6A2、6A3和Bc 569相比,Bt8010的PlcR和PapR在氨基酸序列上与Bc相应序列存在相对较大的差异。将plcR-papR基因连接到表达载体pHT304中,并转化至大肠杆菌JM109中成功进行了表达,为研究Bt plcR基因的功能奠定了基础。

摘要：主要对松材线虫的取样分离进行探索,并初步研究了以真菌作为食料培养松材线虫。结果表明:取样部位对分离效果有影响,蛀孔及蛹室周围分离到的线虫量明显比枝条及树干其他部位多;不同真菌培养松材线虫效果有差异,主要采用了灰葡萄孢、黄瓜镰刀菌和香蕉镰刀菌3种真菌,通过设计不同影响因素比较培养效果,发现灰葡萄孢培养效果较为稳定且最佳,其次是黄瓜镰刀菌。因此,灰葡萄孢和黄瓜镰刀菌可选用于培养松材线虫。

摘要：为提高昆虫病原真菌莫勒菌产孢量,通过正交试验设计L_(9)(3^(4)),对莫勒菌培养基成分进行筛选和优化。结果表明,有助于莫勒菌产孢的碳源、氮源、金属离子和维生素分别为7 g·L^(-1)可溶性淀粉、10 g·L^(-1)酵母浸粉、4×10^(-4)mol·L^(-1)Fe^(2+)和50 mg·L^(-1)V_(C)。莫勒菌在优化培养基上培养2周后的产孢量可达1.2×10^(8)孢子·cm^(-2),比优化前提高60倍。

摘要：在大肠杆菌中表达苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)cry2Ac4基因;笔者以含有BtWB9菌株cry2Ac4基因的质粒pMD2Ac为模板,利用cry2Ac4基因的特异引物对(ET-F/ET-R)扩增获得该基因,进而将cry2Ac4基因与pET-29a原核表达载体连接;成功构建了重组表达载体并转化大肠杆菌JM109,从阳性转化子中提取重组表达质粒pET-29a-cry2Ac4,再转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,经IPTG诱导后,对诱导表达产物进行了SDS-PAGE检测;cry2Ac4基因编码的约70kDa蛋白在大肠杆菌中得到了高效表达。

摘要：豇豆重花叶病毒(Cowpea severe mosaic virus,CPSMV)是我国进境植物检疫性有害生物,本研究根据CPSMV的外壳蛋白基因序列设计引物,以期建立CPSMV的反转录-环介导等温扩增(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)检测方法。条件优化后,建立了CPSMV的RT-LAMP方法,该方法可将CPSMV与同属其他病毒准确区分,具有良好的特异性。灵敏度试验显示,RT-LAMP比普通RT-PCR灵敏度高10倍。说明本研究建立的RT-LAMP方法适用于CPSMV的快速、特异和灵敏的检测。